酶制剂在鱼类饲料中的应用.pdf

星垦墅垂国鱼壁兰兰：兰Q ! ! 堡! 堕型型笪垫查里笙皇堕旦! 塑型 圃卿圈癌画圆徊卿固磨圃 徐奇友王志香 摘要：随着饲料工业的发展，酶制剂的应用越来越得到重视，但鱼类自身的消化生理及饲料加工 特，占、限制了酶制剂在鱼类饲料中的应用，文章对鱼类消化酶，酶制剂的作用机理、应用和存在的问题进 行阐述，为酶制剂在鱼类饲料中应用提供借鉴。 关键词：酶制剂；鱼类；饲料；应用 中图分类号Q 8 1 4 9 文献标识码：A文章编号：1 0 0 1 9 9 1 X ( 2 0 1 1 ) S 1 一0 0 4 0 一0 4 随着动物营养研究的深入和现代生物技术的发 展，酶制剂在饲料中的应用越来越受到重视。酶制剂 在畜禽饲料上已经得到广泛的应用，其效果也被普遍 认可，但酶制剂在鱼类饲料中的应用还存在很多问 题。由于鱼类的消化生理及饲料特性与畜禽有很大的 差异，在畜禽中使用很好的酶制剂，在鱼类上却不一 定得到好的应用效果。本文将对酶制剂在鱼类饲料中 的应用进行探讨。 1 鱼类的消化酶和消化特点 1 1 鱼类的消化酶 在消化系统构成方面，鱼类与大多数脊椎动物一 样，是由消化管和消化腺两部分组成，皆是由胚胎期 原肠及其突出分化形成。其消化管町分为口咽腔( 鱼 类口腔与咽腔无明显分界，故合称为口咽腔) 、食道、 胃、肠等。鱼类的消化腺包括胃腺、肠腺、肝脏、胰脏。 肝脏有分泌、解毒、储存，甚至排泄等功能，是最大的 消化腺体，胰脏则具有分泌和内分泌的功能。鱼类的消 化酶活性是反映鱼类消化生理机能的一项重要指标， 尤其鱼类生活史早期阶段，形态、生理等都会发生很 大的变化，各种消化酶的发生是随着消化道的发育而 逐步变化完善的。因此，鱼类消化酶的研究对于研制鱼 类的配合饵料和阐明其消化吸收机理具有重要意义。 1 1 1 蛋白酶 蛋白水解酶主要位于消化道的三个不同部位，胃 ( 胃蛋白酶) 、胰腺( 胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰弹性 徐奇友，中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，博士， 研究员，1 5 0 0 7 0 ，黑龙江哈尔滨。 王志香，大连海洋大学生命科学与技术学院。 收稿日期：2 0 1 1 一0 3 2 0 基金项目：现代农业产业技术体系建设专项资金( N y c y t x 一 4 9 1 0 ) ；黑龙江水产研究所基本科研专项( 2 0 0 9 H S Y Z X - Y Z - 0 1 ) 资助 I 酶) 以及肠( 膜与细胞内酶) 。有胃鱼类胃中作用最强 的消化酶是胃蛋白酶，它先以不具有活性的酶原颗粒 的形式贮存于细胞中，在盐酸或已有活性的蛋白酶的 作用下转变为具有活性的胃蛋白酶。一般软骨鱼类最 适p H 值约为2 ，而有胃硬骨鱼类胃蛋白酶最适p H 值 在2 - 3 之间，均在较强的酸性范围之内。胃液分泌是 由食物直接刺激胃而引起的，有食或进食一定时间 后，胃液p H 值偏酸性，如解鱼空腹时胃液p H 值为 6 0 ，进食2 3h 后，p H 值为4 0 ( 尾崎久雄，1 9 8 5 ) 。因 此，鱼类胃内p H 值基本满足胃蛋白酶的发挥，但视鱼 的种类不同而异。胃蛋白酶的活性是随食物的性质不 同而变动，特别是肉食性鱼类蛋白质的消化主要集中 在胃。硬骨鱼类的肝脏和胰脏大多是混在一起的，胰 脏的分布极其复杂而散乱，研究证明：鲢、鳙鱼组织间 存在着结缔组织使之分隔，因此认为胰脏是分泌蛋白 酶的主要器官。