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253专题论述食品科学2006, Vol. 27, No. 01 乳铁蛋白的抗病毒活性 庞广昌，胡志和，陈庆森 ( 天津商学院生物技术与食品科学学院， 天津 3 0 0 1 3 4 ) 摘 要：和很多金属结合蛋白一样，乳铁蛋白是一种结合铁离子的糖蛋白，这种糖蛋白发现在人和牛乳中，由 中性粒细胞和几种粘膜细胞分泌。已经发现乳铁蛋白有很多功能，属于非特异性免疫系统，具有与众不同的抗病 毒活性。 本文将就目前有关乳铁蛋白抗不同病毒的活性和抗病毒模式进行综述。 乳铁蛋白表现出抗人免疫缺陷病毒 ( H I V ) 、抗 R N A 和 D N A 病毒、包括呼吸道合胞体病毒和疱疹病毒等。乳铁蛋白最主要的抗病毒机理就是作用于病 毒侵染的早期， 防止病毒对宿主细胞的识别和入侵。 这种钝化病毒侵染能力的机制是通过切断病毒对受体的接触和 识别或直接结合到病毒粒子上使其失去侵染能力。 这显然是一种全新的不同于以前的细胞因子， 如干扰素的抗病毒 机 制 。 关键词：乳铁蛋白；抗病毒；综述；乳；机制 R e v i e w s o n A n t i v i r a l A c t i v i t y o f L a c t o f e r r i n P A N G G u a n g - c h a n g ，H U Z h i - h e ，C H E N Q i n g - s e n ( B i o t e c h n o l o g y a n d F o o d S c i e n c e C o l l e g e , T i a n j i n U n i v e r s i t y o f C o m m e r c e , T i a n j i n 3 0 0 1 3 4 , C h i n a ) A b s t r a c t ： L i k e m a n y m e t a l - b i n d i n g p r o t e i n s , l a c t o f e r r i n i s a n i r o n - b i n d i n g g l y c o p r o t e i n f o u n d i n h i g h c o n c e n t r a t i o n s i n h u m a n a n d b o v i n e m i l k , i n t h e g r a n u l e s o f n e u t r o p h i l s a n d s e v e r a l m u c o s a l s e c r e t i o n s . M a n y b i o l o g i c a l f u n c t i o n s h a v e b e e n a s c r i b e d t o L F ( l a c t o f e r r i n ) . I t i s a c o m p o n e n t o f t h e n o n - s p e c i f i c i m m u n e s y s t e m w i t h d i s t i n c t a n t i v i r a l p r o p e r t i e s . T h i s p a p e r e v i e w s t h e p r e s e n t k n o w l e d g e a b o u t t h e a n t i v i r a l a c t i v i t i e s a n d , w h e n p o s s i b l e , t h e a n t i v i r a l m o d e s o f a c t i o n o f t h i s p r o t e i n . L a c t o f e r r i n d i s p l a y s a n t i v i r a l a c t i v i t y a g a i n s t H I V , b o t h D N A - a n d R N A - v i r u s e s , i n c l u d i n g r o t a v i r u s , r e s p i r a t o r y s y n c y t i a l v i r u s , a n d h e r p e s v i r u s e s . T h e m o s t a n t i v i r a l e f f e c t s o f L F a r e i n t h e e a r l y p h a s e o f i n f e c t i o n . L a c t o f e r r i n p r e v e n t s e n t r y o f v i r u s i n t h e h o s t c e l l , e i t h e r b y b l o c k i n g c e l l u l a r r e c e p t o r s , o r b y d i r e c t b i n d i n g t o t h e v i r u s p a r t i c l e s . T h i s o b v i o u s l y i s q u i t e d i f f e r e n t f r o m t h e c y t o k i n e s u c h a s I N F b e f o r e . K e y w o r d s： l a c t o f e r r i n ； a n t i v i r a l ； r e v i e w ； m i l k ； m e c h a n i s m 中图分类号 ： T S 2 5 2 . 