第七章 尿液分析仪器

1、第七章尿分析仪器，广州医学院化学教室，制作：张超辅助教授E-mail:chao-，尿分析仪器是临床实验室最常用的分析仪器，尿分析器尿沉渣分析器、第一节尿分析器、尿分析器(UrineAnalyzer )的分类是指尿中的酸度值、亚硝酸盐NIT、尿蛋白、Vc含量等1、工作方式分为2 .检查项目，8个尿分析装置代表机器：日本或国产的MA4210型检查项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐。 9个尿分析仪代表器具：德国产的RL9型检查项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白血球。 10种尿分析仪代表机器：德国MIDITRON型、美国CLINIT

2、EK200型。 检查项目：蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红血球、白血球、尿比重。 11项尿分析仪的代表仪器：美国的CLINITEK500型检查项目：蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白血球、比重、维生素c。 3、根据自动化程度，二、尿分析装置的测定原理、尿分析装置的测定原理主要有以下三个方面：尿分析装置的试剂带原理、尿分析装置的测定原理、多联试剂带：将多个项目的试剂块合并成一个试剂带，使用多联试剂带，可以一次浸尿同时测定多个项目。 图为德国宝灵曼公司的COMBURTEST试剂带。 采用多层型结构。 尼龙薄膜：防止对高分子物质反应的污染。 1、试剂

3、带的原理、绒头层：碘酸盐层和试剂层：碘酸盐层：能破坏维生素c等干扰物质； 试剂层：含有试剂成分，主要与尿中的测定物质发生化学反应而发生颜色变化的吸水层：可以使尿均匀且迅速地浸入，抑制尿流向相邻的反应区的塑料基底：作为支撑体。 多联试剂带的构造图，另外，试剂带还有一个垫子“补偿区”，作为尿的底色，补偿有色尿和机器的变化等产生的误差。 试剂胶带按一定的顺序排列，制造商让尿中的各成分被各测定块吸收，引起化学反应和酶反应，根据尿中各成分的比例，试剂块的颜色发生变化。 各项测定原理表、尿WBC干化学法检测尿内WBC中粒细胞中的特异性脂肪酶。 该酶可用于试验纸膜块中的吲哚酚脂质，发生重氮盐反应，形成紫色缩

4、合物，其颜色的浓淡与细胞数量成正比。 对淋巴球和单核球没有反应。 2、白细胞特异性脂肪酶的测定原理，3 .利用阴血实验原理，Hb中的血红素有过氧化物酶的作用，在氢供体(如无色的邻甲苯胺)的存在下，将过氧化物还原成水，无色的邻甲苯胺氧化成有色产物。 (无色)、(有色)、作业人员必须仔细阅读胶带的性能和机器的操作方法操作中，必须充分混合新鲜的尿标本将所有胶带迅速浸在尿液标本中测试胶带从标本中取出时，去除多馀尿的可疑结果必须进行确诊实验4 .干化学分析试验带的使用说明，试验带存放在干燥、不透明、有盖的容器中，容器中的干燥剂不能放在寒冷干燥的地方，不要放冰箱，不能暴露在挥发性的烟中，过期的胶带不能使用

5、。 通常在打开后6个月内用完，不能使用褪色的化学带。测试带的保存方法：这种设备一般由微机控制，将浸过尿的试剂带放入设备比色槽中，用光源照射测试带产生的化学反应的各种试剂垫，其反射光由球面积分器接收，由球面积分器的光电管反射的2波长光(通过了滤光器的测定光和1 将各试剂的每个模块的反射光的光量值和空白模块的反射光的光量值进行比较，用计算机求出反射率，换算为浓度值后，可以用分析仪打印半定量的数值。 5 .测量原理、各波长的比率取决于测量项目在几十秒的反应时间内，各项目(空白块不参加反应，标准参考用)的试剂的带块因化学反应而颜色变化，吸收照射的单色光。 另外，由检验项目确定各波长的选择，在球面积分器

6、中，三个光电管和特定波长滤波器：的参考光是品红色滤波器(720nm )。 测定光电管中加入绿色过滤器(550nm )测定亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原。 另一个红色过滤器(620nm )测量葡萄糖、蛋白质、PH和阴血。 器具的检查过程中，来自光源灯的光通过积分球照射试剂带的膜块。 带试剂膜的块的颜色浓淡对光的吸收和反射不同，颜色越浓，吸收的光量值越大，反射光量值越小，反射率越小。 仪表通过下式自动计算反射率，然后与标准曲线进行比较，自动印刷各成分的结果。 R(%):反射率Tm:对试剂垫的测定波长的反射强度Ts:对试剂垫的基准波长的反射强度Cs:对标准垫的测定波长的反射强度、6 .计算原理、三、