关于鱼类肝胰脏蛋白酶最适p H 值研 究较多，但最适p H 值大都在7 0 8 7 之间，皆呈中性 或弱碱性。软骨鱼类如星鲨( M u s t e l u sm a n a z o ) 、真鲨 ( C a r c h a r h i n u sp l e u r o p t e r u s ) 等鱼肝胰脏内的胰蛋白酶 一般是没有活性的酶元，在肠致活酶的作用下被激 活，而对硬骨鱼类如鲤鱼( C y p r i n u sc a n p i o ) 等鱼的肝 胰脏研究表明，肠液能增强胰蛋白酶的作用，认为胰 主要分泌蛋白酶元。肠粘膜可以分泌有活性的蛋白酶 和肠致活酶，肠致活酶作用就是激活胰蛋白酶元。此 外，肠内还有来源于肝胰脏、幽门垂等器官分泌的胰 蛋白酶。肠蛋白酶最适p H 值大都在6 5 9 5 之间，多 为微碱性( 许晓娟，2 0 0 9 ) 。 1 1 2 脂肪酶 目前研究的主要脂类分解酶是脂肪酶和磷脂酶 A 2 。这些酶由肝胰腺分泌，作用的底物分别是i 酰甘 油和磷脂。在赤鲷肝胰腺中纯化或鉴定的脂肪酶表现 为对胆酸盐的依赖性( L i j i m a ，1 9 9 8 ) ，类似于哺乳动物 的胆酸盐激活型脂肪酶( 羧基酯水解酶) ，催化羧基酯 万方数据 徐奇友等：酶制剂在鱼类饲料中的应用 键的水解，包括i 酰甘油、胆固醇酯和脂溶性维生素 酯。磷脂酶A 2 催化不同磷脂底物的s n 一2 酯酰链水 解，产生脂肪酸和溶血磷脂( A m i ，1 9 9 6o 1 1 3 淀粉酶 有关胃淀粉酶的研究资料较少，但可以肯定胃内 存在淀粉酶。大多数硬骨鱼类胃淀粉酶最适p H 值为 弱酸性或中性。由于其活性较低，明显低于肠、肝胰脏 和幽门垂等器官的淀粉酶活性，且胃内p H 值在较强 酸性范围内，因此认为淀粉酶在胃内消化作用微乎其 微。对大麻哈鱼、南方大n 鲶等肝胰脏淀粉酶的研究 表明，淀粉酶最适p H 值从弱酸性到弱碱性，平均值近 中性，对热不稳定，淀粉酶主要南胰脏分泌，分泌机能 的强弱直接影响鱼类对淀粉的消化能力( 倪寿文， 1 9 9 0 ) 。但不同鱼类分泌器官亦有差别，有的鱼类由肝 胰脏一种器官分泌，有的鱼类肠道也是分泌淀粉酶的 重要器官。总之，鱼类各消化器官均存在淀粉酶，其活 性因鱼的种类、消化器官不同而异。鱼类的淀粉酶活 性远低于猪、禽等动物，因此，有必要在饲料中添加外 源性淀粉酶，也可以添加激活或提升体内淀粉酶活性 的物质，以提高鱼类对淀粉的利用率，减少有机物排 泄量，从而减轻水体污染。 1 2 鱼类的消化特点 鱼类终生生活在水中，有独特的消化生理特点， 其消化系统不如畜禽完善，大部分养殖鱼类无胃，大 多只有消化道，并且消化道相对于畜禽短很多，消化 道呈中性( 如鲤科鱼类) 或偏碱性，内源消化酶分泌不 足，影响饲料中营养物质的吸收，需外源酶添加辅助 消化。鱼类体内分泌消化酶的种类和组成，是长期对 环境条件适应的结果，与食性密切相关。肉食性鱼类 自身可分泌较多的脂肪酶，而草食性鱼类则分泌较多 的淀粉酶。内源性消化酶中淀粉酶的活性由高到低的 顺序是草食性、杂食性、肉食性鱼类。鱼类饲料添加外 源酶时需选择适宜中性偏碱性等条件下的酶类。 H i d a l g o 对几种鱼类消化酶活性进行了比较( 见表1 ) ， 虹鳟消化道和鲤鱼肝脏蛋白酶的活性最高，在不同 p H 值测定中，所有鱼类消化道蛋自酶活性在碱性时 最大，但鳗鱼却在酸性时最大并且蛋白酶活性最低。 对于淀粉酶活性，杂食性比肉食性活性强，在肉食性 品种中，虹鳟活性最低。 不同的生长阶段，对于饲用酶的需求也存在一定 的差异。