1 文献标识码 ： A 文章编号 ： 1 0 0 2 - 6 6 3 0 ( 2 0 0 6 ) 0 1 - 0 2 5 3 - 0 5 收稿日期： 2 0 0 5 - 1 0 - 1 8 基金项目： 国家自然科学基金资助项目( 3 0 4 7 1 2 2 5 ) 作者简介：庞广昌( 1 9 5 6 - ) ，男，教授，研究方向为食品生物技术。 乳铁蛋白已经显示出对一些病毒侵染的保护作用 1 , 2 。 据M a r c h e t t i , e t a l 1 报道， 人和牛的乳铁蛋白都具有对 单纯疱疹病毒 - 1 ( H S V - 1 ) 感染的保护作用。值得注意的 是，它主要是抑制病毒的吸附。这种活性似乎与铁离 子的结合无关，因为用铁离子饱和的和不饱和的乳铁蛋 白都有相同的效果。 S w a r t , e t a l 3 发现来自人和牛的乳 铁蛋白都可以完全屏蔽掉人巨细胞病毒( H C M V ) 的复制， 并可以抑制( 乙型流感- 1 病毒) H I B - 1 诱导的细胞病理效 应。乳铁蛋白抗病毒作用已经有很多的证据，例如人 细胞巨化病毒( H u m a n c y t o m e g a l o v i r u s ) 、人单纯疱疹病 毒- 1 ( h u m a n h e r p e s s i m p l e x v i r u s - 1 ) 、 引起艾滋病的人免 疫缺陷病毒( H u m a n i m m u n o d e f i c i e n c y v i r u s , H I V ) 等。 乳 铁蛋白还可以使病毒诱导的小鼠白血病得到很好的缓解 和恢复。 近二十年来，母乳喂养婴幼儿的好处已经被广泛接 受。母乳喂养和非母乳喂养的比较研究指出，母乳喂 养的婴幼儿很少出现在其后的生活中有细菌介导的痢疾 之类的后遗症。而且，很少被轮状病毒、呼吸道合胞 体病毒( R S V ) 或对滤泡口炎病毒( V S V ) 感染 4 6 。 哺乳可能 对后代具有一种潜在的保护作用。哺乳不仅为后代提供 蛋白类营养物质，还可以为后代提供非特异性的免疫作 用( 溶菌酶、乳过氧化物酶、乳铁蛋白等) ，当然也有 2006, Vol. 27, No. 01食品科学专题论述254 特异性免疫球蛋白( I g M 、I g G 和分泌型I g A ) 的作用，另 外还有细胞因子或前列腺素等对新生儿起保护作用。在 接下来的研究中，科学家发现乳至少还具有广谱的抗病 毒作用，其中起主要作用的是乳铁蛋白。乳铁蛋白可 以抗人类和动物，包括R N A和D N A病毒在内的多种病 毒。以下作简要综述。 1乳铁蛋白的抗病毒活性 1 . 1乳铁蛋白对C 型肝炎病毒( H e p a t i t i s C v i r u s , H C V ) 的 抗性 乳铁素( L F c i n ) ，一个乳铁蛋白被胰蛋白酶消化所 得到的N -末端区域，已经证明它具有更强的抗细菌和 真菌特性，同时它还具有抗 H C V的活性 7 。抗病毒实 验指出，它抗病毒的作用可能是干扰 H C V和靶细胞的作 用。因为如果再接种病毒的同时或之前使用 L F最为有 效。减少 L F和 H C V接触的时间就会增加感染病毒的机 会。L F结合到H C V E 1和E 2的核衣壳上可以阻止病毒 对靶细胞的吸附 8 。而且，实验证明 L F在体内可以干 扰 H C V E 2 对靶细胞的结合，因为抗人 L F的抗体在 L F 存在时，也可以沉淀其分泌的和胞内的E 2 。在有可以 和 L F 结合的蛋白质存在时，它就不再和E 1 或E 2 的外壳 蛋白结合。 1 . 2对轮状病毒( R o t a v i r u s ) 的抗性 用流式细胞仪测定，L F具有和病毒粒子结合从而 阻止病毒和靶细胞结合的能力 9 。因此其抗轮状病毒的 作用是钝化了病毒和靶细胞受体结合的核衣壳蛋白。因 为和很多其他病毒相比，轮状病毒不再能够和粘多糖的 肝素硫酸盐结合，但是，L F不能完全抑制轮状病毒和 受体的结合。免疫组织化学分析表明，L F在病毒入侵 以后也可以干扰病毒抗原的合成。因此，L F不仅可以 阻止感染，还可以在病毒进入靶细胞之后发挥抗病毒活 性。虽然 L F已经有大量的研究证明了它的抗病毒活性 1 0 ，但后一个作用的分子基础目前还不清楚。 1 . 3抗F r i e n d 病毒或F r i e n d 病毒复合体( F r i e n d v i r u s c o m p l e x , F V C ) 这是一种鼠科动物逆转录病毒，在小鼠感染3个月 之后产生红白血病( E r y t h r o l e u k e m i a ) 。