肝炎病毒【精选-ppt】

肝炎病毒病原生物学教研室肝炎病毒（ hepatitis viruses， HV）是指以侵害肝脏为主引起病毒性肝炎的一组病原体。目前公认的肝炎病毒至少有 5种，即 甲型肝炎病毒（HAV） 、 乙型肝炎病毒（ HBV） 、 丙型肝炎病毒（ HCV） 、丁型肝炎病毒（ HDV） 和 戊型肝炎病毒（ HEV） 。 近年还发现一些与人类肝炎相关的病毒，如 GB病毒 -C/庚型肝炎病毒（ GBV-C/HGV）和输血传播性病毒（ TTV）病毒，但由于致病性不清，均未被最后确定和命名。 此外， 还 有一些病毒如黄 热 病毒、 CMV、 EBV、风 疹病毒等 虽 也可引起肝炎，但不列入肝炎病毒范 围 之内。各型病毒性肝炎的比较肝炎类型 甲型肝炎 乙型肝炎 丙型肝炎 丁型肝炎 戊型肝炎病毒 HAV HBV HCV HDV HEV生物性状科 小 RNA病毒 嗜肝 DNA病毒 黄病毒 未分类 嵌杯病毒大小 (nm) 27 42 60 35 30形状 20面体 球状 球状 球状 20面体核酸类型 RNA DNA RNA RNA RNA包膜 - +(HBsAg) + +(HBsAg) -基因组 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA传播途径粪 -口 输血、注射性行为、垂直输血、注射性行为垂直输血、注射性行为、垂直粪 -口临床表现潜伏期 2 6周 1 6周 2 10周 1 6周 2 8周急性 + + + + +慢性 - + + + -重症 少 少 少 经常 妊娠期间携带者 - + + + -诱发肝癌 - + + -预防 免疫球蛋白丙球蛋白 HBIG 丙球蛋白 - -疫苗灭活或减毒疫苗基因重组疫苗 (HBsAg)无 HBsAg 无第 1节 甲型肝炎病毒 甲型肝炎病毒（ hepatitis A virus， HAV） 首先是Feinstone于 1973年应用免疫电镜技术在急性期肝炎患者粪便中发现的。 1982年国际病毒命名委员会将其分类为小 RNA病毒科肠道病毒属 72型。近年又被单列为肠道病毒科的嗜肝 RNA病毒属（ heparnavirus）。 HAV引起的 甲型肝炎 是急性肝炎，主要经过粪口途径传播，可造成暴发或散发流行，潜伏期短，发病较急，一般不转为慢性，亦无慢性携带者，预后良好。形态与结构 生物学性状球形颗粒，无包膜 :基因组 :线状 +ssRNA，稳定 性高。衣壳 :20面体立体对称，由VP1 VP4等 4种多肽组成，其中 VP1是主要的衣壳蛋白，其抗原决定簇的 NT抗体，能中 和所有的 HAV株。至今，世界各地 HAV只发现一个血清型。易感动物和细胞培养黑猩猩、两种南美洲猴 (白髭猴和红腹狨 ) 以及国产猕猴属中红面猴 (Macaca speciosa) 对 HAV易感，接种病毒后均可出现临床、生化和组织学上急性肝炎的改变，粪便内可检出病毒。HAV可用非洲绿猴肾细胞、人胚肾细胞、传代猴肾细胞 (Vero、 BSC-1、 FRhK-4、 FRhK-6)、人胚肺 2倍体成纤维细胞和人肝癌细胞株 (PLC PRF 5) 等。但不引起 CPE。因此需用免疫荧光法或放射免疫法检出培养的 HAV。生物学性状抵抗力HAV对乙醚、酸、热 (60 1h) 稳定，在 20 贮存数年仍保持感染性。HAV经高压 (121 20min)、煮沸 (5min)、干热(180 1h)、 UV (1.1瓦 1min)、甲醛 (14 000、37 3d)以及氯 (10ppm 15ppm、 30min) 等处理均可使之灭活。鉴于 HAV有相当大的抵抗力，因此对肝炎患者及其排泄物处理应特别小心。生物学性状传染源与传播途径传染源 ：多为患者和隐性感染者。患者潜伏期后期及急性期的血液和粪便均有传染性。传播途径 ：主要通过粪 -口途径传播。未有患急性甲型肝炎的孕妇传染给胎儿的病例。致病性与免疫性致病机制HAV主要侵犯儿童和青年，且多为隐性感染 :HAV 口 小肠淋巴结内增殖 血（病毒血症）肝细胞内增殖 致病（出现临床症状）。机体的免疫应答也参与了肝脏的损伤，即抗 HAV在肝脏与 HAV结合形成免疫复合物，或 Tc(CTL)对感染病毒肝细胞的攻击所致。致病性与免疫性潜伏期 排毒高峰急性期 排毒量 Ab免疫性感染后可产生持久免疫力。早期： IgM；同时，从粪便中检出 sIgA抗体。恢复期： IgG，并可持续多年；特异细胞免疫应答。致病性与免疫性实验室诊断不依靠分离病毒，而采用下述方法：(一 ) 病毒检测 ：潜伏期末期和急性期早期，取粪便用免疫电镜检测 HAV颗粒；用放射免疫 (RIA) 或酶免疫 (EIA) 法检测 HAV 的抗原。