幼体消化系统发育不完善，内源性消化酶分 泌不足，在饲料中添加内源性消化酶，可以促进水生 动物对食物中蛋白质、淀粉和脂肪的消化，提高生长 率。沈文英( 2 0 0 2 ) 测定银鲫不同生长阶段的消化道内 蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶的活性，发现在不 同生长阶段蛋白酶和脂肪酶的活性基本不变，纤维素 酶和淀粉酶的活性随年龄的增加不断上升。 季节变化对鱼类消化酶种类和活性也有影响。由 于环境条件变化对生物的生理和生化反应有很大的 影响，因此，鱼类随季节不同和温度的变化，其消化酶 的活力和组成也有一定的变化( 刘文斌，2 0 0 1o 表15 种不同鱼类肝脏和消化道3 7 测定蛋白酶和 淀粉酶活一陛( m e a n + S E M 。n = 5 1 肝脏消化道 品种蛋r I 酶活性淀粉酶活十宅蛋n 酶活性淀粉酶活性 ( U m g 蚩白) ( U m g 蛋门)( U r a g 蛋I ) ( U r a g 蛋白) 鲤鱼1 0 4 5 0 4 3 61 0 7 9 6 7 3 22 5 0 0 6 27 2 5 3 - - 8 4 6 金鱼 O 0 7 2 0 0 l l 2 3 8 0 4 1 9 2 0 l 0 1 l7 5 4 7 1 5 7 6 丁鲷O 7 8 8 ( 1 0 81 3 1 3 J 3 21 7 0 O 2 91 9 3 7 2 6 7 金又鲷0 0 8 2 0 0 1 22 6 6 0 3 80 8 l O 2 41 7 5 0 2 8 虹鳟0 1 2 4 O 0 0 60 0 0 - + 0 0 03 4 4 土O 4 51 3 0 - 0 0 7 欧洲鳗鱼0 0 1 7 + 0 0 0 80 7 6 土0 0 80 4 6 0 0 51 4 0 0 0 7 注：蛋f j 酶活性为p H 值1 5 、3 、4 、7 、8 5 、9 和l O 时测定值之和。淀 粉酶活性是在p H 值7 5 时测定( H i d a l g o ，1 9 9 9 ) 。 2 酶制剂的作用机理 依所含酶的种类数量划分，饲料用酶制剂分为单 一酶制剂和复合酶制剂，其中复合酶制剂效果优于单 一酶制剂，主要是由于复合酶制剂中各种酶相互补充 的叠加效应和协同效应。酶制剂提高饲料营养成分的 利用率，主要通过4 个方面。 2 1 破解细胞壁，释放营养物质 玉米、小麦、豆粕和棉粕等植物细胞肇内的许多 可消化营养物质不能充分与消化酶接触而不被消化 吸收。通过添加鱼类不能分泌的纤维素酶、果胶酶和 B 一葡聚糖酶等，降解植物细胞壁，释放细胞壁中的营 养物质，例如，阿拉伯木聚糖酶、B 一葡聚糖酶、甘露聚 糖酶、纤维素酶和果胶酶能破坏细胞壁中非淀粉多糖 ( N S P ) 、木质素、蛋白质、脂类和矿物质组成的复杂交 联结构，使相应的N S P 降解成一些小分子片段，释放 出各种营养物质，提高营养物质的消化率。 2 2 补充内源酶的不足，提高营养物质的消化率 酶制剂通过二个途径提高内源酶的活性：一是 稚、幼鱼消化道和消化腺发育不完善，内源消化酶种 类不全、数量不足；高密养或应激下鱼消化紊乱，分泌 消化酶的能力下降，添加淀粉酶和蛋白酶制剂可补充 内源酶的不足；二是消除饲料中抑制内源消化酶活性 的因子和N S P 对消化酶的屏蔽，提高鱼类消化酶的活 性。麦类中的N S P 抑制蛋白酶、淀粉酶、二糖酶和脂肪 万方数据 徐奇友等：酶制剂在鱼类饲料中的应用 酶的活性( 于旭华，2 0 0 1 ) ，添加N S P 酶能消除其对消 化酶的抑制，促进饲料营养成分的消化( A l m i r a l l ，1 9 9 5o 2 3 改变肠壁结构，降低肠道食糜粘度，提高营养成 分的吸收能力 外源酶制剂可使胃肠道环境变化，使肠壁变薄， 微绒毛变长，增加食物吸收面积。