中药材中农残速灭威的提取方法研究及定性检测

红河学院本科毕业论文 (设计)中药材中农残速灭威的提取方法研究及定性检测摘要本论文以三七为中药材，选氨基甲酸酯类农药速灭威（24%）为代表性农药，首先，对速灭威进行纯化处理，并测得其紫外最大吸收波长为263nm 。其次，绘制了农药浓度与吸光度值的标准曲线，方程为：A=2.44639 mb0.00133，R=0.99993 。再者，从溶剂、方法、时间、温度方面比较得出提取速灭威的最佳条件：三氯甲烷为溶剂，微波法在 210W提取5min为最佳，最后，定性检测了三七中可能含有速灭威或与速灭威极性相似的物质。关键词：速灭威；农药残留；检测目 录第一章 前言 1 页1.1 农药残留问题 1 页1. 2 氨基甲酸酯类农药简介 1 页1.2.1 农药品种 1 页1.2.2 理化性质 2 页1.2.2 中毒机理 2 页1.2.3 治疗原理 2 页1.3 速灭威的简介 2 页第二章 实验部分 3 页2.1 仪器 3 页2.2 试剂 3 页2.3 农药处理 4 页2. 3. 1 农药提纯 4 页2. 3. 2 农药峰的检测 4 页红河学院本科毕业论文 (设计)2.3.3 浓度曲线的绘制 5 页2.4 提取方法研究 6 页2.4.1 溶剂对农药的影响 6 页2.4.2 提取方法的选择 7 页2.4.3 时间和温度对农药提取的影响 9 页2.5 三七中速灭威的定性检测 12 页第三章 结论 13 页参考文献 14 页致谢 17 页红河学院本科毕业论文 (设计)1第一章 前言1.1、农药残留问题农药的种类很多，按防治对象可分为杀虫剂、杀菌剂、除草剂、杀螨剂、杀线虫剂等；按化学成分，人合成有机杀虫剂又分为有机氯类杀虫剂、有机磷类杀虫剂、氨基甲酸酯类杀虫剂、拟除虫菊酯类杀虫剂等；杀菌剂可分为有机硫类杀菌剂、有机磷类杀菌剂、取代苯类杀菌剂、有机杂环类杀菌剂、抗菌素杀菌剂等 3。农药残留一旦超标将会严重危害人体健康，其中有机氯类农药易在脂肪中蓄积，造成慢性中毒，而且非常不易降解，在禁用10余年后，仍能在动植物中检测到它的残留；此外，有机磷和氨基甲酸酯类农药可抑制体内的乙酰胆碱酯酶，容易造成急性中毒，甚至危及生命。人类的生活水平和健康意识随着科技的发展在提高，各种各样植物中农残的检测也给予越来越多的关注，而有着中国国粹之称的中药更是倍受关注，为解决这些生活热点问题而使得有研究的意义。1.2、氨基甲酸酯类农药介绍1.21、农药品种氨基甲酸酯类农药的种类目前有：维西因、呋喃丹(克百威、虫螨威、呋灭感、卡巴呋喃)、叶蝉散(灭扑威、异丙威、灭扑散、异灭威、迷死威、)、速灭威(万灵)、兹克威(zectran)、虫特威、涕灭威(铁灭威、涕灭克、混灭威(灭杀威加克死威)、灭杀威、抗蚜威(劈蚜雾、)、禾大壮(达灭环草丹、杀克尔)、丁硫威、猛扑因(茂巴)、灭草灵)、燕麦灵(巴尔板)、燕麦敌(燕麦敌l号)、燕麦敌2号、燕麦畏(阿畏达、野麦畏、三氯烯丹、)、杀草丹(除因莠、稻草完)、磺草灵、氯苯胺灵(CIPC)、丁草丹(莠丹)、除草丹(旱草丹、拦草净)、害扑威、仲丁威(扑灭威、巴沙、扑杀威、迷丁威、丁苯威、残杀威(PHC、bayon)、除蝇威(HRS-1422)、硫双威、灭草蜢(卫农、凯米丰(Kemifan)、双乙威及灭鼠剂RH-908(LH-106)、灭鼠安(LH-104、RH-945)等。1.22、理化性质氨基甲酸酯类农药因取代基团不同，可形成多种化合物。一般可分 5 类，即萘基、苯基、杂环甲基、杂环二甲基氨基甲酸酯类和肟类 5。