7、尿分析装置的结构、尿分析装置主要由以下三部分构成：主要功能是测定对象的试剂台(1)机械系统，(2)光电系统的结构图，其中，放大光电检测器的信号，并且执行运算处理。 (3)电路系统请参照下图。 设置条件：要在调整了电磁干扰源、电源、阳光照射防止、防潮、通风好、温度为10-30、湿度为80 :的新设备安装后，或每次大修时，对设备的技术性能进行测试和评价。 这对保证检查质量起着重要的作用。 四、干化学尿分析技术的局限性、干化学尿分析技术操作简便、检查项目多、诊断筛面大、器械便宜等多种优点很快在临床上普及，但这种器械检查的结果受到多种因素的影响，必须严格控制才能得到好的结果。 五、影响干化学检验结果的

8、因素，影响检验结果的因素大体来源于以下方面：试纸条要素尿标本要素操作要素：仪器的校验和维护、操作步骤、环境要素等。 第二节尿沉渣分析装置、第一、尿沉渣检查方法学进展、(1)开展用干化学法检测尿中WBC、RBC，进行显微镜检查的筛选。 (2)利用图像拍摄系统拍摄尿沉渣成分的静止图像，自动对尿沉渣成分进行分类计算、积累等，形成尿沉渣自动分析系统。 (3)全自动尿沉渣分析器，利用流式细胞术和抵抗原理定量分析尿中成分。 (4)除了通常的显微镜以外，还可以用干涉、相位差、偏振光、扫描、透射型电子显微镜等观察。 (5)目前采用尿沉渣的生物染色和细胞化学等多染色法识别各种细胞和管型。 (6)近年来，利用单克

9、隆抗体技术识别各种细胞成分。 二、尿沉渣分析装置的分类，(一)流式细胞术以尿沉渣分析装置、UF-100仪器为例，了解尿沉渣分析原理。1 .经稀释、染色的标本通过鞘液槽，2 .用氩激光照射3 .测定荧光、散射光和阻力，流式细胞术尿沉渣分析仪的结构，1 .经稀释、染色的标本通过鞘液槽，尿标本经稀释液稀释染色后，它在液压作用下形成鞘液流反应样品从喷嘴出口进入鞘液流动室时，被没有粒子的鞘液包围，各细胞以单一纵列的形式通过流槽的中心(垂直)轴线。 UF-100分析原理，UF-100分析原理，这里，对每个尿细胞照射氩激光。 不同细胞有不同程度：荧光强度(FL，fluorescentlight )是染色尿细

10、胞发出的荧光强度，主要反映细胞膜、核膜、线粒体、核酸等细胞的定量特性。 散射光强度(用该装置测得的是前向角散射光Fsc，forwardscatterelight，与其成比例地反映细胞的大小)电阻的大小(电阻电阻电信号主要与细胞的体积成比例)。 2、氩激光照射、设备将这种荧光、散射光和电阻信号转换为电信号，分析这些电信号，为每个尿标本制作直方图和散射图，并分析这些模式，按细胞区分，可以得到每个细胞的形态。 3、用于测量荧光、散射光和电阻的UF-100分析原理，(二)仪器结构、流式细胞尿沉渣分析仪包括光学检测系统的液压系统电阻检测系统，光学系统包括氩激光(波长488nm )、激光反射系统、流式细胞

11、、前向光1 .光学检测系统：激光作为光源用于流式细胞术系统，由双色反射镜反射，由聚光器收集形成光束点，聚集到流式细胞术的中央。 样品流过流池，各个细胞用激光束照射，产生前向散射光和前向荧光的光信号。 散射光信号通过光电二极管转换为电信号，发送至微处理器。 根据光散射规律，在分析尿标本时，细胞的种类和分布不均匀，光的反射和散射主要依赖于细胞表面，散射光的强度主要依赖于细胞的大小，因此装置可以从散射光的强度中得到测定细胞大小的资料。 荧光通过滤光器过滤出一定波长的荧光后，发送到光电倍增管，放大光信号变换为电信号，然后发送到微处理器，获得细胞的定量特性。 UF-100尿沉渣分析仪，一种是菲啶染料，主