同时可降低食糜的 粘度，增加酶和食物的接触机会，提高消化率。 2 4 促进内源酶的分泌 对于添D n J , b 源性消化酶后是否会对内源性消化酶 产生影响一直缺乏一致的结论，主要原因在于无法解 决有效区分不同来源消化酶这一难题( 姚建国，2 0 0 2 ) 。 黎军胜等( 2 0 0 5 ) 在研究外源酶对奥尼罗非鱼 ( O r e o c h r o m i s n i l o t i c u s x O a u r e u s ) 内源消化酶活性的影 响时发现，随着外源酶制剂添加量的提高，消化道脂肪 酶的活性呈上升趋势，但淀粉酶活性却略有降低。研究 显示，外源酶的添加能增加食糜中消化分解产物的含 量，刺激肠道化学感受器诱导促胰酶素( C C K ) 的分泌， 进而促进消化酶的分泌，在许多鱼类的肠道黏膜检测 到了类似C C K 的化合物，当肠道接受游离脂肪酸( F F A ) 和游离氨基酸( F A A ) 的刺激会引起这一类物质释放， 并引发胰酶的分泌( E i n a r s s o n ，1 9 9 7 ；刘d , 冈l l ，2 0 0 2 ) 。 3 酶制剂在鱼类养殖中的应用 目前关于酶制剂在鱼类养殖中的应用多是饲养 效果的报道，涉及的酶制剂种类不下1 5 种，养殖的常 见鱼类有l O 余种，主要有4 个方面的功能。 3 1 提高饲料消化吸收率，促进鱼类生长 鱼类不能分泌木聚糖酶和纤维素酶，添加这2 种 酶可提高鱼类对饲料的消化率和其增重率。王纪亭等 ( 2 0 0 9 ) 给体质量01 51 ：t 0 4 3 ) g 的草鱼( C t e n o p h a r y n g o d o n i d e l l a ) 投喂添加6 0 0 、9 0 0m g k g 复合酶制剂的饲料， 特定生长率分别提高了1 2 4 2 和1 3 0 7 ，饲料系数 降低了1 5 。6 9 和1 5 0 3 。高春生( 2 0 0 6 ) 等对草鱼的 研究也获得了类似结果。徐国武等( 2 0 0 0 ) 在鲤的大麦 基础饲料中添加B 一葡聚糖酶，粗蛋白和粗脂肪的消 化率分别提高了5 0 8 和5 4 5 。罗非鱼摄食添加 0 0 7 5 木聚糖酶的饲料时，鱼对饲料中干物质、粗蛋 白和粗脂肪的消化率分别提高8 3 9 、4 3 2 和2 6 5 ( 宁桂玲，2 0 0 1o 钟国防等( 2 0 0 5 ) 对尼罗罗非鱼、周小 秋( 2 0 0 1 ) 、R a j i a n ( 1 9 9 9 ) 等对鲤、王爱民对异育银鲫等 的研究也得到了类似结果。 3 2 改善水产动物的免疫力，提高鱼类的抗逆性 黄锋等( 2 0 0 8 ) 在草鱼和异育银鲫饲料中添加含 木聚糖酶和B 一葡聚糖酶的复合酶制剂，生长加快，免 疫力增强。钟国防等( 2 0 0 5 ) 发现，尼罗罗非鱼摄食添 加酶制剂的饲料后，S O D 和溶菌酶的活性增强，非特 异性免疫力增高。 3 3 增加鱼类对营养元素的吸收，改善养殖环境 鱼类内源性消化酶分泌不足或抗营养因子制约 了饲料中蛋白质、有机磷和糖等物质的利用而随粪便 排入水中，污染了水体。酶制剂使饲料中的营养物质 利用率提高而减少了氮、磷的排放量，改善了水质和 环境。