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*化验技术协会第八期培训资料（药物分析工）*干燥失重测定法（2005版药典附录） 取供试品，混合均匀(如为较大的结晶，应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒)，取约1g或各品种项下规定的重量，置与供试品相同条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，除另有规定外，在105干燥至恒重。由减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。 供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过5mm，如为疏松物质，厚度不可超过lOmm。放入烘箱或干燥器进行干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥，取出时，须将称量瓶盖好。置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器中放冷，然后称定重量。供试品如未达规定的干燥温度即融化时，应先将供试品于较低的温度下干燥至大部分水分除去后，再按规定条件干燥。当用减压干燥器或恒温减压干燥器时，除另有规定外，压力应在2.67kPa(20mmHg)以下；干燥器中常用的干燥剂为无水氯化钙、硅胶或五氧化二磷；恒温减压干燥器中常用的干燥剂为五氧化二磷，除另有规定外，温度为60。干燥剂应保持在有效状态。干燥失重测定法（中国药品检验标准操作规范） l 简述 1.1 药品的干燥失重系指药品在规定条件下干燥后所减失重量的百分率。减失的重量主要是水分、结晶水及其他挥发性物质，如乙醇等。由减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。 1.2 干燥失重测定法(中国药典2005年版二部附录)常采用烘箱干燥法、恒温减压干燥法及干燥器干燥法，后者又分常压、减压两种。 1.3 烘箱干燥法适用于对热较稳定的药品，恒温减压干燥法适用于对热较不稳定或其水分较难除尽的药品；干燥器干燥法适用于不能加热干燥的药品，减压有助于除去水分与挥发性物质。 2 仪器与用具 2.1 扁形称量瓶2.2 烘箱 最高温度300，控温精度1。2.3 恒温减压干燥箱。2.4 干燥器(普通)、减压干燥器2.5 真空泵。2.6 分析天平 感量0.1mg。3 试药与试液干燥器中常用的干燥剂为硅胶、五氧化二磷或无水氯化钙。恒温减压干燥箱中常用的干燥剂为五氧化二磷。干燥剂应保持在有效状态，硅胶应显蓝色，五氧化二磷应呈粉末状，如表面呈结皮现象时应除去结皮物。无水氯化钙应呈块状。4 操作方法4.1 称取供试品 取供试品，混合均匀(如为较大结晶，应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒)。称取约1g或各品种项下所规定的重量，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中(供试品平铺厚度不可超过5mm，如为疏松物质，厚度不可超过10mm)，精密称定。干燥失重在1.0以下的品种可只做一份，1.0以上的品种应同时做平行试验两份。4.2 干燥 除另有规定外，照各品种项下规定的条件干燥。干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开。取出时需将称量瓶盖好。4.3 称重4.3.1 用干燥器干燥的供试品，干燥后即可称定重量。4.3.2 置烘箱或恒温减压干燥箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器中放冷至室温(一般需3060分钟)，再称定重量。4.4 恒重 称定后的供试品按4.24.3操作，直至恒重。