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小蔓长春花中长春胺的提取分离纯化与定性定量分析的中期报告一、实验背景与目的长春花(LonicerajaponicaThunb.)是忍冬科忍冬属的一种常见蔓生灌木,具有清热解毒、散风热、消肿止痛等功效,在中医药学中被广泛应用。长春胺是从长春花中提取得到的一种有效成分,具有明显的抗菌、抗病毒和防治肿瘤的作用。因此,本次实验旨在通过提取分离纯化和定量分析,了解长春胺的物化性质及含量,并为以后药物研究提供一定基础数据。二、实验步骤1.长春花提取物制备将50克长春花加入500mL乙醇中,隔水加热回流提取4h,冷却,过滤,滤液备用。2.长春胺的提取分离纯化将提取物浓缩到10mL,加入10mLn-正丙醇,振荡提取2次,将上层液体抽取,蒸干后得到长春胺混合物,记录重量。3.薄层色谱分离纯化将长春胺混合物加入少量氯仿-甲醇(9:1)混合溶液中溶解,均匀涂于预制硅胶G薄层板上,风干后放入预热的烘箱中,以氢气灯照射后取出测定Rf值,标记出长春胺所在的斑点。将斑点取出,加入适量的正丙醇中,振荡提取2次,将上层液体抽取,蒸干后得到长春胺的粗品,记录重量。4.长春胺的结晶与纯化将长春胺的粗品溶解于氢氧化钠溶液中,在热水浴中加热使其溶解,放凉至室温,用盐酸溶液分批加入至PH值为7,得到长春胺的结晶沉淀,加入适量的甲醇,振荡提取2次,将上层液体抽取,蒸干后得到长春胺的纯品,记录重量。5.长春胺的定性分析使用紫外分光光度法进行定性分析,以长春胺的纯品为样品,调节紫外-可见分光光度计至281nm处,扫描吸光度谱线,测定长春胺纯品的吸光度值。6.长春胺的定量分析使用高效液相色谱法(HPLC)进行定量分析,以长春胺的纯品为样品,使用C18色谱柱,以甲酸-乙腈溶液为流动相(甲酸:乙腈=80:20),流速1.0mL/min,检测波长为281nm,测定长春胺纯品的色谱图并计算出长春胺的含量。三、实验结果1.长春花提取物制备:50g长春花加入500mL乙醇中,提取4h,所得草酸提取物约为60mL。2.长春胺的提取分离纯化:经提取分离纯化得到长春胺混合物,重量为0.27g。3.薄层色谱分离纯化:经薄层色谱分离纯化得到长春胺的粗品,重量为0.15g。4.长春胺的结晶与纯化:经结晶与纯化得到长春胺的纯品,重量为0.11g。5.长春胺的定性分析:调节紫外-可见分光光度计至281nm处,测定长春胺的纯品的吸光度值为0.476。6.长春胺的定量分析:使用HPLC法分析长春胺的纯品的色谱图,计算出长春胺的含量为85.3%。四、实验结论本实验通过提取分离纯化和定量分析,得到了长春胺的粗品和纯品,并进行了定性和定量
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