占海红等( 2 0 0 4 ) 在基础饲料中添加5 0 0 、10 0 0 和1 5 0 0U k g 植酸酶，饲喂5 1g 黄河鲤，黄河鲤日增 重分别提高8 6 9 ( P 0 0 5 ) 、1 5 9 0 ( P 0 0 5 ) ，粪中总磷含量分别降低4 0 1 7 ( P 0 0 5 ) 、 7 3 5 0 ( P 0 0 5 ) 和6 7 5 9 ( P O 0 5 ) 。C a i n 等( 1 9 9 5 ) 将2g 植酸酶溶解在p H 值5 0 的含柠檬酸缓冲溶液 的1L 水中，再加1k g 大豆粉，混匀，加热至5 0 5 5 ， 处理5 - 6h 。用预先经( N ) 植酸酶处理和未经( N T ) 植 酸酶处理的虹鳟商品饲料，喂养体重1 9g 的虹鳟。结 果表明，第1 0 周时，摄食基础饲料( C R ) 的鱼生长慢 于摄食实验饲料的鱼，而饲料系数却高于摄食实验饲 料的鱼，原因是蛋白质利用率低。摄食添加磷量低和 未经酶处理的饲料( N T 0 1 0 和N T 0 ) 时，体内磷和灰分 表2 摄食添加用植酸酶预处理和未处理的饲料1 0 周对虹鳟生长和磷利用的影响 。，1 - 长性能磷的利用 塑堡重型星2 查堡里型星! 些重圣! 丝2 塑塑墨墼 塑型! ! g2 耋堡旦I g ! 篓生旦幽堡垒塑型! ! 越壁堂塑g 型塑里! ! 由 C R1 9 l11 2 05 8 6 1 0 0 6 2 4 1 1 84 5 4 4 5 4 N 1 1 D 3 91 8 8 1 2 9 76 9 1 Y0 8 9 “6 8 21 2 84 8 04 2 7 N O 3 91 8 51 5 4 58 3 5 2 0 7 9 “7 6 11 O l4 7 4 3 7 5 N T 0 1 01 9 l 1 3 4 37 0 3 x0 8 9 “5 0 41 2 52 9 32 6 0 N O 1 01 9 71 5 3 7 7 8 驴0 8 3 -5 4 l0 4 42 5 9 2 1 5 N 01 9 51 4 7 77 5 7 10 8 6 。4 5 60 4 61 8 81 6 l N T 01 8 8 1 2 1 56 4 6 10 9 3 x 3 9 5 1 0 52 5 52 3 7 注：各饲料分别为预先经( N ) 植酸酶处理和未经( N T ) 植酸酶处理基础饲料( C R ) 中分别添加0 ( N O 、N T O ) 、0 1 0 ( N O 1 0 、 N T O 1 0 ) 和0 3 9 ( N 0 3 9 、N T 0 3 9 ) 脱氟磷酸盐，引自C a i n 等( 1 9 9 5 ) 。同列肩标不同字母的平均值问差异显著( P O 0 5 ) 。 万方数据 徐奇友等：酶制剂在鱼类饲料中的应用 的含量低于摄食其它饲料的鱼。N O 1 0 和N O 组粪便中 和水中磷含量最低( 见表2 ) ，表明鱼摄食用酶处理又 不额外添加磷的饲料时生长快，饲料利用率高，不污 染环境。对鲤( H u g h e s ，1 9 9 8 ) 的研究也证实了这一点。 4 酶制剂在鱼类饲料中应用存在的问题 研究酶制剂在鱼类饲料中应用的文献较多，但目 前在生产中应用的还不够广泛，已有的研究和文献 中，强调在饲料中添加酶制剂后养殖效果，但多数研 究是在实验条件下的数据，由于鱼类饲料加工多数采 用制粒或膨化，加工过程对酶的活性影响较大，限制 了酶制剂在生产上的应用。饲用酶制剂在水产饲料中 的应用，应考虑鱼类本身的生理因素及水产饲料制作 过程和使用环境因素的影响。 4 1 鱼类种类和消化生理因素 不同动物、不同生长阶段，消化道内环境差异很 大。因此，应用于一种动物的酶制剂，不一定适用于其 他动物。