5 注意事项5.1 由于原料药的含量测定，根据药典“凡例”的规定，应取未经干燥的供试品进行试验，测定后再按干燥品(或无水物)计算，因而干燥失重的数据将直接影响含量测定；当供试品具有引湿性时，宜将含量测定与干燥失重的取样放在同一时间进行。5.2 供试品如未达到规定的干燥温度即融化时，应先将供试品在较低的温度下干燥至大部分水分除去后，再按规定条件干燥。5.3 设定烘箱的温度时，应注意加热温度有冲高现象(尤其干燥温度较低时)，必要时可先设定至略低于规定的温度，待温度稳定后再调高至规定温度。也可借助程序升温方法。5.4 减压干燥，除另有规定外，压力应在2.67kPa(20mmHg)以下。并宜选用单层玻璃盖的称量瓶，如用玻璃盖为双层中空，减压时，称量瓶盖切勿放入减压干燥箱(器)内，应放在另一普通干燥器内。减压干燥器(箱)内部为负压，开启前应注意缓缓旋开进气阀，使干燥空气进入，并避免气流吹散供试品。5.5 初次使用新的减压干燥器时，应先将外部用厚布包好，再行减压，以防破碎伤人。5.6 恒温减压干燥时，除另有规定外，温度应为60。装有供试品的称量瓶应尽量置于温度计附近，以免因箱内温度不均匀产生温度误差。5.7 测定干燥失重时，常遇有几个供试品同时进行，因此称量瓶(包括瓶盖)宜先用适宜的方法编码标记，以免混淆；称量瓶放入烘箱内的位置，以及取出放冷，称重的顺序，应先后一致，则较易获得恒重。5.8 称定扁形称量瓶和供试品以及干燥后的恒重，均应准确至0.1mg位。6 记录与计算6.1 记录干燥时的温度、压力、干燥剂的种类、干燥与放冷至室温的时间，称量及恒重的数据、计算和结果(如做平行实验，取其平均值)等。6.2 计算 W1+W2-W3 干燥失重%=100% W1式中 W：为供试品的重量(g)； W1：为称量瓶恒重的重量(g)； W2：为(称量瓶+供试品)恒重的重量(g) 7 结果与判定计算结果按“有效数字和数值的修约及其运算”修约，使其与标准中规定限度的有效数位一致。其数值小于或等于限度值时，判为符合规定；大于限度值时，则判为不符合规定。如规定为高低限度范围时，而测得的数值介于高低限度范围之内时，判为符合规定。8 附注干燥至恒重，除另有规定外，系指在规定条件下连续两次干燥后称重的差异在0.3mg以下的重量；干燥过程中的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1小时后进行。水分测定法（2005版药典附录）第一法(费休氏法)A.容量滴定法本法是根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理以测定水分。所用仪器应干燥，并能避免空气中水分的侵入，测定操作宜在干燥处进行。费休氏试液的制备与标定(1)制备 称取碘(置硫酸干燥器内48小时以上)ll0g，置干燥的具塞锥形瓶中，加无水吡啶160ml，注意冷却，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇300ml，称定重量，将锥形瓶置冰浴中冷却，在避免空气中水分侵入的条件下，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g，再加无水甲醇使成1000ml，密塞，摇匀，在暗处放置24小时。本液应遮光，密封，置阴凉干燥处保存。临用前应标定浓度。(2)标定 用水分测定仪直接标定。或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约30mg，除另有规定外加无水甲醇25ml，在避免空气中水分侵入的条件下，用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点；另作空白试验，按下式计算： WF= A-B式中：F为每lml费休氏试液相当于水的重量，mg； W为称取重蒸馏水的重量，mg； A为滴定所消耗费休氏试液的容积，m1；B为空白所消耗费休氏试液的容积，m1。测定法：精密称取供试品适量（约消耗费休氏试液15ml），除另有规定外，溶剂为无水甲醇，用水分测定仪直接测定。