生物医药上游工艺员考试试卷与答案

生物医药上游工艺员考试试卷与答案单项选择题（每题2分，共10题）1.细胞复苏时，常用的水浴温度是（）A.30℃B.37℃C.42℃D.45℃2.以下哪种培养基常用于哺乳动物细胞培养（）A.LB培养基B.YPD培养基C.DMEM培养基D.MRS培养基3.无菌操作时，常用的消毒剂是（）A.乙醇B.甲醛C.氢氧化钠D.次氯酸钠4.细胞计数时，常用的染色剂是（）A.结晶紫B.台盼蓝C.甲基绿D.刚果红5.质粒提取过程中，用于沉淀DNA的试剂是（）A.乙醇B.异丙醇C.氯仿D.酚6.以下哪种酶可用于DNA切割（）A.DNA聚合酶B.限制性内切酶C.逆转录酶D.碱性磷酸酶7.细胞传代时，合适的细胞汇合度一般是（）A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%8.培养箱中二氧化碳的作用是（）A.调节温度B.调节湿度C.维持pH值D.促进细胞生长9.超净工作台工作前需开启紫外灯照射（）A.5-10分钟B.15-30分钟C.30-45分钟D.45-60分钟10.以下哪种物质可作为细胞冻存保护剂（）A.葡萄糖B.蔗糖C.DMSOD.甘油答案：1.B2.C3.A4.B5.B6.B7.C8.C9.B10.C多项选择题（每题2分，共10题）1.细胞培养的基本条件包括（）A.合适的培养基B.适宜的温度C.无菌环境D.气体成分2.以下属于基因工程工具酶的有（）A.限制性内切酶B.DNA连接酶C.反转录酶D.淀粉酶3.细胞冻存的步骤包括（）A.配制冻存液B.细胞收集C.梯度降温D.液氮保存4.常用的细胞培养器皿有（）A.培养瓶B.培养皿C.多孔板D.离心管5.影响细胞生长的因素有（）A.培养基成分B.细胞接种密度C.培养时间D.培养环境的pH值6.以下哪些操作需要在无菌条件下进行（）A.细胞传代B.质粒提取C.培养基配制D.试剂分装7.蛋白质表达系统包括（）A.原核表达系统B.真核表达系统C.昆虫表达系统D.植物表达系统8.细胞计数的方法有（）A.血细胞计数板计数B.流式细胞仪计数C.比色法计数D.重量法计数9.质粒的特点有（）A.自主复制B.携带特定基因C.可转移性D.线性结构10.生物安全防护的措施包括（）A.实验室设施B.个人防护装备C.操作规范D.应急处理预案答案：1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABC5.ABCD6.ABD7.ABCD8.AB9.ABC10.ABCD判断题（每题2分，共10题）1.所有细胞都可以在相同的培养基中生长。（）2.紫外线可以完全杀死所有微生物。（）3.质粒是细菌染色体外的双链环状DNA分子。（）4.细胞传代次数越多，细胞状态越好。（）5.进行无菌操作时，只要手消毒了就可以随意触碰物品。（）6.逆转录酶可将RNA转化为DNA。（）7.细胞冻存时，冻存液中血清比例越高越好。（）8.离心时，转速越高越好。（）9.基因工程中，限制性内切酶切割DNA具有特异性。（）10.细胞培养过程中，pH值的稳定对细胞生长很重要。（）答案：1.×2.×3.√4.×5.×6.√7.×8.×9.√10.√简答题（每题5分，共4题）1.简述细胞复苏的操作要点。答案：从液氮取出冻存管，迅速放入37℃水浴中快速摇晃至完全融化。在超净台内将细胞悬液转移至含适量培养基的离心管，离心弃上清，加新鲜培养基重悬细胞，接种至培养器皿培养。2.说明无菌操作的重要性及注意事项。答案：无菌操作可防止微生物污染，保证实验结果准确性和细胞正常生长。注意事项包括操作前消毒环境与用品，操作时避免开口容器长时间暴露，动作轻缓，减少空气流动，且要正确使用消毒试剂。3.简述质粒提取的基本原理。答案：利用质粒与细菌染色体DNA结构差异。碱裂解法中，碱性条件使双链DNA变性，质粒因共价闭合环状结构复性快，而染色体DNA难以复性，通过离心等步骤去除杂质，获得质粒DNA。4.列举三种常用的细胞培养检测指标。答案：细胞活力，通过台盼蓝染色计数有活力细胞比例；细胞增殖速率，如绘制生长曲线；细胞形态，在显微镜下观察细胞形状、大小及贴壁情况等。讨论题（每题5分，共4题）1.讨论细胞培养过程中出现污染的可能原因及解决措施。答案：污染原因可能是环境不无菌，如超净台、培养箱清洁消毒不到位；操作不规范，如未严格无菌操作；培养基、血清等试剂被污染。解决措施包括及时丢弃污染细胞，彻底清洁消毒培养环境和设备，规范操作流程，重新配制试剂，对新细胞进行检测。2.阐述基因工程技术在生物医药上游工艺中的应用及意义。答案：应用包括构建表达载体生产重组蛋白药物，改造细胞用于基因治疗等。意义在于能精准设计和改造生物分子，生产大量高纯度、有活性的生物制品，为疾病诊断、治疗提供新方法和药物，推动生物医药产业快速发展。3.谈谈如何优化细胞培养条件以提高细胞生长和产物表达。答案：可从培养基优化，选择合适配方、添加生长因子；控制培养环境，如温度、pH、溶氧精准调控；调整接种密度，寻找最佳值；优化传代时间，避免细胞老化或过度生长等方面入手，从而提高细胞生长和产物表达水平。4.讨论生物安全在生物医药上游工艺中的重要性及