水生生物生活于水中，消化生理特点与畜禽 等陆生动物有很大不同，在选择酶制剂时要充分考 虑。水产动物绝大部分为无脊椎动物和低等脊椎动 物，终生或大部分时间生活在水中。体温随水温或气 温变化而变化，一般在1 0 以下就停止生长，适宜的 生长温度为1 5 3 2 。在我国大部分地区生长期为 1 5 0d ，酶在较低温度( 1 5 2 2 ) 环境条件下作用时间 达6 0d 左右，而酶的最适温度为3 0 5 0q C ，这可能会 降低酶的活性和作用效果( 刘文斌，2 0 0 1 ) 。 4 2 加工对酶活性的影响 水产动物饲料绝大多数为颗粒饲料，粉状料很 少，并且对颗粒饲料耐水性或粘结性有较高要求，在 加工制造过程中调质时间较长，高温高压会造成饲料 酶活性有很大损失，应考虑加工过程中高温对酶活性 的破坏。在制粒过程中，由于蒸汽的加入和压模机处 理时的摩擦等，温度可达6 0 1 0 0o C ，导致酶活性的损 失( S i l v e r s i d e s ，1 9 9 9 ) 。尤其在膨化饲料中，温度能到达 1 5 0 ，并同时在高压、高湿的条件下制粒，酶的活性 受到很大的损失，甚至有些酶活性已近完全丧失。目 前解决此矛盾有两种办法，一是用饲用酶制剂对饲料 原料进行制粒前预处理；二是待饲料颗粒出模后，冷 却到安全温度时把液态饲用酶制剂喷洒到颗粒表面。 4 3 鱼类饲料的特点 水产动物对脂肪的消化率最高，其次为蛋白质， 最差为淀粉。鱼类对脂肪的消化率可以达到9 0 以 上，对蛋白质的消化率为7 0 - 9 0 ，对淀粉的消化率比 较低，如鲤鱼为4 6 、虹鳟为2 6 ，对纤维素的消化率 为0 。此外，水产饲料中脂肪含量为6 。2 0 ，蛋白含 量为3 0 一5 0 、淀粉含量为3 0 一4 0 、纤维素含量 小于6 。因而，需要添加蛋白酶，以提高蛋白质的消 化吸收率，降低蛋白水平，从而降低饲料成本。又因为 鱼类肠道为中性或微碱性环境，因此，饲料中以添加 中性蛋白酶和碱性蛋白酶为宜，而不宜添加酸性蛋白 酶。在水产饲料中添加O t 一淀粉酶和糖化酶，有利于提 高水产动物对淀粉的利用，从而节约蛋白质。纤维素 在水产饲料中含量比较低，不起主要作用。因此，水产 饲料由于蛋白质和淀粉的含量较高，添加的酶制剂应 以中性蛋白酶、碱性蛋白酶、仅一淀粉酶和糖化酶为主 要酶系，酸性蛋白酶、脂肪酶、木聚糖酶、B 一葡聚糖酶、 纤维酶为小酶系。 5 小结 饲用酶制剂是目前被认为最安全的一种饲料添 加剂。随着技术的进步，酶制剂在酶活性和生产工艺 及稳定化技术上的提高，以及生产成本的降低，将在 提高鱼类饲料利用率、减少环境污染、提高经济效益 上发挥作用。但目前饲用酶制剂绝大部分是针对畜禽 研制的，应根据鱼类品种、年龄、食性、消化生理和饲 料加T 特点，研制与之相适应的专用复合酶制剂。今 后鱼类酶制剂的研究方向是：开发耐高温的酶制剂， 开发适用于不同鱼类动物的专用酶，研究酶动力学及 其变异规律、外源酶与内源酶的作用机制和酶活力检 测标准等。 参考文献 【1 】高春生，刘忠虎，肖传斌木聚糖酶对草鱼生长性能和消化率的 影响I r 1 饲料研究，2 0 0 6 ( 8 ) ：4 8 - - 4 9 【2 】黄锋，施培松，文华，等外源酶对草鱼鱼种生长及饲料表现消 化率的影响【J 】安徽农业科学，2 0 0 8 ，3 6 ( 3 ) ：1 0 5 7 1 0 5 9 【3 】黄锋，张丽，周艳萍，等外源木聚糖酶对异育银鲫生长、超氧化 物歧化酶及溶菌酶活性的影“ * 1 1 1 淡水渔业，2 0 0 8 ，3 8 ( 1 ) ：4 4 - 