研究 1 1 1 3 表明， 人乳铁蛋白在患有白血病的小鼠模型中具有抗F V C活 性，L F在离体条件下对F V C的感染不起作用。因此， 观察结果表明在这些动物中的抗病毒机制可能是L F 对骨 髓组织生成起调控作用。 1 . 4抗脊髓灰质炎病毒( P o l i o v i r u s ) 脊髓灰质炎病毒引发小儿麻痹症，是一种肠道病 毒, 为微小R N A病毒的一种。微小病毒的特性是它们相 对比较小的基因组，含有单链的正链R N A分子，包装 在简单的核衣壳内， 没有被膜。 M a r c h e t t i , e t a l 1 4 证明 L F 具有在体外抗该病毒的活性。在病毒感染过程中，不 同的时间加入 L F ，发现L F 抗脊髓灰质炎病毒是在病毒 感染的早期。免疫荧光染色实验表明，L F在病毒和靶 细胞结合时起作用，并干扰病毒进入靶细胞。 1 . 5抗呼吸道合胞体病毒( R e s p i r a t o r y s y n c y t i a l v i r u s ) 呼吸道合胞体病毒( R S V ) ，属于副黏液病毒科，该 病毒的感染主要引发小孩和幼儿呼吸道急性疾病。但 是，母乳中的 L F在很低的浓度既可以表现出抗 R S V感 染的活性 1 5 。L F 抗R S V 病毒的活性机理和基本情况还 没有得到详细说明。 1 . 6抗人免疫缺陷病毒( H u m a n i m m u n o d e f i c i e n c y v i r u s ( H I V ) ) H I V 即人免疫缺陷病毒， 属于慢病毒科( l e n t i v i r i d a e ) ， 也是一种逆转录病毒，其感染引发人类艾滋病( A I D S ) 。 基因组为单链 R N A ，包装在核衣壳中。核衣壳周围有 一个被膜包裹，被膜上含有糖蛋白，这些糖蛋白涉及 到病毒对靶细胞的入侵。S e m b a , e t a l 等 1 6 证明，母亲 血清中的L F 水平低下和预产期的胎儿H I V 传播呈线性相 关。所有这些临床数据证明，L F在体内具有防御H I V 传递的功能。人，也包括牛乳 L F已经证明在离体条件 下可以抑制H I V 感染 1 7 。L F和抗艾滋病药物齐多夫定 ( Z i d o v u d i n e ) 联用具有协同效应 1 8 。L F 抗H I V 感染的机 制是发生在病毒侵染的早期，可能发生在病毒对靶细胞 的吸附期 1 9 。在病毒入侵靶细胞以后再使用L F ，其抗 病毒活性减少。L F 可能结合到糖蛋白 g p 1 2 0的V 3环的 G P G R A F 结构域上 2 0 。L F 带负电荷的铰链区可能负责对 g p 1 2 0 的结合。这可能就是L F 抗H I V 感染的主要原因， 因为g p 1 2 0 在H I V 入侵靶细胞时负责识别并结合 C D 4 或 趋化因子受体( C h e m o k i n e r e c e p t o r s ) 2 1 。总起来说，所 有这些研究都显示没有铁离子饱和的L F不能起很大作 用。而饱和的和半饱和的L F则表现出抗H I V活性，虽 然半饱和的L F表现了比全饱和的L F有更好的抗性。 1 . 7抗疱疹病毒( H e r p e s v i r i d a e ) 单纯疱疹病毒( H e r p e s s i m p l e x v i r u s e s ) 分为1 型和2 型( H S V - 1 和- 2 ) ，属于- 疱疹病毒科。H S V - 1 和 - 2 在 正常的情况下所产生的症状轻微，但是，在免疫功能 低下的病人中，如艾滋病人、器官移植病人和未成年 的婴、幼儿中就可能产生严重的问题，甚至危及生命。 已有系列报道证明牛和人L F 抗H S V - 1 和- 2 两种病毒，包 括半饱和和全饱和铁的L F 2 2 。 F u j i h a r a , e t a l 2 3 则报道了 在离体条件下 L F 抗H S V - 1的活性，但是同时也报道了 小鼠角膜炎模型中的体内抗病毒作用。实验证明，1% 的L F溶液即可以有效降低病毒感染，但是，病毒的复 制并没有完全被抑制。还有其他的研究组也证明了在离 体条件下L F 抗H S V - 1 和- 2 的情况 2 4 。抗单纯疱疹病毒 的机制主要作用于感染早期。实验证明L F可以抑制病 255专题论述食品科学2006, Vol. 27, No. 01 毒对靶细胞的吸附。不仅完整的L F可以抑制 H S V ，L F 的胰蛋白酶水解物也表现出抗病毒活性。经纯化，这 些胰蛋白酶水解物中，有4 个不同的组分，2 个来自C - 和 N -端球形结构组分，表现出抗病毒活性。H a m m e r , e t a l 还证明乳铁素( L F c i n ) ，来自N - 端球形区的2 4 个氨 基酸残基的短肽，也表现出抗病毒活性。这两项研究 揭示出，虽然这些肽段表现出抗H S V活性，但不如天 然L F 效果好。 