12、要用于对细胞的核酸成分(DNA )进行染色，在480nm光波激发时产生610nm的橙黄色光波，区分有核细胞和无核细胞(RBC和WBC、病理管型和透明管型等)。 与细胞质膜(细胞膜、核膜、线粒体)的脂质层成分反应，在460nm光波激励时产生505nm的绿色光波，主要区分细胞的大小(上皮细胞和白细胞的差异)。 这两种染料反应快：背景荧光低：细胞产生的荧光与染料和细胞的结合程度成比例。 反应池染色标本随着真空作用被吸入鞘液流动池。 尿细胞进入流动池，防止凝固。 然后，用对单细胞流加压的鞘液输送到流池中，使染色的样品通过流池的中央，鞘液形成液体的旋涡，把尿细胞排列成一个纵队通过鞘液的中心。 2 .液压

13、(鞘液流动)系统，电阻电阻测量系统包括测量细胞体积的电阻电阻系统和测量尿液导电率的传导系统。 电阻阻抗测定的方法：与血球分析义的电阻阻抗原理相同。 有些标本含有几种结晶，为了影响电阻测定的敏感性，稳定尿标本的传导性，稀释液上可以使用含有EDTA盐的化合物，也可以加热使结晶溶解。 3 .电阻检测系统的从样品细胞获得的前向散射光强，并且不需要非常敏感的光电检测器，而光电二极管可以将光信号转换成电信号。但是，从样品细胞得到的前向荧光很弱，需要使用极其敏感的光电倍增管。 该光电倍增管在光电表面吸收光子的能量，并使用金属光电效应发射光电。 4 .电子系统、发光的光电子被施加电压促进，引起许多二次电子放大

14、。 这个被放大的前向荧光被转换为电信号。 从各个样品获得的阻抗信号和传导性信号容纳在接收器中，并直接被放大到微处理器中发送。光学分析系统、分析原理流程图、UF100细胞分析过程、尿有形部分脉冲模式、尿有形部分脉冲模式、(三)尿沉渣细胞资料综合分析、仪器综合分析前向散射光波形(强度和散射光脉冲宽度)、前向荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻值大小机器通过分析各个细胞的信号波形的特性来分类。 前方散射光信号主要反应细胞体积大的前方散射光强度FSC反应细胞的横截面面积前方散射光脉冲宽度FSCW的主要反应细胞的长度FSCW=CL BW/VCL细胞长度BW的激光束宽度v的流动速度是，前方荧光信号以细

15、胞色染质大小的荧光强度FL为主与细胞色染质的强度反应的前方荧光脉冲FLW可以用下式表示： FLWNL BW/VNL核长BW激光束宽度v的流速，(4)尿沉渣分析装置的测定项目，UF-100型全自动尿沉渣分析装置的采集标本体积为9ml，自动取样模式所需的标本体积为4ml以上，实际采集标本体积为0.8ml， 测定标本体积为9.0升，可报告以下参数：检测项目、红细胞、白细胞上皮细胞(EC )、管型细菌(BACT )等检测电导率的测定，本章总结.1.尿自动分析器的发展史和分类2 .尿分析器原理，3 .各项测定原理5 .尿沉渣检查方法学的进展6 .尿沉渣检查自动分析器的结构，堂上练习1尿干化学分析试剂带2

16、试剂带的反射率3尿分析装置机械系统4尿分析装置光学系统，1、名词解释、1尿蛋白质定性干化学测定法仅适用于a白蛋白b球蛋白c糖蛋白d粘蛋白e核蛋白的测定，2， 选择问题2 .不符合尿干化学试剂的反应原理是，a粒细胞中的酯酶作用于重氮盐引起颜色反应b细菌将硝酸盐还原成亚硝酸盐CpH的知识和用特异性酶法测定对尿中白蛋白特别敏感的d尿中葡萄糖e尿红血球的测定一般应用阴血试验原， 3 .不符合尿分析器10项测定试剂内容的是a白血球酯酶b亚硝酸盐CpHD比重e球蛋白4 .尿干化学试剂带测定尿糖，以下说法错误的是， a试剂带法比班尼法特异性高，b维生素c发生假阴性反应的c试剂带法比班尼法灵敏度高，与d测定结果反映尿和试剂膜块的事件无关，e过氧化物产生假阳性结果，5 .尿干化学试剂带测定尿酮体的以下说法错误的是， a本法对酮体各成分灵敏度相同的b测定时使用新鲜的尿c试剂受湿气，尿酮体检测假阳性的结果d尿中丙酮假阳性的结果e干化学尿酮检测可采用硝基亚铁氰化钠法，6 .尿分析仪的试剂带结构为A2层，最上层为塑料最上层是吸水层C4