粪便检验-粪便OBT检查（临床检验技术）

粪便检查检查目的、标本采集1粪便化学检查2CONTENTS

学习要点血试验原理方法学评价及临床意义质量控制检查目的、标本采集01检查目的（一）协助消化道感染性疾病的诊断01腹泻粪便的外观和性状有助于腹泻的诊断02细菌性痢疾脓血粘液便，以脓和粘液为主。呈鲜红粘胨状，无臭味，03溶组织阿米巴痢疾脓血粘液便，以血为主，常与粪便并存而不混合。呈果酱色，有腐臭。04细菌性食物中毒（二）肠道寄生虫感染的诊断和鉴别诊断（三）粪便检查可用于消化道出血的诊断：

⑴上消化道出血、下消化道出血鉴别

⑵

消化道溃疡、消化道肿瘤出血的鉴别

消化道溃疡隐血试验呈间断性阳性

消化道恶性肿瘤隐血试验呈持续性阳性

（四）其他根据粪便的性状和组成，可间接地判断胃肠、胰腺、肝胆系统的功能状况。02标本采集（一）容器要求最好用一次性使用的塑料盒。(二）标本采集要求

1．常规标本检查(1)应采集新鲜标本，外观异常取含脓血、粘液等异常部分；外观无异常粪便应从浅、深处粪便多处取材；标本应无尿液、药物的污染。(2)及时检查，1h内检查完毕

2、化学隐血试验试验前三日禁食肉类、含动物血和某些蔬菜等食物，并禁服铁剂和VitC等药物。粪便化学检查01隐血试验

消化道出血量少时，肉眼及显微镜下均不能证实出血，称为隐血。

隐血试验（occultbloodtest，OBT）是指用化学或免疫学的方法证实微量血液的试验。检测原理血红蛋白中的含铁血红素有类似过氧化物酶的作用，可催化分解过氧化氢，释放出新生态氧，氧化色原使之呈色。化学法抗人血红蛋白抗体或抗人红细胞基质抗体与人血红蛋白或红细胞结合免疫法1．化学法

根据色原物质邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、联苯胺法

根据反应试剂状态或试剂载体湿化学、干化学试纸法。①灵敏度：邻联甲苯胺、邻甲苯胺、还原酚酞法最灵敏，可检出0.2～1.0mg/L的血红蛋白;中度敏感的试验有联苯胺法(淘汰)、匹拉抗米酮法及无色孔雀绿法，可检出1～5mg/L的血红蛋白,临床上多采用中度灵敏方法。方法学评价②特异性和准确性：受食物、药物、试剂等多种因素影响，容易出现假阳性或假阴性。假阳性

外源性动物食品生食蔬菜（萝卜、甘蓝）、药物（铁剂、铋剂）

假阴性

血红蛋白被分解

大剂量服用VitC

试剂过期①试验器具洁净、不得含有铁离子，更不能沾污血迹或脓液，否则导致假阳性。②H2O2不稳定，每次试验前必须鉴定。③试验前3d应禁食影响试验的食品和药物，④严格遵守操作规程，控制反应时间，统一结果判断标准。⑤每天制备阳性和阴性质控标本，进行对照。

质量控制

优点：

灵敏度高（一般血红蛋白为0.2mg/L即可获阳性结果）、特异性强，目前被认为是大肠癌普查最适用试验。缺点：①假阳性：灵敏度过高，引起假阳性②假阴性：当上消化道出血，血液在肠道停留时间过长消化道大量出血时，出现前带现象

2．免疫学法

ELISA、胶体金

质量控制

①试剂检出线要宽，防止反应体系中抗原过剩出现后带现象。必要时将粪便再稀释，重做试验或用化学法复检。②因灵敏度高，要注意假阳性。③上消化道出血Hb被分解不具备原来免疫原性或抗原与单克隆抗体不匹配现象，应密切结合临床，正确判断。④胶体金法质控线没有色带出现说明试验无效，应检查试剂带是否失效。⑤对商品化的试剂盒应严格按照说明书的要求操作。

3．血红蛋白荧光定量法

采用卟啉荧光定量血红蛋白试验（hemoquanttest，HOT），该试验用热草酸溶液使血红素转变为原卟啉进行荧光检测。除可测定粪便中血红蛋白外，还可测定血红蛋白衍生物卟啉，对上、下消化道出血同样敏感，但仍受外源性动物血红蛋白、肌红蛋白和卟啉类物质干扰，且方法复杂，推广使用受到限制。4．消化道出血新的标记物用于粪便隐血试验

①转铁蛋白（Tf）：Tf具有肠道出血的特异性和对细菌分解的稳定性，是消化道出血的良好标志物。联合检测Tf和Hb能提高对早期大肠癌的检出率，可用抗人转铁蛋白抗体胶体金法测定。②血红蛋白-珠蛋白复合物（Hb-Hp）

③血清白蛋白（albumin，ALB）

【参考值】阴性【临床意义】（1）对消化道出血有诊断价值（2）为消化道溃疡与肿瘤出血的鉴别提供依据：消化道肿瘤患者，隐血试验呈持续性阳性；胃肠道溃疡患者隐血试验结果呈间断性阳性。（3）可作为消化道恶性肿瘤普查的1个筛选指标02粪胆色素检查

粪胆色素检查包括粪胆红素、粪胆原、粪胆素检验，多用于黄疸的鉴别诊断。03脂肪检查

粪胆色素检查包括粪胆红素、粪胆原、粪胆素检验，多用于黄疸的鉴别诊断。

【方法学评价】显微镜检查法、称量法、滴定法。

【临床意义】脂肪测定主要了解人体的消化或吸收功能，间接为消化道疾病的诊断提供依据。隐血试验目的要求试剂及仪器实验原理试验步骤目

录CONTENTS质量控制结果判断方法学评价1掌握邻甲苯胺法隐血试验操作方法及结果判断。2

熟悉邻甲苯胺法隐血试验的原理目的要求试剂10g/L邻甲苯胺冰醋酸溶液、3%过氧化氢器材粪便标本、竹签、载玻片试剂及器材实验原理血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能借助受体（邻甲苯胺）催化过氧化氢，放出新生态氧，将受体肠氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色操作步骤1用竹签将粪便标本涂于载玻片上。2滴加10g/L邻甲苯胺冰醋酸溶液及3%过氧化氢溶液2-3滴。3立即观察结果，在2分钟内显蓝褐色为阳性，根据颜色的深浅和出现的时间判断结果结果判断

结果判断判断标准-++++++++++加入试剂2分钟后仍不显色加入试剂10秒后初显浅蓝色，渐变蓝色加入试剂初显蓝褐色且逐渐加深加入试剂后立即呈蓝褐色加入试剂后立即呈蓝黑褐色方法学评价灵敏度：邻甲苯胺法最灵敏，可检出0.2～1.0mg/L的血红蛋白。特异性和准确性：受食物、药物、试剂等多种因素影响，容易出现假阳性或假阴性。假阳性外源性动物食品生食蔬菜（萝卜、甘蓝）药物（铁剂、铋剂）假阴性血红蛋白被分解大剂量服用VitC