易溶于有机溶剂，在红河学院本科毕业论文 (设计)2酸性环境中，对光热稳定，毒性也相对增加；在碱性环境中易分解而失效，多属中等毒类，其中氨基甲酸酯类除草剂毒性远较杀虫剂低。本类毒物可经消化道、呼吸道和皮肤黏膜进人体内。在体内易分解，排泄较快。部分经水解、氧化或与葡萄糖醛酸结合而解毒；部分则以原型或其代谢产物的形式迅速经肾排出。1.23、中毒机理急性氨基甲酸酯杀虫剂中毒是短时间密切接触氨基甲酸酯杀虫剂后，因体内胆碱酯酶活性下降而引起的以毒蕈碱样、烟碱样和中枢神经系统症状为主的全身性疾病。氨基甲酸酯类农药的中毒机理：主要是抑制神经组织、红细胞及血浆内的乙酰胆碱酯酶 3-6。氨基甲酸酯类进人体内不需要经代谢活化，即可直接与胆碱酯酶活化中心的负矩部位和酯解部位的丝氨酸羟基结合，形成复合物，进而成为氨基甲酰化酶，由于胆碱酯酶被氨基甲酰化后失去对乙酰胆碱的水解能力，造成体内乙酰胆碱大量蓄积而中毒。2.2.4、治疗原则1、迅速离开中毒现场，脱去污染衣服，用肥皂和温水彻底清洗污染的皮肤、头发和指甲。2、特效解毒药物:、轻度中毒者可不用特效解毒药物，必要时可口服或肌内注射阿托品，但不必阿托品化;、重度中毒者根据病情应用阿托品，并尽快达阿托品化;、单纯氨基甲酸酯杀虫剂中毒不用肟类复能剂1.3、速灭威简介速灭威属氨基甲酸酯类杀虫剂，其ISO通用名称：Metolcarb；化学名称：3-甲基苯基-N-甲基氨基甲酸酯；其结构式为 9：分子式：C 9H11O2N；相对分子质量：165.2；熔点：7677。沸点：180。红河学院本科毕业论文 (设计)3溶解度（gL，25）：甲醇1121，二甲苯98，二甲基甲酰胺 2867，在水中2300mgkg（30）；稳定性：遇碱分解；毒性：本品为氨基甲酸酯类杀药，主要起触杀和熏杀作用，抑制了虫体胆碱酯酶活性，使之乙酰胆碱堆积中毒而死亡。属中毒级，烟剂对人有刺激性，切忌入口，防止呼吸道吸入，若发生头晕、恶心、呕吐等中毒症状，可用阿托品进行解毒，并应通气、休息。与蜂蜜混用会使毒性加强。红河学院本科毕业论文 (设计)4第二章 实验部分2.1、 仪器TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器）OHAUS AR1140 电子分析天平（美国梅特勒托利多仪器）超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司、上海汉克科学仪器有限公司）微波炉（德国产）2.2、试剂和药品丙酮（工业纯蒸馏） ；石油醚（工业纯蒸馏） ；乙酸乙酯（工业纯蒸馏） ；甲醇（工业纯蒸馏） ；氯仿（工业纯蒸馏） ；乙醇（工业纯蒸馏） ；G 硅胶（250g） ；三七粉（500g） ；速灭威（24%）2.3 农药处理2.3.1 农药提纯称一定量的市售农药粉剂溶于丙酮中，通过减压抽滤后将滤液用旋转蒸发仪浓缩得到混合晶体，取少量晶体溶于丙酮，通过点硅胶板来选择合适的洗脱剂 3,12，最后确定为石油醚和乙酸乙酯（3：1） 。称250g硅胶用湿法进行装柱，将所得混合晶体溶于洗脱剂后注入，用石油醚：乙酸乙酯（3：1）进行洗脱，速灭威在第二个400mL时被洗脱，到1200mL时洗脱完全，将洗脱剂用旋转蒸发仪浓缩得到白色晶体 13 。2.3.2农药峰的检测准确称量0.1000g白色晶体定溶至50mL的容量瓶中，从中用移液管分别取2mL、 4mL、 6mL、8mL、 10mL定溶至50mL 待测。