GB∕T 8313-2018 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法

(ISO14502-1:2005,Determinationofblacktea—Part1:ContentoftotalusingFolin-Ciocalteureagent;ISO14502-2:2005,Determinationcharacteristicofgreenandblacktea—Ptea—Methodusinghigh-performanceliquidchromatography,NEQ)国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会I本标准代替GB/T8313—2008《茶叶中茶多酚和儿茶素含量的检测方法》。与GB/T8313—2008 化学试剂(见3.3.6,2008年版的5.5) 本标准使用重新起草法参考ISO14502-1:2005《绿茶和红茶中特征物质的测定第1部分：福林酚 1GB/T8303茶磨碎试样的制备及其干物质含量测定(GB/T8303—2013,ISO1572:1980,3.3.570%甲醇水溶液。2素(EGC)2.00mg/mL,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)2.00mg/mL,表儿茶素没食子酸酯ECG50μg/按GB/T8302的规定按GB/T8303的规定3.4.3.2.1母液：称取0.2g(精确到0.0001g)均匀磨碎的试样(3.4.2)于10mL离心管中，加入在70℃浸提10min(隔5min搅拌一次),浸提后冷却至室温，转入离心机在3500r/min转速下离心10min,将上清液转移至10mL容量瓶。残渣再用5mL的70%甲醇水溶液提取一次，重复以上操作。合并提3梯度条件：100%A相保持10min;V15min内由100%A相→68%A相、32%B相；68%A相、32%B相保持10min;待流速和柱温稳定后，进行空白运行。准确吸取10μL混合标准系列工作液注射入HPLC。在相色谱图参见附录A。 (2)A——所测样品中被测成分的峰面积；fsa——所测成分的校正因子(浓度/峰面积，浓度单位为微克每毫升pg/mL);W——样品的干物质含量(质量分数),%;d——稀释因子(通常为2mL稀释成10mL,则其稀释因子为5)。儿茶素类相对咖啡碱的校正因子见表1。4c(%)=CEcc(%)+cc(%)+cec(%)+CEcc(%)+cEcc(4.3.370%甲醇水溶液。4.3.4福林酚(Folin-Cio4.3.510%福林酚试剂(现配):将20mL福林酚试剂(4.3.4)转移到200mL容量瓶中，用水定容并5刻度试管内，在每个试管内分别加入5.0mL的福林酚试剂(4.3.5),摇匀。反应3min～8min内，加入4.0mL7.5%碳酸钠(Na₂CO₃)溶液(4.3.6),加水定容至刻度、摇匀。室温下放置60min。用10mm比色皿、在765nm波长条件下用分光光度计测定吸光度(A、A。)。4.4.2.2根据没食子酸工作液(4.3.8)的吸光度(A)与各工作溶液的没食子酸浓度，制作标准曲线。4.5结果计算4.5.1计算方法比较试样和标准工作液的吸光度，按式(4)计算：A——样品测试液吸光度；A₀——试剂空白液吸光度；SLOPEsa——没食子酸标准曲线的斜率；m——样品质量，单位为克(g);d——稀释因子(通常为1mL稀释成100mL,则其稀释因子为100);W——样品干物质含量(质量分数),%。4.5.2重复性同一样品茶多酚含量的两次测定值相对误差应≤5%,若测定值相对误差在此范围，则取两次测定值算术平均值为结果，保留小数点