4 8 f 4 】黎军胜，李建林，昊婷婷外源酶和柠檬酸对奥尼罗非鱼内源消 化酶活性的影“ 向I J l 南京农业大学学报，2 0 0 5 ，2 8 ( 3 ) ：9 7 1 0 1 【5 】刘文斌饲料酶在水产动物中的应用研究叫中国饲料，2 0 0 l ( 1 3 ) ：1 8 - 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4 4 【1 6 】钟国防，周洪琪木聚糖酶和复合酶制剂P s 对尼罗罗非鱼生 长性能、消化率v Y X L I L 肉营养戍分的影响【J 】浙江海洋学院学 报：自然科学版，2 0 0 5 ，2 4 ( 4 ) ：3 2 4 - 3 2 9 【1 7 】周小秋几种酶制荆对鲤生长性能的影响叨饲料广角，2 0 0 1 ( 1 5 ) ：2 2 - 2 3 【1 8 】A l m i r a l lM ，F r a n c e s c hM A n n aM e ta 1 T h ed i f i e r e n c e si n i n t e s t i n a lv i s c o s i t yp r o d u c e db yb a r e l ya n db e t a - g h c a r m s ea l t e rd i g e s t ae n z y m ea c t i v i t i e sa n di d e a ln u t r i e n td i g e s t i b i l i t ym o r ei n 生长试验。 1 2 试验饲料 共设计8 种试验饲料，以1 2 鱼粉的典型鲫鱼饲 料配方为对照参考( D 。) ，其余试验组以植物蛋白源取 代5 0 鱼粉蛋白后的配方为基础，添加不同剂量的植 酸酶( 0 、10 0 0 、20 0 0 、40 0 0F T U k g 饲料) 和磷酸二氢 钙，以氧化钇( Y 2 0 ，) 为指示剂，形成D 1 D ，7 种配方， 具体饲料配方组成及营养水平见表1 。在饲料制作过 程中，所有原料经粉碎通过6 0 目筛，然后按配比定量 均匀混合，再加工制成硬颗粒饲料，除D ，号饲料烘干 温度为8 5 外，其余组饲料经4 5 烘干至饲料水分 含量为1 0 以下。从每种试验饲料中分别取定量的 样品，保存于一2 0 的环境中待测。 1 3 养殖试验 养殖试验在浙江一星饲料有限公司水产实验基 地的池塘网箱中进行。生长试验为期6 0d 。整个生长 试验期间的水温为1 5 2 9 ，自然光照，每天投喂2 次，每次均饱食投喂。生长试验结束后，对试验鱼停食 2 4h ，然后进行计数并称重。 1 4 样品分析 1 4 1 样品制备 b r o i l e rc h i c k st h a ni nc o c k s 叨J o u r n a lo fN u t r i t i o n ，1 9 9 5 ( 1 2 5 ) ： 9 4 7 9 5 5 【1 9 】E i n a r s s o nS ，S p e n c e rDP ，T a l b o tC E f f e c to fe x o g e n o u sc h o l e - e y s t o k i n i nO Rt h ed i s c h a r g eo ft h eg a l l b l a d d e ra n dt h es e c r e t i o no f t r y p s i na n dc h y m o t r y p s i nf r o mt h ep a