(二 ) 血清学检查 ：检测抗 HAV常用 RIA和 EIA法。检测抗 HAV IgM有助于早期诊断；测抗 HAV IgG有助于流行病学调查；测粪便中抗 HAV IgA也有助于诊断。(三 ) 病毒核酸检测 ：应用 cDNA-RNA分子杂交技术及 PCR技术检测 HAV的 RNA，方法特异、敏感。用斑点杂交法可检出 10 9mg核酸。微生物学检查法HAV感染后以隐性感染和无黄疽型病例占多数，因此传染源较难控制。预防 ：一般性预防：搞好卫生。特异性预防：我国试用减毒甲型肝炎活疫苗 (H2 株和 L1株 )；国外已生产灭活疫苗，HAV基因工程疫苗正在研制中。注 射丙种球蛋白可应急预防。治疗 ：甲型肝炎为自限性疾病，经治疗可痊愈，不转慢性亦不留后遗症。用药宜简。 防治原则第 2节 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus， HBV） 属嗜肝DNA病毒科（ hepadnaviridae）。 HBV的发现源于表面抗原的研究。 1963年 Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australia antigen）；直至 1968年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（ hepatitis associated antigen， HAA）；1970年 D.S. Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（ Danes particle）。从而 HBV被确认。HBV是 乙型肝炎 病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。形态与结构完整的 HBV颗粒亦称 Dane颗粒，直径为 42nm，具有双层核壳结构：核心颗粒 ：直径为 28nm。颗粒内部： DNA和 DNA多聚酶 。颗粒表面（内衣壳）：含有 HBcAg 和 HBeAg 。外壳（包膜） ：厚 7nm。脂质双层：含有 HBsAg、 PHSAr 和 PreSAg蛋白质生物学性状 小球形颗粒，直径 22nm； 管形颗粒，直径 22nm，长度在 50 700nm之间； 大球形颗粒，即 Dane颗粒，直径42nm。生物学性状形态与结构HBV基因结构及复制 HBV基因结构HBV DNA是由长链 L (负链 ) 和短链 S (正链 ) 组成的不完全双链环状 DNA(cccDNA)，短链的长度相当于长链的 50% 85%。HBV DNA长链载有病毒蛋白质的全部密码，有4个开放读码框架 (ORF)，分别称为 S、 C、 P和 X区 。生物学性状HBV基因结构S区基因 ：包括 S基因、 PreS 1与 PreS2基因，分别编码 HBsAg、 PreS1和 PreS2 Ag。C区基因 ：编码 HBcAg，还有一个 PreC区可能在病毒核心和外壳的附着及结合中起作用。P区基因 ：最长，编码 HBV DNA多聚酶、逆转录酶以及RNaseH。X区基因 ：编码 X 蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。生物学性状HBV的复制生物学性状抗原组成 生物学性状外壳：HBsAg： 是机体受 HBV感染的主要标志之一。具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗 HBs 。根据 HBsAg抗原性差异， HBV可分为 adr、 adw、 ayr、ayw 等 4种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与种族有关。如欧美主要是 adr型，为 A基因型；我国以adr、 ayw为多见。PreS1和 PreS2： 存在吸附肝细胞受体的表位；其抗原性比 HBsAg 更强，抗 PreS1和抗 PreS2通过阻断 HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。生物学性状衣壳HBcAg： HBcAg主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。但 HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主 CTL作用的主要靶抗原。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗 HBc，但无中和作用。