课件：第8章-肠杆菌属.ppt

第8章,肠道杆菌 (Enteric bacilli) 病原教研室,教学目的,掌握 埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属的致病性 肥达试验 熟悉 埃希菌属的卫生细菌学检查及各菌的 防治原则 了解 各菌的生物学性状及微生物学检查,肠杆菌科（Enterobacteriaceae）细菌,一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌 目前已有30个属，120多个种 与医学有关 10菌属 25菌种,肠杆菌科的细菌与医学的关系可分为三种情况：,致病菌 机会致病菌 由正常菌群转变而来的致病菌,肠杆菌科细菌共同生物学特性：,1.形态与结构 2.培养 3.生化反应 4.抗原结构 5.抵抗力,乳糖发酵试验,共同特性,1、相似的形态染色 中等大小，G 杆菌，无芽胞，多数有动力 有鞭毛、菌毛 少数有荚膜,2、简单的培养条件,3、活泼的生化反应,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,不发酵乳糖,发酵乳糖,肠杆菌科细菌革兰染色,4、抗原构造复杂,鞭毛抗原（H）,菌体抗原（O）,K或Vi抗原,5、抵抗力,不强,6、易变异,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,第一节 大肠埃希菌,(Escherichia coli),案例,4岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖的水果沙拉，回家2天后，出现严重腹部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。,思考题： 1.最可能的病原菌是什么？ 2.针对该病例应做哪些微生物学检查？,埃希菌属（Escherichia）有6个种 大肠埃希菌（E.coli） 临床最常见、最重要的一个菌种,形态染色 0.4-0.7 m 1-3m 短杆菌 革兰染色阴性 有鞭毛 有菌毛 有包膜,一、生物学性状,培养特性与生化反应 兼性厌氧 营养要求不高 生化反应活泼，发酵多种糖类 绝大多数发酵乳糖 吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐（IMViC）试验结果为+ + - -,抗原结构 血清学分型 O抗原：菌体抗原，170多种 H抗原：鞭毛抗原，56种以上 K抗原：荚膜抗原，100种以上 L A B O111：K58：H2,（一）致病物质 1.黏附素（adhesine） 定植因子抗原、集聚黏附菌毛、束形成 菌毛、紧密粘附素、P菌毛、I型菌毛和侵袭 质粒抗原蛋白等 2.外毒素 志贺毒素（Stx）、耐热肠毒素（ST）、 不耐热肠毒素（LT）；还有内毒素、荚膜 载铁蛋白和III型分泌系统等,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 1.肠道外感染 肠道外感染以化脓性感染和泌尿道感染最为常见 2.肠内感染 某些血清型可引起人类胃肠炎,引起腹泻的大肠埃希菌,肠产毒素型大肠埃希菌 enterotoxigenic E.coli ETEC 肠侵袭型大肠埃希菌 enteroinvasive E.coli EIEC 肠致病型大肠埃希菌 enteropathogenic E.coli EPEC 肠出血型大肠埃希菌 enterohemorrhagic E.coli EHEC 肠集聚型大肠埃希菌 enteroaggregative E.coli EAggEC,引起胃肠炎的大肠埃希菌,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC） 致病物质 肠毒素 菌毛粘附素 内毒素 K抗原 所致疾病 5岁以下婴幼儿腹泻 旅游者腹泻 水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC） 致病物质 不产生肠毒素 侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖 所致疾病 主要侵犯较大儿童和成人 腹泻呈脓血便，有里急后重 致病类似菌痢，较少见,肠致病型大肠埃希菌（EPEC） 致病物质 不产生肠毒素及其他外毒素 无侵袭力 在十二指肠 空肠回肠 微绒毛萎缩 上皮细胞排列紊乱 所致疾病 婴幼儿腹泻,肠出血型大肠埃希菌（EHEC） 亦称为vero毒素大肠埃希菌 致病物质 菌毛：粘附作用 毒素：vero毒素 O157H7 所致疾病 污染的牛排 肉 牛奶 果汁 蔬菜 水果 出血性结肠炎 溶血性尿毒综合征,肠集聚型大肠埃希菌（EAggEC） 致病物质 毒素：肠集聚耐热毒素（EAST） 粘附素 所致疾病 