J e a n e t t e H a m m e r A n d e r s e n , e t a l 2 5 调查了 人和牛乳铁素( L F c i n ) 抗人单纯疱疹病毒( H S V ) - 1 和H S V - 2 的情况。利用 L F 和L F c i n 抗临床上分离的H S V - 1 和H S V - 2 ，包括阿昔洛韦( A C V ) - 抗性毒株，他们还研究了 5 0 % 作用浓度( E C5 0) 。他们进一步评价了将L F 或L F c i n 与A C V 联合用来抗 H S V - 1 和H S V - 2 的情况。结果，在L F 或L F c i n 与 A C V联合使用时观察到具有协同抗 H S V实验室毒株的 作用。A C V 和L F 或L F c i n 联用的5 0 % 作用浓度( E C5 0) 比 A C V 的单独使用减少2 至7 倍。 T e t s u y a T a n a k a , e t a l 2 6 对抗犬科疱疹病毒( C H V ) 的研究发现，牛乳铁蛋白( b L F ) 既可以在离体条件下抑制病毒感染，又可以在 M a d i n - D a r b y犬肾细胞( M D C K ) 内抑制病毒( C H V ) 的复制。将 C H V 和 b L F 一起培养可以阻止病毒感染 M D C K 细胞。而 且，从被 C H V感染的M D C K细胞中分离的蛋白质进行 S D S - P A G E电泳分析，再将b L F和 C H V结合蛋白通过 W e s t e r n b l o t t i n g 方法进行鉴定，他们证明了b L F 的抗 C H V活性是由于b L F和C H V以及M D C K细胞的相互作 用。b L F 抑制病毒的繁殖也依赖于乳铁蛋白对铁的饱和 程度。他们同时也证明了人乳铁蛋白的抗 C H V活性。 1 . 8抗细胞巨化病毒( C y t o m e g a l o v i r u s ，C M V ) 细胞巨化病毒( C M V ) 属于- 疱疹病毒科。和其他 疱疹病毒相似，C M V呈现潜在的和持久的感染。事实 上，其感染和发病往往需要艾滋病的辅助作用。换言 之，艾滋病人往往会受到该病毒的侵染和折磨，从而 缩短艾滋病人的生存时间 2 7 。早在1 9 9 4 ，就发现L F 在 体外可以抗 C M V 。后来的研究进一步证明了这一作用 2 8 。L F 抗这种病毒的机理可能是干扰该病毒对靶细胞的 入侵 2 9 。因为将L F和靶细胞一起培养可以增加其抗病 毒感染作用，L F对乙酰( 型) 硫酸肝素糖蛋白( H e p a r a n s u l p h a t e p r o t e o g l y c a n s , H S P G s ) 以低亲和力结合， 以阻 止病毒和靶细胞的结合 3 0 。L F的N -末端区域是其抗病 毒特别需要的，删除负责和H S P G s结合的精氨酸延伸的 一段，就会逐渐消除 L F的抗病毒活性。当增加L F 的正 电荷时，其抗病毒活性也随之增加，而增加L F的负电 荷时，其抗病毒活性随之减少。进一步的研究指出L F 的保护作用也是由于其上调自然杀伤细胞的杀伤作用， 这种杀伤作用清除了病毒感染。L F在离体和在体的条件 下都可以激活自然杀伤细胞、单核细胞和粒细胞 3 1 。 L e o n i e B e l j a a r s , e t a l 3 2 对乳铁蛋白和C M V 相互作用 的机制进行了系统研究。他们同时研究了在没有免疫抑 制和有免疫抑制的情况下，小鼠C M V模型动物体内乳 铁蛋白的抗病毒活性。他们注意到一个相似分子量的蛋 白，例如人血清白蛋白( H S A ) ，亦或相似分子量的 - 乳球蛋白，H A S自身在体外对C M V没有抗性，而阳离 子化了的H A S则和乳铁蛋白相似，具有抑制 C M V复制 的活性。进一步的实验证实所有选择的阳离子蛋白都具有 在早期抑制 C M V的活性，但不能有效地抑制它的复制。 1 . 9抗阿尔法病毒( A l p h a v i r u s ) 阿尔法病毒属于披膜病毒科, 为正二十面体，衣壳 里面容纳 R N A 、拥有双重脂质层封套的病毒，封套上 面有许多称为“棘“的蛋白质突起。该病毒侵入细胞内 时， 病毒的棘与寄主细胞膜上的昆布氨酸( L a m i n i n e ) 蛋白 质受体结合，完成入侵的第一步。该病毒可引起“辛 德毕斯热综合征” 。 B a r r y - L e e W a a r t s a , e t a l 3 3 用阿尔法 病毒，适合于和硫酸乙酰肝素( H e p a r a n S u l f a t e ，H S ) 相 互作用，作为工具来调查乳铁蛋白抗病毒机理。乳铁 蛋白通过H S 的结合抑制病毒对 B H K - 2 1 细胞的感染，但 是，这种感染方式仅适合于阿尔法病毒，不适合于辛 德毕斯病毒( S i n d b i s v i r u s ，S I N ) 或塞姆利基森林病毒 ( S F V ) 。乳铁蛋白也可以抑制放射性同位素标记的 H S 结 合病毒和B H K - 2 1 细胞或含有脂连接的肝磷脂的脂质体作 为受体的细胞的结合。