第章维生素类药物的分析

1、维生素： 是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。 人体不能合成维生素,VitA、D、 E、K等,脂溶性,水溶性,VitB VitC、叶酸、烟酸,-H 维生素A醇 -COCH3 维生素A醋酸酯 -COC15H31 维生素A棕榈酸酯,R :,第一节 维生素A,不溶于水 易溶于有机溶剂和植物油等,为一个具有共轭多烯侧链的 环己烯,（二）,具有UV吸收 325-328nm,VA主要为全反式VA,存在多种立体异构化合物,如：新维生素Aa,新维生素Ab,新维生素Ac,异维生素Aa，异维生素Ab,维生素A 325.5 100% 新维生素Aa 328 75% 新维生素Ab 320.5 24% 新维生素A

2、c 310.5 15% 异维生素Aa 323 21% 异维生素Ab 324 24%,相对生物效价,VitA2,VitA3,易发生脱氢、脱水、聚合反应,鲸醇,或有金属离子存在时氧化 维生素A醋酸酯在临床上较常用,环氧化物,VitA醛,VitA酸,CHCl3,无醇CHCl3,蓝色,紫红,条件 无水无醇 三氯化锑水解生成氯化氧锑 乙醇可与C+作用而使正电荷消失,方法 取维生素A油溶液1d， 加氯仿10 ml，振摇溶解，取出两滴，加氯仿2 ml，与25%三氯化锑氯仿液0.5 ml反应，成蓝色，渐成紫红。,BP（2005）,max为326nm 一个吸收峰,max为350390nm 三个吸收峰 且在332

3、nm的波长处 有较低的吸收峰或拐点,去水VitA（VitA3）,VitA,HCl,讨论 维生素 A有五个共扼双键，无水乙醇溶液在 326 nm处有最大吸收，盐酸催化加热脱水，成6个双键，故，波长红移，同时在350-390之间出现3个吸收峰。,max为326nm 一个吸收峰,max为350390nm 三个吸收峰,USP 显色剂 磷钼酸 规定斑点颜色和Rf值,BP 显色剂 三氯化锑,对照品法,(一)UV法,三. 含量测定,(二)HPLC法,（三）三氯化锑比色法,标准曲线法,1.原理：维生素A与三氯化锑的无水氯仿溶液作用,产生不稳定的蓝色,在618nm620nm波长处有最大吸收,符合Beer定律.,

4、2.方法：取维生素A对照品，制成系列浓度的氯仿溶液，加入一定量的三氯化锑无水氯仿溶液，在5s 10s内,于620nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线。按同法测定供试液的吸收度，根据标准曲线计算含量。,氨基嘧啶环CH2噻唑环(季铵碱)连接而成的季铵类化合物,HCl,Cl-,第二节 维生素B1的分析(盐酸硫胺),二 、性质 （一） 溶解性：易溶于水，水溶液呈酸性 （二） 硫色素反应：噻唑环在碱性介质中开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化成具有荧光的硫色素。,嘧啶环 伯氨,噻唑环 季铵,1、可与酸成盐 2、与生物碱 3、含量测定 非水碱量法,（四）,碱性,（三）UV 共轭双键max =

5、 246nm,ChP,硫色素,(O),方法 取本品约5mg，加氢氧化钠2.5ml，加铁氰化钠试液0.5ml与正丁醇5ml,强烈振摇2min,放置分层，上面醇层显强烈蓝色荧光。加酸消失，再加碱又重现。 专属性反应。,(二) 沉淀反应 VitB1,H+,H+,H+,H+,S元素反应,Cl-反应,（三）其他反应,电位滴定法指示终点,原理：维生素B1分子含有2个碱性的已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中均与HClO4作用，根据消耗HClO4的量可以计算维生素B1的含量。,(二)UV ChP片剂、注射剂,= 421,A = ECL,（一）结构 为L-抗坏血酸，在化学结构上和糖类似。有4种光学异构体，L构