或将供试品置干燥的具塞玻瓶中，加溶剂25ml，在不断振摇（或搅拌）下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点，另作空白试验，按下式计算：按下式计算： （A-B）F供试品水分含量（%）=100% W式中 A为供试品所消耗费休氏试液的容积，ml； B为空白所消耗费休氏试液的容积，ml； F为每1ml费休氏试液相当于水的重量，mg； W为供试品的重量，mg。B库仑滴定法本法仍以卡尔费休氏(KarlFischer)反应为基础，应用永停滴定法测定水分。与容量滴定法相比，库仑滴定法中滴定剂碘不是从滴定管加入，而是由含有碘离子的阳极电解液电解产生。一旦所有的水被滴定完全，阳极电解液中就会出现少量过量的碘，使铂电极极化而停止碘的产生。根据法拉第定律，产生的碘的量与通过的电量成正比，因此可以用测量滴定过程中流过的总电量的方法测定水分总量。本法主要用于测定含微量水分(0.00010.1)的物质，特别适用于测定化学惰性物质如烃类、醇类和酯类中的水分。所用仪器应干燥，并能避免空气中水分的侵入；测定操作宜在干燥处进行。费休氏试液 按卡尔费休氏库仑滴定仪的要求配制或购置滴定液。本法无须标定滴定液。测定法 先将系统中的水分预滴定除去，而后精密量取供试品适量(含水量约为0.55mg)，迅速转移至阳极电解液中，用卡尔费休氏库仑滴定仪直接测定，以永停滴定法指示终点，从仪器显示屏上直接读取供试品中水分的含量，其中每lmg水相当于10.72库仑的电量. 第二法(甲苯法) 仪器装置 如图。A为500ml的短颈圆底烧瓶；B为水分测定管；C为直形冷凝管，外管长40cm。使用前，全部仪器应清洁，并置烘箱中烘干。测定法 取供试品适量(约相当于含水量14ml)，精密称定，置A瓶中，加甲苯约200ml，必要时加入干燥、洁净的无釉小瓷片数片或玻璃珠数粒，将仪器各部分连接，自冷凝管顶端加入甲苯至充满B管的狭细部分。将A瓶置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热，待甲苯开始沸腾时，调节温度，使每秒钟馏出2滴。待水分完全馏出，即测定管刻度部分的水量不再增加时，将冷凝管内部先用甲苯冲洗，再用饱蘸甲苯的长刷或其他适宜方法，将管壁上附着的甲苯推下，继续蒸馏5分钟，放冷至室温，拆卸装置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的铜丝推下，放置使水分与甲苯完全分离(可加亚甲蓝粉末少量，使水染成蓝色，以便分离观察)。检读水量，并计算成供试品的含水量（)。备注 甲苯须先加水少量充分振摇后放置，将水层分离弃去，经蒸馏后使用。费休氏水分测定法（中国药品检验标准操作规范） 1 简述 费休氏水分测定法是利用碘在吡啶和甲醇溶液中氧化二氧化硫时需要定量的水参加反应的原理来测定样品中的水分含量，本法可适用任何可溶解于费休氏试液但不与费休氏试液起化学反应的药品的水分测定，故对遇热易破坏的样品仍能用本法测定。基本反应为 I2+SO2+H202HI+SO3-上述反应是可逆的，但有吡啶存在时，无水吡啶能定量地吸收HI和SO3-，生成氢碘酸吡啶和亚硫酸吡啶。C5H5NI2+C5H5NSO2+C5H5N+H2O2C5H5NHI+C5H5NSO3亚硫酸吡啶亦不稳定，能与水发生副反应，消耗一部分水，因而干扰测定。C5H5NSO3+H2OC5H5NHSO4H加入无水甲醇可使亚硫酸吡啶转变成稳定的甲基硫酸氢吡啶，避免了上述副反应的发生。C5H5NSO3+CH3OHC5H5NHSO4CH3滴定的总反应为：C5H5NI2+C5H5NSO2+C5H5N+ CH3OH+ H2O2C5H5NHI+ C5H5NHSO4CH3（1）由上式可知，吡啶与甲醇不仅作为溶剂，而且参与滴定反应，此外，吡啶还可以与二氧化硫结合降低其蒸气压，使其在溶液中保持比较稳定的浓度。1.1 容量滴定法根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理；由滴定溶液颜色变化（由淡黄色变为红棕色)或用永停滴定法指示终点；利用纯水首先标定出每lml费休氏试液相当于水的重量(mg)；再根据样品与费休氏试液的反应计算出样品中的水分含量。 