另一方面，低p H诱导的病毒和 脂质体的融合，发生在独立的病毒和受体之间的相互作 用的过程中，是不感染的。该项研究表明，乳铁蛋白 并不是作用于病毒上，但可以结合到细胞表面。电荷 改良的人血清白蛋白含有正的静电荷，对于S I N和 S F V 病毒有相似的抗性，这说明乳铁蛋白的抗病毒活性与其 带正电荷有关。所以我们可以得出结论：乳铁蛋白通过 干扰病毒和受体之间的相互作用，而不是通过后来的侵 入或侵入以后的复制等步骤来抑制病毒感染。 1 . 1 0 抗人乳头瘤病毒( H u m a n p a p i l l o m a v i r u s ，H P V ) 人乳头瘤病毒( H u m a n p a p i l l o m a v i r u s , H P V ) 侵染产生 生殖器疣，是子宫颈癌的前兆和前提条件。H P V是一 种嗜上皮性病毒，在人和动物中分布广泛，有高度的 特异性。长期以来，已知H P V可引起人类良性的肿瘤 和疣，例如生长在生殖器官附近皮肤和粘膜上的人类寻 常疣、尖锐湿疣以及生长在粘膜上的乳头状瘤。目前 如果早期诊断、早期治疗，是可以治愈的，但是如果 不治疗，将会在几年后引起麻痹、严重的心智疾病及 死亡。HPV也可以用细胞表面的乙酰肝素作为受体。 P e t e r D r o b n i , e t a l 3 4 研究了乳铁蛋白抑制H P V 入侵H a C a T 细胞和H P V - 1 6 病毒样粒子( V L P s ) 和人乳铁蛋白或牛乳铁 蛋白的作用。用C F D A - S E -标记的V L P s 实验证明，L F 抑制H P V - 1 6 粒子的内在化。通过W e s t e r n b l o t i n g 实验， 他们还发现L F 抑制H P V - 1 6 V L P 结合到H a C a T 细胞表面 2006, Vol. 27, No. 01食品科学专题论述256 的作用有剂量依赖性。和人乳铁蛋白相比牛乳铁蛋白是 一种更有效的 H P V 入侵抑制因子。目前也已经搞清楚 L F 作用于H P V进入细胞的过程。 1 . 1 1 抗腺病毒( A d e n o v i r u s ) 将人类腺病毒 2型接种在人喉鳞状细胞癌细胞系 ( H u m a n e p i d e r m o i d c a r c i n o m a l a r y n x ，H E p - 2 ) 中， A g o s t i n a P i e t r a n t o n i , e t a l 3 5 最近证明， 乳铁蛋白作为一 种抗微生物的糖蛋白，可以抑制腺病毒的感染。其抑 制机理是通过和病毒竞争粘多糖受体。该项研究工作证 明了乳铁蛋白可以结合到病毒粒子上的v i r a l - I I I 和I I I a 结 构多肽，从而钝化病毒对受体的识别能力。他们通过 W e s t e r n b l o t i n g 分析证明b L F 特异性地结合到病毒的蛋 白上，而且通过负染色的电镜观察到 b L F和病毒的相互 作用实际上是发生在完整腺病毒的颗粒中，由5个外壳 蛋白包围而成的亚单位( P e n t o n ) 上。总之, 不管腺病毒利 用不同的受体的能力如何，如柯萨奇病毒( 一种引起呼 吸道等疾病的病毒) 和腺病毒利用受体、整合素 ( I n t e g r i n s ) 和H S G A G s 来感染细胞，乳铁蛋白都至少可 以防止这些病毒和细胞的相互作用。可见，乳铁蛋白完 全可以作为这些病毒的天然克星，通过阻止病毒和靶细 胞受体的结合和通过阻止病毒入侵来干扰病毒的感染。 2乳铁蛋白抗病毒的特点及应用展望 已知的各种抗病毒因子的抗病毒作用，如干扰素 等，大多数都是通过促进细胞抗病毒感染的能力和直接 干扰病毒在细胞中的繁殖。然而，随着乳铁蛋白抗病 毒机理的研究的不断拓展和深入，这个概念显然已经需 要修正了。从目前的研究结果来看，乳铁蛋白的抗病 毒活性虽然也涉及到直接钝化病毒和受体的识别、抑制 病毒在细胞中的繁殖和刺激细胞合成抗病毒的细胞因子 等多种机制，但是大部分都是直接和病毒或病毒的受体 结合，从而直接消除病毒的入侵能力。这种抗病毒机 制是一种全新的机制，它不仅显示出先天性免疫系统的 主要抗微生物和抗病毒特性，构成了先天性免疫的快速 反应机制，同时也为寻找新的抗病毒药物提供了一条新 的思路和途径。乳铁蛋白出现在动物乳、特别是初乳 中，可以为人类，特别是新生儿提供多种生物功能， 尤其是调节免疫、抗微生物和抗病毒等病原体的抵御功 能。大量的研究证明，乳铁蛋白还出现在眼、呼吸道、 消化道和泄殖腔中，它为这些每天都要面对大量的成千 上万的病原微生物的入侵的粘膜系统提供了第一道，也 是最重要的防线。因此乳铁蛋白的研究、开发与应用 已经，开始成为科学家研究的焦点。 参考文献： 1 M a r c h e t t i M , C L o n g h i , M P C o n t e , e t a l . L a c t o f e r r i n i n h i b i t s h e r p e s s i m p l e x v i r u s t y p e 1 a d s o r p t i o n t o V e r o c e l l s J . A n t i v i r a l R e s , 1 9 9 6 , 2 9 : 2 2 1 - 2 3 1 . 