引起婴儿持续性腹泻，脱水， 偶有血便,（一）标本 （二）分离培养与鉴定 肠道外感染 涂片染色检查 分离培养 鉴定 IMVIC 尿细菌计数10万/ml 肠道内感染,三、微生物学检查法,（三）卫生细菌学检查 大肠菌群指数 每1000毫升样品中的大肠菌群近似数 大肠菌群： 指在37，24小时内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、 枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属肠杆菌属 每升饮水3 个 100 ml 汽水果汁5个,三、微生物学检查法,四、防治原则,疫苗接种-畜牧业领域 菌毛疫苗 预防ETEC感染、O157感染的疫苗正在研究中 抗生素治疗应在药物敏感试验的指导下进行,案例,4岁男孩在随母亲旅游中，进食小店卖的水果沙拉，回家2天后，出现严重腹部疼痛，腹泻次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，到医院急诊，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。,思考题： 1.最可能的病原菌是什么？ 2.针对该病例应做哪些微生物学检查？,提示,4岁患儿有进食水果沙拉病史，2天后出现严重腹痛，大便次数不断增加，且多次便血，伴发热、呕吐，检查有溶血性贫血及血小板减少等溶血性尿毒综合症。以上症状提示最可能的病原菌是大肠埃希菌O157:H7。,针对该可疑病例应及时对肠道内大肠埃希菌感染进行常规微生物学检查，并快速进行毒力和血清型等特征鉴定，已确定防治措施。,复习,1.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？ 2 .大肠埃希菌最常见的血清型有哪些？,第二节 志贺菌属 (Shigella),案例,患者，男，23岁。急性腹痛2天，每天脓血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温38，血压正常，白细胞增高，未见阿米巴原虫。 思考题 可初步诊断为哪种疾病？ 采用哪种方法能进行快速诊断 ？,形态染色 G-杆菌 0.5-0.7m 2-3m 无鞭毛，无荚膜 有菌毛 培养及生化反应 营养要求不高 不分解乳糖 ss选择培养基 无色菌落 克氏双糖管 底层 上层,一、生物学性状,2019/8/20,38,可编辑,抗原构造及分类 由O和K抗原组成 分类： 菌种 群 型 亚型 痢疾志贺菌 A 110 8a、8b、8c 福氏志贺菌 B 16、 1a、1b、2a 、2b、 x y变型 3a、3b、3c、4a、4b 鲍氏志贺菌 C 118 宋内志贺菌 D 1,抵抗力 比其他肠道杆菌弱 6010分 对酸和一般消毒剂敏感,（一）致病物质 侵袭力 菌毛粘附于回肠末端 结肠粘膜上皮细胞 诱导细胞内吞 内毒素 破坏肠粘膜 肠壁通透性 肠壁植物神经,二、致病性与免疫性,外毒素 肠毒素活性 细胞毒活性 神经毒活性,内毒素-肠壁-通透性 -毒素吸收-毒血症症状-发热、神志障碍、中毒性休克 内毒素-肠粘膜上皮-粘膜下层炎症-毛细血管血栓形成-坏死、脱落-溃疡-粘液脓血便 内毒素-肠壁植物神经-肠蠕动失调、痉挛-腹痛、腹泻、里急后重,（二）所致疾病 菌痢 患者和带菌者 粪-口（10-150个 103） 表现： 潜伏期数小时至7d 发热、腹痛、腹泻、里急后重、 粘液脓血便,临床表现： 急性菌痢 症状典型，预后较好 慢性菌痢 治疗不彻底者易转成慢性 （病程2个月以上），症状不典型 慢性带菌者是重要传染源 中毒性菌痢 小儿多见，可无消化道症状 表现为中毒性休克，死亡率高 病后免疫力不牢固,（一）标本 取粪便脓血或黏液部分 中毒性痢疾者可取肛拭 （二）分离培养与鉴定 （三）毒力试验 （四）快速诊断法 免疫染色法；免疫荧光菌球法；协同凝集试验；胶乳凝集试验；分子生物学方法,三、微生物学检查法,隔离患者、彻底治疗 切断传播途径 试用的口服菌苗： 链霉素依赖株重组活菌苗 磺胺药、痢特灵等均有效 亦可选用环丙沙星、菌必治等,四、防治原则,案例,患者，男，23岁。急性腹痛2天，每天脓血便10次左右，有明显里急后重感，肠鸣音亢进，体温38，血压正常，白细胞增高，未见阿米巴原虫。 思考题 可初步诊断为哪种疾病？ 采用哪种方法能进行快速诊断,提示1,急性腹痛2天，每天10次左右脓血便，有明显里急后重感，肠鸣音亢进、低热等临床表现，初步诊断为急性细菌性痢疾,提示2,急性细菌性痢疾起病急，病情进展快，进行快速诊断显得特别重要。此案例可根据各医院开展的免疫染色法；免疫荧光菌球法；协同凝集试验；胶乳凝集试验；分子生物学方法 ，诊断方法进行快速诊断。,第三节 沙门菌属 （Salmonella）,案例1,患者，女，25岁。发热6天入院，食欲不振、乏力、腹胀。