检出高效价抗 HBc，特别是抗 HBc IgM则表示 HBV在肝内处于复制状态。HBeAg： HBeAg可作为 HBV复制及血清具有传染性的标志。急性乙型肝炎进入恢复期时 HBeAg消失，抗 HBe阳性；但抗 HBe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。 抗原组成易感动物和细胞培养只有 黑猩猩 对 HBV易感，接种后可发生与人类相似的急慢性感染。体外细胞培养尚未成功。 近年来应用基因克隆技术，可使 HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒DNA导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达HBsAg、 HBcAg和 HBeAg。有此细胞株可持续地产生 Dane颗粒。这些细胞培养可用于抗 HBV药物的筛选、疫苗制备及 HBV致病机制研究等。生物学性状抵抗力HBV 对理化因素的抵抗力相当强：对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。高压灭菌 (121 15min)、 0.5%过氧乙酸、 5%次氯酸钠、 3%漂白粉液、 0.2%新洁尔灭等均可使HBV失活。但应指出， HBV的感染性与 HBsAg的抗原活性并非一致。如 100 10min或 pH2.4处理 6h均可使HBV失去感染性，但仍保持 HBsAg的抗原活性。生物学性状传染源和传播途径传染源急性、慢性乙肝患者及 HBsAg无症状携带者均为传染源，特别是无症状的 HBsAg携带者 做为传染源危害性更大。致病性和免疫性乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即 非胃肠道的感染 (parenteral infection)：1.血液、血制品传播： 有少数 HBsAg阴性、而 HBV DNA阳 性的血液仍可引起感染。2.医源性传播： 通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检查、预防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可传播乙型肝炎。3.母婴传播 主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入含 HBV的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染 (10%)，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。 4.接触传播 ：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引起 HBV感染。通过唾液传播的可能性也应受到重视。性交，尤其男性同性恋亦可传播 HBV。因此，在西方国家将乙肝列为性传播疾病 (STD)之一。尿液、鼻液、汗液和粪 -口传播的可能性很小。致病性和免疫性传播途径致病机制 乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为 无症状病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎 等。HBV的致病机制，除了 HBV对肝细胞直接损害外，主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的临床表现。 致病性和免疫性1细胞介导的免疫病理损伤2体液免疫所致的免疫损伤3自身免疫所致的损伤 致病性和免疫性免疫性体液免疫 ：抗 HBs：中和体液中 HBV，使其失去感染性。抗 PreS2：封闭病毒与肝细胞表面的 PHSA受体，阻止病毒吸附于肝细胞。抗 Hbe：可通过与肝细胞表面 HBeAg结合后，通过补体介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。细胞免疫 ：主要依靠 CTL。 CTL对 HBV感染的肝细胞 (靶细胞 )有直接杀伤作用。据认为，针对 HBcAg的 CTL在清除 HBV感染的靶细胞中有较重要的作用。致病性和免疫性NT抗体 HBV与原发性肝癌HBV感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是： 经流行病学调