2 S h i m i z u K , H M a t s u z a w a , K O k a d a , e t a l . L a c t o f e r r i n - m e d i a t e d p r o t e c - t i o n o f t h e h o s t f r o m m u r i n e c y t o m e g a l o v i r u s i n f e c t i o n b y a T - c e l l - d e p e n d e n t a u g m e n t a t i o n o f n a t u r a l k i l l e r c e l l a c t i v i t y J . A r c h V i r o l , 1 9 9 6 , 1 4 1 : 1 8 7 5 - 1 8 8 9 . 3 S w a r t P J , K u i p e r s M E , S m i t C , e t a l . L a c t o f e r r i n : a n t i v i r a l a c t i v i t y o f l a c t o f e r r i n M . N e w Y o r k : P l e n u m P r e s s , 1 9 9 8 . 2 0 5 - 2 1 3 4 L o p e z A l a r c o n M , V i l l a l p a n d o S , F a j a r d o A . B r e a s t f e e d i n g l o w e r s t h e f r e q u e n c y a n d d u r a t i o n o f a c u t e r e s p i r a t o r y i n f e c t i o n a n d d i a r r h e a i n i n f a n t s u n d e r s i x m o n t h s o f a g e J . J o u r n a l o f N u t r i t i o n , 1 9 9 7 , 1 2 7 ( 3 ) : 4 3 6 - 4 4 3 . 5 C h a T A , T o m E , K e m b l e G W , e t a l . H u m a n c y t o m e g a l o v i r u s c l i n i c a l i s o l a t e s c a r r y a t l e a s t 1 9 g e n e s n o t f o u n d i n l a b o r a t o r y s t r a i n s J . J o u r n a l o f V i r o l o g y , 1 9 9 6 , 7 0 ( 1 ) : 7 8 - 8 3 . 6 W e l s h J K , M a y J T . A n t i - i n f e c t i v e p r o p e r t i e s o f b r e a s t m i l k J . J o u r n a l o f P e d i a t r i c s , 1 9 7 9 , 9 4 ( 1 ) : 1 - 9 . 7 I k e d a M , N o z a k i A , S u g i y a m a , e t a l . C h a r a c t e r i z a t i o n o f a n t i v i r a l a c t i v - i t y o f l a c t o f e r r i n a g a i n s t h e p a t i t i s C v i r u s i n f e c t i o n i n h u m a n c u l t u r e d c e l l s J . V i r u s R e s e a r c h , 2 0 0 0 , 6 6 ( 1 ) : 5 1 - 6 3 . 8 Y i M Y , K a n e k o S , Y u D Y , e t a l . H e p a t i t i s C v i r u s e n v e l o p e p r o t e i n s b i n d l a c t o f e r r i n J . J o u r n a l o f V i r o l o g y , 1 9 9 7 , 7 1 ( 8 ) : 5 9 9 7 - 6 0 0 2 . 