刘宝瑞 循环肿瘤细胞 医学专业课学习资料

循环肿瘤细胞与临床

CirculatingTumorCells

刘宝瑞MDPh.D

南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心

南京大学临床肿瘤研究所

循环肿瘤细胞简介P.Paterlini-Brechot,N.L.Benali/CancerLetters253(2007)180–204分离方法密度梯度离心

OncoquickLabonadisk……

滤膜法

ISET系统

尼龙滤膜……免疫磁珠法CellSearch系统负性分选SET系统……微流控芯片微柱芯片鱼骨样HB芯片……基于物理特性基于免疫学特性分离方法密度梯度离心传统密度梯度离心仅作为预处理，用于去除红细胞与血浆分离方法密度梯度离心韩国三星研发了盘状装置和DGM密度离心液Jong-MyeonPark,MinseokSKimetal.AnalyticalChemistryDOI:10.1021/ac403456t分离方法滤膜法最早的ISET系统敏感性可检出1毫升血中的一个CTC但是回收率仅50-60%残留大量PBMC,肉眼识别困难GiovannaVonaetal.AmericanJournalofPathology,Vol.156,No.1,January2000分离方法滤膜法HenryK.Linetal.ClinCancerRes.2010October15;16(20):5011–5018滤膜的孔径和排列进行了优化，获得了超过90%的回收率分离方法CellSearch系统优点：可重复性好，自动化程度高FDA批准用于预测转移性乳腺癌患者预后敏感性高，可检出0.5ml中的一个CTC缺点：仪器价格昂贵，检测费用很高无法回避EMT带来的漏检分离方法负性分选SET系统去除血液中的其他细胞成分以获取CTC，可以有效避免EMT的影响Cytelligen公司研发了商品化的SET负性分选系统分离方法微流控芯片最早的CTC微流控芯片：直径100微米，高度100微米的微柱阵列，表面吸附有抗EpCAM抗体CTC实验捕获率约80%分离方法微流控芯片重新设计了微流道的结构，加上了鱼骨样横梁CTC实验捕获率约90%分离方法微流控芯片在鱼骨样横梁的基础上加上硅纳米线衬底，以针对EpCAM的aptamer代替抗体CTC实验捕获率进一步提高QinglinShenetal.AdvMater.2013Apr24;25(16):2368–2373其他分离方法LabChip.2013,14,63NatProtoc.2014Mar;9(3):694-710.CancerLett.2013Jul10;335(1):225-31.其他分离方法层出不穷，利用了CTC的免疫学和物理学特性，大多只有实验数据，缺乏临床验证其他分离方法IntJOncol.

2012Oct;41(4):1241-50.将针对CTC的抗体连接在导丝前段，后将导丝置入静脉一段时间以捕获CTC其他分离方法ACSApplMaterInterfaces.

2014Mar26;6(6):4550-9基于静脉置入装置捕捉CTC的思路，我们进行的一点尝试CTC的临床价值判断预后预测疗效指导治疗CTC的临床价值判断预后CTC的临床价值判断预后CTC的临床价值预测疗效CTC的临床价值指导治疗CTC的临床价值CTC——个体化治疗潜在平台CTC检测结果存在与血浆、组织并不完全一致，目前尚未明确原因CTC的临床价值激光显微切割后对单个CTC检测突变，PCR成功率不高，与组织检测结果不一致性同样存在CTC——个体化治疗潜在平台CTC的临床价值WGA和测序技术引入CTC分析运用全基因组扩增（WGA）和测序，作者发现研究纳入的肠癌患者，大部分的突变状态在原发灶、转移灶和CTC中是一致的CTC的临床价值CTC蛋白水平的分析发现可用来预测雄激素受体的重新激活和去势治疗抵抗的发生CTC的临床价值CTC的RNA表达分析（荧光原位杂交）免疫荧光直观反映上皮相关蛋白RNA（E）和间质相关蛋白RNA（M）的表达情况发现E和M表型的CTC数量比例变化与疗效