高效液相色谱法测量强力感冒片中绿原酸和对乙酰氨基酚

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 高效液相色谱法测量强力感冒片中 绿原酸和对乙酰氨基酚 摘要目的 建立测定强力感冒片 中绿原酸和对乙酰氨基酚的含量测定方 法。方法 采用高效液相色谱 -紫外光谱 法（HPLC-UC 法）测定绿原酸和对乙 酰氨基酚含量，色谱柱为 Inertsil ODS- SP（5 m， 4.6250 mm） ，流动相为甲 醇与乙腈的混合溶液（体积比为 1：2） -0.1%磷酸=20：80，柱温： 35.0，流 速：1.0 ml/min，检测波长分别为 329 nm 和 243 nm。结果 对乙酰氨基酚测 定的线性范围为 0.7112 g/ml（r=0.9999 ） ，含量为 195.8 mg/片； 绿原酸测定的线性范围为 0.51102 g/ml（r=0.9995 ） ，含量为 2.23 mg/片。 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 结论 该方法用于强力感冒片中绿原酸 和对乙酰氨基酚含量的测定较为简便准 确。 中国论文网 /6/view-13007969.htm 关键词 高效液相色谱法；绿原 酸；对乙酰氨基酚；含量测定 中图分类号 R927.2 文献标识 码 A 文章编号 1674-4721（2017） 11（c）-0013-04 Determination of Paracetamol and Chlorogenic Acid in Qiangli Ganmao Tablets by HPLC-UV GAO Hua-rong SUN Xiang-min Department of Pharmacy，Peking University Medical Luzhong Hospital，Shandong Province，Zibo 255400，China AbstractObjective To establish a method for determination of Paracetamol and Chlorogenic Acid in Qiangli Ganmao Tablets.Methods By high performance liquid chromatography with ultraviolet -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 spectrometry （HPLC-UC） method，the content of Chlorogenic Acid and Paracetamol were determined.The column was Inertsil ODS-SP （5 m，4.6250 mm） ，the mobile phase was the mixture of methanol-acetonitrile （the volume ratio was 1：2）-0.1% phosphoric acid （20：80）.The column temperature was 35.0，the flow velocity was 1.0 ml/min，the wavelength was 329 nm and 243 nm respectively.Results The linear range of Paracetamol and Chlorogenic Acid were at 0.7-112 g/ml （r=0.9999） and 0.51- 102 g/ml （r=0.9995 ） respectively.The content of Paracetamol and Chlorogenic Acid was 195.8 mg and 2.23 mg respectively.Conclusion The method used for the simultaneous determination of Paracetamol and Chlorogenic Acid in Qiangli Ganmao -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 Tablets is simple and accurate. Key words HPLC；Paracetamol；Chlorogenic Acid；Determination 强力感冒片中含有对乙酰氨基酚 和金银花、牛蒡子、连翘等 9 味中药， 具有辛凉解表、清热解毒、解热镇痛的 功效。临床上用于治疗伤风感冒、发热 头痛、口干咳嗽、咽喉疼痛等症状。由 于强力感冒片是中西药复方制剂，成分 复杂，近年来，对乙酰氨基酚在使用过 程中导致的不良反应时常有报道。强力 感冒片的现行质量标准 WS3-B-4017-98 中1，在含量测定项下，仅采用紫外分 光光度法测定对乙酰氨基酚的含量，该 方法在使用过程中复杂繁琐，干扰因素 较多，存在较大的偏差2，对主要成分 金银花中绿原酸的含量未有含量要求。 本文通过建立高效液相色谱法，同时测 定强力感冒片中对乙酰氨基酚和金银花 中绿原酸的含量，以便更好地对该药进 行质量监控，同时也为提高该药的质量 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 标准打下基础，现报道如下。 1x 器与试药 1.1 仪器 高效液相色谱仪（日本岛津公司， 包括 LC-20AT 泵，DGU-20A3 在线脱 气机，CTO-10AS VP 柱温箱，SPD-20A 紫外检测器） ，AL-104 电子天平梅特勒 -托利多仪器（上海）有限公司，KH- 400KDV 型高功率数控超声波清洗器 （上海星尧科学仪器有限公司） 。 1.2 试药 对乙酰氨基酚对照品（批号 71302229，中国药品生物制品检定所） ； 绿原酸对照品（批号 141215，含量99%， 中国药品生物制品检定所） ；强力感冒 片（批号 150960，武汉中联药业集团股 份有限公司） ；甲醇、乙腈为色谱纯， 其余试剂为分析纯。 