9 S u p e r t i F , A m m e n d o l i a M G , V a l e n t i P , e t a l . A n t i r o t a v i r a l a c t i v i t y o f m i l k p r o t e i n s : l a c t o f e r r i n p r e v e n t s r o t a v i r u s i n f e c t i o n i n t h e e n t e r o c y t e - l i k e c e l l l i n e H T - 2 9 J . M e d i c a l M i c r o b i o l o g y a n d I m m u n o l o g y ( B e r l i n ) , 1 9 9 7 , 1 8 6 ( 2 - 3 ) : 8 3 - 9 1 . 1 0 G r o v e r M , G i o u z e p p o s O , S c h n a g l R D , e t a l . E f f e c t o f h u m a n m i l k p r o s t a g l a n d i n s a n d l a c t o f e r r i n o n r e s p i r a t o r y s y n c y t i a l v i r u s a n d r o t a v i r u s J . A c t a P a e d i a t r i c s , 1 9 9 7 , 8 6 ( 3 ) : 3 1 5 - 3 1 6 . 1 1 L u L , H a n g o c G , O l i f f A , e t a l . P r o t e c t i v e i n f l u e n c e o f l a c t o f e r r i n o n m i c e i n f e c t e d w i t h t h e p o l y c y t h e m i a - i n d u c i n g s t r a i n o f F r i e n d v i r u s c o m p l e x J . C a n c e r R e s e a r c h , 1 9 8 7 , 4 7 : 4 1 8 4 - 4 1 8 8 . 1 2 C h e n L T , L u L , B r o x m e y e r H E . E f f e c t s o f p u r i f i e d i r o n - s a t u r a t e d h u m a n l a c t o f e r r i n o n s p l e e n m o r p h o l o g y i n m i c e i n f e c t e d w i t h F r i e n d v i r u s c o m p l e x J . A m e r i c a n J o u r n a l o f P a t h o l o g y , 1 9 8 7 , 1 2 6 : 2 8 5 - 2 9 2 . 1 3 V o r l a n d L H . L a c t o f e r r i n : a m u l t i f u n c t i o n a l g l y c o p r o t e i n J . A p m i s , 1 9 9 9 , 1 0 7 ( 1 1 ) : 9 7 1 - 9 8 1 . 1 4 M a r c h e t t i M , S u p e r t i F , A m m e n d o l i a M G , e t a l . I n h i b i t i o n o f p o l i o v i - r u s t y p e 1 i n f e c t i o n b y i r o n - , m a n g a n e s e - a n d z i n c - s a t u r a t e d l a c t o f e r r i n J . M e d i c a l M i c r o b i o l o g y a n d I m m u n o l o g y ( B e r l i n ) , 1 9 9 9 , 1 8 7 ( 4 ) : 1 9 9 - 2 0 4 . 1 5 G r o v e r M , G i o u z e p p o s O , S c h n a g l R D , e t a l . E f f e c t o f h u m a n m i l k p r o s t a g l a n d i n s a n d l a c t o f e r r i n o n r e s p i r a t o r y s y n c y t i a l v i r u s a n d r o t a v i r u s J . A c t a P a e d i a t r i c s , 1 9 9 7 , 8 6 ( 3 ) : 3 1 5 - 3 1 6 . 1 6 S e m b a R D , M i o t t i P G , L a n Y , e t a l . M a t e r n a l s e r u m l a c t o f e r r i n a n d v e r t i c a l t r a n s m i s s i o n o f H I V J . A I D S , 1 9 9 8 , 1 2 ( 3 ) : 3 3 1 - 3 3 2 . 