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文档简介

1、常规石蜡切片常见问题与解决方案,贵州省威宁县人民医院病理科 方伟建,2019.6,常规病理组织石蜡切片染色是临床诊断的重要辅助手段。 主要流程包括固定、取材、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等。,固定是所有常规病理工作的前置条件: 大标本固定时间不得少于6小时;小标本不得少于3小时。 制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含脱钙、脱脂等需要特殊处理的标本)。,一张优质是HE切片标准: 厚度46m、完整、厚薄均匀、无皱褶、无刀痕、贴片恰当、染色鲜艳、对比度好。 捞片时载玻片干净,粘贴于载玻片中下1/3处。,制备优质切片的条件: 、包埋恰当。 、锋利的刀片。 、合适的切片机。 、熟练的技术员

2、。,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题1:切片卷成团 原因: 1、刀太钝 2、刀倾斜角太小 3、切片太厚 解决方案: 1、换新的刀片 2、调整刀的倾斜角 3、调整切片厚度,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题2:切片破碎或切不成片 原因: 1、组织固定、脱水、透明不彻底 2、浸蜡不足,脱水、透明过度 3、浸蜡温度过高或时间过久 解决方案:1、优化组织处理过程 2、及时更换试剂 3、组织块去脱蜡后重 新脱水,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题3:切片过分的压缩 原因:1、刀太钝 2、蜡块太软 3、用力过猛或速度太快 解决方案: 1、换新的刀片 2、重新冰冻蜡块 3、动作轻、用力均

3、匀,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题4:切片不连片 原因: 1、刀刃不锋利 2、蜡块上下端留蜡太少 或不整齐 3、室温过低 4、切片过厚 解决方案: 1、换新的刀片或移动刀口 2、提高室温度或蜡块复温(吹气) 3、调整切片厚度,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题5:切片粘附于组织 块上 原因:1、室温过高或包埋蜡 熔点太低 2、室内干燥有静电 3、刀片、组织块边缘 的碎片 解决方案: 1、清洁刀边 2、修整蜡块边缘 3、增加环境湿度,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题6:组织块脱落 原因:1、包埋时组织块与包埋蜡 粘贴不牢 2、蜡块冷冻时间过久 3、组织结构致密 4、切片用

4、力过猛或太快 解决方案: 1、重新包埋 2、组织块复温 3、切片动作轻、速度均匀,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题7:组织切片不完整 原因:1、包埋不当,没有在一个 面上 2、切片时粗修过多或不够 解决方案: 1、重新包埋 2、调整蜡块,确保获得完 整的切面,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题8:筛状空洞(“天窗”) 原因:1、粗修后没有细修 2、肝脏、扁桃体、淋巴结、 脾脏和脑组织中更常见 解决方案: 1、粗修后细修表面(无白点) 2、过脆组织表面可以适当复温,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题9:切面过厚 原因:1、切片机维护不当 2、切片厚度设置过厚 3、石蜡太软 4

5、、刀钝 解决方案: 1、保养切片机 2、熟悉淋巴结、脾脏、 胸腺、扁桃体等细胞丰富组织应该以2-3m为宜,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题10:纵行刀痕或纵裂 原因:1、组织中有钙化、钉、 缝合线等异物 2、切片刀有缺口 3、刀口不洁 4、石蜡中有杂质 解决方案: 1、去除蜡块中异物 2、清理刀口 3、换新刀口,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题11:切片厚薄不均 或“搓衣板样” 原因:1、组织处理中脱水过度 2、切片刀不锋利 3、蜡块未夹紧 解决方案: 1、组织处理过程调整 2、换刀或刀口 3、夹紧蜡块 4、均速慢切,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题12:皱褶或重叠 原

6、因:1、摊片温度不够 2、组织缺乏一致性 3、组织未充分伸展 解决方案: 1、调整摊片温度 2、捞片时仔细认真,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题13:切片裂隙或碎裂 原因:1、组织固定或处理不充分 2、摊片时间过久或温度过高 3、烘片前片子上水份过多 解决方案: 1、确保组织固定和处理充分 2、降低摊片温度 3、烘片前去除玻片上过多水 份,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题14:栅栏裂和龟裂 原因:1、固定不完全 2、透明或浸蜡不充分 3、蜡块过度冷冻 解决方案: 1、优化组织脱水过程 2、慢切,速度均匀,常规石蜡切片常见问题与解决方案 常见问题15:气泡 原因:捞片时,切片下面有气 泡。在烘干或染色过程 中气泡破裂。 解决方案: 1、切片的光滑面朝下捞 片,避免气泡。 2、摊片机底部有气泡, 毛笔搅动摊片机中的 水,赶走气泡。,小结 切片质量的好坏与组织取材、固定、特别是与组织的脱水、透明及浸蜡、包

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