查体：体温40，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变化。便中查到少量脓球和白细胞，但2次血和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时TH1:80，TO：1:80 PA：1:40 PB:1:40;入院 12天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1:20,思考题 1.根据此结果可初步诊断为什么疾病？ 2.为进一步确诊，应首先做什么检查？,是一群革兰阴性杆菌 菌种繁多，血清型超过2000个 多对动物致病 对人类致病的占少数 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肖氏伤寒沙门菌 希氏伤寒沙门菌 动物沙门菌也可对人致病 肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌,形态染色 G-杆菌 0.6-1.0m 2-4m 周身鞭毛，有菌毛 培养和生化反应 兼性厌氧 营养要求不高 不分解乳糖,一、生物学性状,抗原构造与分类,抵抗力 较差 耐受胆盐、煌绿及其他染料 对热耐力差 5石炭酸5min杀死,（一）致病物质 侵袭力 菌毛、O和Vi抗原抗吞噬 内毒素 肠毒素,二、致病性与免疫性,（二）所致疾病 肠热症 伤寒、副伤寒 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 胃肠炎（食物中毒） 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌,二、致病性与免疫性,败血症 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌 无症状带菌者,肠热症,伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌,肠系膜淋巴结,（潜伏期）,胸导管,菌血症,全身疼痛、不适、发热（前驱期）,肝、脾、肾及胆囊等,吞噬细胞吞噬,菌血症,持续高热、肝脾肿大、全身中毒、玫瑰疹 （发病的第1W）,胆囊,粪便,进入肠壁淋巴组织,孤立和集合淋巴结坏死溃疡,肾脏,尿,2-3W,（典型病例病程为3-4W）,并发症：肠穿孔、血栓性静脉炎、胆囊炎,伤寒,伤寒表现： 持续高热 伤寒病容 玫瑰疹 肝脾肿大 相对缓脉,Thomsons theories on typhoid, a major killer, were derided.,（三）免疫性 特异性细胞免疫是主要防御机制,二、致病性与免疫性,（一）标本 第1周取外周血，第2周起取粪便，第3周起还可取尿液，从第1周至第3周均可取骨髓液；胃肠炎取粪便和可疑食物 败血症取血液 （二）分离培养和鉴定 （三）血清学诊断 肥达试验（Widal test） （四）伤寒带菌者的检出,三、微生物学检查法,肥达试验（Widal test） 定义： 用已知伤寒沙门菌菌体O抗原和H鞭毛抗原副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H鞭毛抗原的诊断菌液与受检血清做定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验,肥达试验结果的解释： 1.正常值 2.动态观察 3.O与H抗体的诊断意义 4.少数病例,H与O抗体的性质及其消长意义,加强水源和食品卫生管理 疫苗 伤寒、甲及乙型副伤寒3联菌苗（死菌苗） Ty2la伤寒沙门菌口服活菌苗 伤寒Vi荚膜多糖疫苗 治疗 氯霉素效果较好（过去） 氨苄青霉素 复方三甲氧烯胺 环丙沙星,四、防治原则,案例1,患者，女，25岁。发热6天入院，食欲不振、乏力、腹胀。查体：体温40，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。血细胞无变化。便中查到少量脓球和白细胞，但2次血和粪便培养均未发现致病菌。两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时TH1:80，TO：1:80 PA：1:40 PB:1:40;入院 12天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1:20,思考题 1.根据此结果可初步诊断为什么疾病？ 2.为进一步确诊，应首先做什么检查？,提示1,患者持续发热6天，食欲不振、乏力、腹胀。体检体温40，相对缓脉，肝脾略肿大，腹部见玫瑰疹。可初步诊断为肠热症。,提示2,对患者进行两次取血做肥达试验，其结果如下：入院时TH1:80，TO：1:80 PA：1:40 PB:1:40;入院 12天TH1:320，TO：1:320 PA：1:40 PB:1:20。TH、T