6、型的右旋体活性最强。具有二烯醇的结构，具有内酯环，具有两个手性碳（C4，C5），性质活泼。,L抗坏血酸,第三节 维生素C,（二）性质,溶解性 易溶于水，水溶液呈酸性；在乙醇 中略溶，在氯仿或乙醚中不溶。,2 酸性 C3OH的酸性较强。pK1 = 4.17，C2OH的酸性较弱pK2 = 11.57。故表现为一元酸的性质。能与碳酸氢钠成钠盐。,二烯醇结构,二酮基结构,强还原性 二烯醇结构的还原性极强。,有活性,有活性,无活性,L抗坏血酸,去氢抗坏血酸,二酮古洛糖酸,光学活性 手性C（C4、C5） L(+)抗坏血酸活性最强,*,*,5 水解性,50,6 具糖的性质 结构与糖类相似 有糖类的显色反应,

7、水解、脱羧,7 紫外特征,或中性,二. 鉴别试验 (一)与氧化剂反应,1、与AgNO3反应 (ChP2005),2、与2，6 - 二氯靛酚反应(ChP2005),氧化型,玫瑰红色,（玫瑰色）,（无色）,3、与碱性酒石酸铜反应 USP,4、与KMnO4反应,或盐酸,50,吡咯,USP,（蓝色）,(糠醛),（戊糖）,脱羧,(三)UV (BP) 维生素C 在0.01mol/L HCl中,在243nm有最大吸收,指示剂 淀粉指示液,三 含量测定 (一)碘量法 1.原理 维生素C在醋酸酸性条件下,可被碘定量氧化.根据消耗碘的体积,可以计算维生素C的含量,H+,取本品约0.2g，精密称定，加 新沸过的冷水

8、100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6,2. 方法,3.讨论 （1）酸性环境 d . HAc 减慢VitC被O2氧化速度 （2）新沸冷H2O 赶走水中O2 （3）立即滴定 减少O2的干扰,(二) 2，6 - 二氯靛酚滴定法 1.原理,终点： 显示过量的2，6 - 二氯靛酚的颜色（粉红色）,2.方法,3. 讨论 （1）酸性环境 HPO3-HAc 稳定VitC （2）快速滴定 2min内 防止其他还原性物质干扰,（3）缺点 不稳定 需经常标定

9、贮备液 贮存一周,*,*,*,第三节 维生素E的分析,苯并二氢吡喃醇的衍生物 苯环上有一个乙酰化的酚羟基，故又称生育酚醋酸酯 主要有，等异构体，其中以-异构体的生理活性最强。 结构分3部分： 苯环+二氢吡喃环+饱和烃链,生物效价 右旋体 :消旋体 = 1.4 ：10 （天然品） （合成品）,dl生育酚醋酸酯,一、性质 1、溶解性 为微黄色或黄色透明的粘稠液体， 易溶于有机溶剂，不溶于水 2、UV 苯环 3、酯键 易水解生成游离生育酚 4、氧化性 维生素E在无氧条件下对热稳定,加热200也不破坏，但对氧十分敏感，遇光、空气可被氧化。其氧化产物为-生育醌或-生育酚二聚体。,二、鉴别试验 （一）硝酸

10、反应,橙红色,75,15,（橙红色）,生育红,生育酚,HNO3,强氧化剂,取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75加热15分钟，溶液应显橙红色。,（二）三氯化铁联吡啶反应,原理： 维生素E在碱性条件下，水解生成游离的生育酚，生育酚经乙醚提取后，可被FeCl3氧化生成对-生育醌，同时Fe3+ 被还原为Fe2+， Fe2+ 与联吡啶生成红色的配位离子。,生育酚,对-生育醌,弱氧化剂,Fe2+ +,红色,= 41.045.5,max = 284nm,min = 254nm,(三)UV法 VE0.01%无水乙醇溶液,薄层板 硅胶G,展开剂 环己烷 -乙醚（4 ：1）,显色

11、剂 硫酸（105 5）,VitE Rf = 0.7,(四) TLC法,游离生育酚,利用游离生育酚的还原性，可被硫酸铈定量氧化。故在一定条件以消耗硫酸铈滴定液体积来控制游离生育酚的限量。,中国药典采用硫酸铈滴定法检查制备过程中未酯化的生育酚,硫酸铈滴定液（0.01mol/L） 二苯胺（亮黄灰紫）,（二）试剂,（M生育酚= 430.8）,例,取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过 1.0ml。,2.15,药典规定,消耗硫酸铈液（0.01mol/L）1.0ml,若硫酸铈液浓度不是0.01mol/L， 应重新计算硫酸铈的消耗量