1 7 S w a r t P J , H a r m s e n M C , K u i p e r s M E , e t a l . C h a r g e m o d i f i c a t i o n o f p l a s m a a n d m i l k p r o t e i n s r e s u l t s i n a n t i v i r a l a c t i v e c o m p o u n d s J . J o u r n a l o f P e p t i d e S c i e n c e , 1 9 9 9 , 5 ( 1 2 ) : 5 6 3 - 5 7 6 . 1 8 V i a n i R M , G u t t e b e r g T J , L a t h e y J L , e t a l . L a c t o f e r r i n i n h i b i t s H I V - 1 r e p l i c a t i o n i n v i t r o a n d e x h i b i t s s y n e r g y w h e n c o m b i n e d w i t h z i d o v u d i n e J . A I D S , 1 9 9 9 , 1 3 ( 1 0 ) : 1 2 7 3 - 1 2 7 4 . 1 9 P u d d u P , B o r g h i P , G e s s a n i S , e t a l . A n t i v i r a l e f f e c t o f b o v i n e l a c t o f e r r i n s a t u r a t e d w i t h m e t a l i o n s o n e a r l y s t e p s o f h u m a n i m m u n o d e f i c i e n c y v i r u s t y p e 1 i n f e c t i o n J . I n t e r n a t i o n a l J o u r n a l o f B i o c h e m i s t r y a n d C e l l B i o l o g y , 1 9 9 8 , 3 0 ( 9 ) : 1 0 5 5 - 1 0 6 2 . 2 0 S w a r t P J , K u i p e r s M E , S m i t C , e t a l . A n t i v i r a l e f f e c t s o f m i l k p r o t e i n s : a c y l a t i o n r e s u l t s i n p o l y a n i o n i c c o m p o u n d s w i t h p o t e n t a c t i v i t y a g a i n s t h u m a n i m m u n o d e f i c i e n c y v i r u s t y p e 1 a n d 2 i n v i t r o J . A I D S R e s e a r c h 257专题论述食品科学2006, Vol. 27, No. 01 a n d H u m a n R e t r o v i r u s e s , 1 9 9 6 , 1 2 : 7 6 9 - 7 7 5 . 2 1 S i c i l i a n o R , R e g a B , M a r c h e t t i M , e t a l . B o v i n e l a c t o f e r r i n p e p t i d i c f r a g m e n t s i n v o l v e d i n i n h i b i t i o n o f h e r p e s s i m p l e x v i r u s t y p e 1 i n f e c t i o n J . B i o c h e m i c a l a n d B i o p h y s i c a l R e s e a r c h C o m m u n i c a t i o n s , 1 9 9 9 , 2 6 4 ( 1 ) : 1 9 - 2 3 . 2 2 H a s e g a w a K , M o t s u c h i W , T a n a k a S , e t a l . I n h i b i t i o n w i t h l a c t o f e r r i n o f i n v i t r o i n f e c t i o n w i t h h u m a n h e r p e s v i r u s J . J a p a n e s e J o u r n a l o f M e d i c a l S c i e n c e a n d B