1.2库仑滴定法 与容量滴定法相同，库仑滴定法也是根据碘和二氧化硫在吡啶(有些型号仪器改用无臭味的有机胺代替吡啶)和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理来进行测定的。 与容量滴定法不同，在库仑滴定法中，碘是由含碘化物的电解液在电解池阳极电解发生碘。 2I-I2+2e-(2) 只要滴定池中存在水，发生的碘就会按反应(1)进行反应。当所有的水都反应完毕，阳极电解液中会剩余少许过量的碘。此时，双铂电极就能检测出过量的碘，并停止产生碘，根据法拉第定理，产生碘的数量与流过的电流和时间成正比。在反应(1)中，碘和水以1：l反应。1摩尔水(18.Og)对应于296487库仑，也就是说，每毫克水会消耗掉10.72库仑的电量，当电源固定时，根据电解至终点的时间即可计算出水分含量，本法尤其适合于药品中微量水分(0.00010.1)的测定，并具有很高的精确度。而且含水量是根据电解电流和电解时间计算，只须加入供试品前，先将电解液通电流电解至碘刚生成少许，停止电解，再加入供试品继续电解即可，不需用标准水标定滴定液。 用库仑滴定法测完水分的操作，见各仪器的操作规程。以下仅介绍容量滴定法的操作规程。 2 仪器与用具 2.1 实验条件与要求由于费休氏试液吸水性强，因此在配制、标定及滴定中所用仪器均应洁净干燥。试液的配制过程中应防止空气中水分的侵入，进入滴定装置的空气亦应经干燥剂除湿。试液的标定、贮存及水分滴定操作均应在避光、干燥环境处进行。 2.2 仪器及器具的处理：分析天平(感量0.1mg)、大台秤、水分测定仪或磨口自动滴定管(最小分度值0.05m1)、永停滴定仪、电磁搅拌器。凡与试剂或费休氏试液直接接触的物品，玻璃仪器须在120至少干烤2小时，橡皮塞在80干烤2小时，取出置干燥器内备用。 2.3 用具和装置：1000ml干燥的锥形瓶一个，500ml干燥量筒一个以及用作安全、洗气和放置干燥剂瓶4个(配有双孔橡皮塞)，载重1000g的架盘天平及配套砝码。 3 试液 3.1 试剂 3.1.1 碘 将碘平铺于干燥的培养皿中置硫酸干燥器内干燥48小时以上，以除去碘表面吸附的水分。 3.1.2 无水甲醇(AR，含水量0.1)，原包装。 3.1.3 吡啶(AR，含水量0.1)，原包装。 3.1.4 二氧化硫一般使用压缩的二氧化硫气体，用时通过硫酸脱水。 3.1.5 浓硫酸(AR)。 3.1.6 无水氧化钙(CP)。 3.2 费休氏试液的配制 用架盘天平，称得1000ml锥形瓶的重量，再分别称取碘110g，吡啶158g置锥形瓶中，充分振摇。加入吡啶后，溶液会发热，应注意给予冷却。用500ml量筒量取无水甲醇300ml，倒入锥形瓶中，塞上带有玻璃弯管的双孔橡皮塞，称其总重量。将锥形瓶置于冰水浴中，缓缓旋开二氧化硫钢瓶的出口阀，气体流速以洗气瓶中的硫酸和锥形瓶中溶液内出连续气泡为宜。直至总重量增加至72g为止。再用无水甲醇稀释至1000ml，摇匀，避光放置24小时备用。 4 费休氏试液的标定及供试品的测定 4.1 自身作指示剂法 4.1.1 用具和准备 4.1.1.1 用具包括干燥器一个，30ml锥形瓶和翻口橡皮塞数个或带橡皮塞的供注射用抗生素的小瓶数个。10ml自动滴定装置2套(分别贮放费休氏试液和无水甲醇)。 4.1.1.2 准备将磨口自动滴定管装置的下支管连接一个经硅胶瓶除湿的双联球，顶部的上支管连接一个装有硅胶的干燥管，取一带橡皮塞的玻瓶，将两个注射器针头刺入橡皮塞至小瓶中，一个针头供排气用，另一个针头用乳胶管与滴定管尖端相连，供加入费休氏试液用。把试液加入干燥的贮液瓶中，旋转活塞使贮液瓶与滴定管接通，挤压双联球使试液压至零刻度(注意不要用力过猛，否则试液将从上支管冲出)，旋转活塞，接通滴定管尖端，用试液排出乳胶管与注射器针头中的空气，直至排出的液体与试液的颜色一致时为止，关闭活塞。 4.1.2 标定取重蒸馏水约1030mg，精密称定，置干燥的带橡皮塞玻瓶中