以氯仿为参比，红河学院本科毕业论文 (设计)520304050600.0.20.40.60.81.0abswavelngth263nm图2.1 农药检测峰用UV1901紫外检测，其检测结果如图：从图1.1中可以看出在不同浓度下速灭威的最大吸收波长是相同的，即263nm处吸光度 A值最大。因此农药速灭威的紫外最大吸收波长是263nm。2.3.3、浓度曲线的绘制在2.3.2中所配溶液的梯度浓度分别为：0.08mg/mL、0.16 mg/mL、0.24 mg/mL、0.32 mg/mL、0.40 mg/mL，波长固定在263nm的条件下，通过紫外测得吸光度值列表如下：表2.1 梯度浓度与吸光度值次数 1 2 3 4 5 6C（mg/mL）0.00 0.08 0.16 0.24 0.32 0.40A 0.0000 0.1983 0.3872 0.5789 0.7817 0.9816红河学院本科毕业论文 (设计)6以表2.1绘图的如下标准曲线： 0.10.2.30.4.20.46.810Abswavelngth图2.2 标准曲线由图2.2可以得到下表：表2.2 线性回归方程、相关系数、标准偏差（N=6 ）溶剂名称 回归方程 相关系数 标准偏差氯仿 Y2.44639 m b0.00133 0.99993 0.0048parameter value ErrorA -0.00133 0.00348B 2.44639 0.014362.4. 提取方法研究2.4.1、溶剂对农药的影响2.4.1.1、以甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿为溶剂，准确称取市售农药0.1000g，分别加入10mL以上溶剂溶解，过滤后用氯仿作参比，用紫外检测得以下结果。红河学院本科毕业论文 (设计)720 30 40 50 60-0.2.0.2.40.6.81.0.21.4.61.82.0.2.4.62.83.0.23.4abswavelngth12345图2.3 速灭威（24%）用不同溶剂提取的检测峰图2.3标的1、2、3、4、5分别表示以甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、丙酮为溶剂2.4.1.2、以紫外检测得图醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿为溶剂，准确称取市售农药0.1000g和2.0000g三七混合均匀后，分别加入 50mL以上溶剂，冷浸2h后过滤后以氯仿为参比，用紫外检测得图1.4：203040506001234567abswavelngth1234图1.4 速灭威（24%）加三七用不同溶剂提取的检测峰从图2.3、2.4不难看出速灭威在甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿中都有一定红河学院本科毕业论文 (设计)8的溶解度，结合两图看甲醇和无水乙醇存在干扰峰，而乙酸乙酯和氯仿的干扰较小，但是在加有三七时乙酸乙酯的最大吸收波长发生了变化，而氯仿的最大吸收波长没有发生偏移。但是速灭威在氯仿中的溶解度较其它溶剂的小，作为提取农药参量而言溶解度小应该对其实验影响较小。因此从三七中提取速灭威的最佳溶剂是氯仿。2.4.2、提取方法的选择通常提取法方有很多种，如冷浸法，超声波法，微波法，热回流法等，这些方法都有着各自的优缺点 15。如冷浸法干扰小但周期性长；热回流法的时间较冷浸法而言较小但是操作较复杂；超声波法和微波法所需时间短，温度、时间可以准确控制，操作较为简便，在农残提取方