2 方法与结果 2.1 对照品和供试品溶液的制备 2.1.1 对照品溶液的制备 准确称 取对乙酰氨基酚对照品 0.0140 g 于 100 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 ml 容量瓶中，加 50%的甲醇超声溶解 并稀释至刻度，摇匀，得浓度为 140 g/ml的对乙酰氨基酚对照品贮备液。 同时准确称取绿原酸对照品 0.0102 g 于 100 ml 容量瓶中，加 50%的甲醇超声溶 解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为 102 g/ml的绿原酸对照品贮备液。 2.1.2 供试品溶液的制备 取强力感冒片 20 片，除去包衣，精密称定，研细。准 确称取 80 mg，置 100 ml 容量瓶中，加 50%甲醇超声溶解并定容至刻度，摇匀， 经 0.45 m微孔滤膜过滤，即得测定绿 原酸含量的供试品溶液。准确移取该供 试品溶液 1 ml 置 10 ml 容量瓶中，加 50%甲醇溶液稀释至刻度即得测定对乙 酰氨基酚含量的供试品溶液。 2.2 色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：Inertsil ODS-SP（5 m，4.6250 mm） ；流动相：甲醇与乙 腈的混合溶液（体积比为 1：2）-0.1% 磷酸=20：80；柱温：35.0；流速： 1.0 ml/min；检测波长分别为：对乙酰 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 氨基酚 243 nm 和绿原酸 329 nm3-4； 进样体积：20 l。分别取对照品溶液和 供试品溶液注入色谱仪，色谱图见图 14，对照品与供试品具有相同的保留 时间，对乙酰氨基酚、绿原酸理论塔板 数均不低于 4000，分离度1.5。 2.3 线性关系的考察 分别取对照品贮备液 0.05、0.1、0.2、0.3、0.5、1、2、4、6 、8 ml 于 10 ml 容量瓶中，加 50%甲醇 定容至刻度，摇匀，得系列浓度的标准 溶液。分别进样，测定峰面积。以对照 品溶液浓度（X，g/ml）为横坐标，峰 面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。 结果，对乙酰氨基酚的回归方程为： Y=98288X+9139.9，相关系数 r=0.9999，在浓度 0.7112.0 g/ml的范 围内呈良好线性关系；绿原酸的回归方 程为：Y=75266X-42939，相关系数 r =0.9995，在浓度 0.51102.00 g/ml的 范围内呈良好线性关系。 2.4 精密度试验 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 分别取“2.1.1”项下的对乙酰氨基 酚标准溶液和绿原酸对照品溶液连续进 样 6 次，结果对乙酰氨基酚峰面积的 RSD 为 1.1%（表 1） ，绿原酸峰面积的 RSD 为 1.4%（表 2） ，精密度均良好。 表 1 对乙酰氨基酚精密度实验结 果（n=6） 表 2 绿原酸精密度实验结果 （n=6） 2.5 稳定性试验 按“2.1.2”制备对乙酰氨基酚和绿 原酸的供试品溶液，室温下，分别于 0、2、4、6、12、12 h 进样，结果对乙 酰氨基酚在 12 h 内的峰面积的 RSD 为 0.5%，绿原酸在 6 h 内的峰面积的 RSD 为 1.8%，对乙酰氨基酚和绿原酸供试 品溶液分别室温放置 12 h 和 6 h 稳定。 2.6 重复性试验 取同一批研细的样品粉末 5 份， 按“2.1.2”分别平行制备对乙酰氨基酚和 绿原酸的供试品溶液，并分别进样，根 据峰面积计算样品含量，结果样品中对 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 乙酰氨基酚的含量为 402.53 mg/g，RSD 为 1.2%（n=5） ；绿原酸的含量为 4.75 mg/g，RSD 为 1.4%（n=5） ，重复性均 良好。 2.7 样品含量测定 取强力感冒片，按“2.1.2”制备供 试品溶液，按“2.2”色谱条件进样，按外 标法由峰面积计算绿原酸和对乙酰氨基 酚的含量。结果绿原酸含量为 2.23 mg/ 片，对乙酰氨基酚含量为 195.8 mg/片。 2.8 回收率试验 根据样品测定结果，取同一批研 细的样品粉末 80 mg（共 10 份）分别至 100 ml 容量瓶中，其中 9 份分别按绿原 酸含量的 80%、100% 、120% 加入绿原 酸对照品溶液（各平行 3 份） ，加 50% 甲醇溶液超声溶解并稀释至刻度，摇匀， 进样，根据峰面积计算绿原酸的回收率。 同时，在另外 1 份中，加 50%甲醇超声 溶解并稀释至刻度，然后准确移取该溶 液 1 ml 至 10 ml 容量瓶中，按对乙酰氨 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 基酚含量的 80%、100% 、120%分别加 入对乙酰氨基酚对照品溶液（各平行 3 份） ，并加 50%甲醇溶液至刻度，摇匀， 进样，根据峰面积计算对乙酰氨基酚的 回收率。结果绿原酸的平均回收率为 97.8%， RSD 为 1.5%（表 3） ，对乙酰 氨基酚的平均回收率为 99.5%，RSD 为 0.7%（表 4） 。 表 3 绿原酸回收率试验结果 （n=9） 表 4 对乙酰氨基酚的回收率试验 结果（n=9） 3 讨论 在色谱流动相条件摸索中，参考 相关文献5-15分别以甲醇- NaH2PO4（pH 2.7） ，甲醇 -0.4%磷酸， 甲醇-0.1%磷酸，乙腈 -0.4%磷酸，乙腈- 0.3%磷酸，乙腈-0.2% 磷酸，乙腈-0.1% 磷酸等为流动相比较不同比例下的色谱 图，考虑出峰时间、分离度和拖尾因子， 最终确定甲醇与乙腈的混合溶液（体积 比为 1：2）-0.1% 磷酸=20 ：80