金针菇工厂标准化生产

第 64 页 共 64 页金针菇工厂标准化生产 绿色农产品标准化生产技术标准生产操作，轻松管理工厂2014-3-22 前言金针菇营养丰富，质地脆嫩，可烹调、凉拌、煲汤，更是吃火锅不可缺的一道菜。同时金针菇富含金针菇多糖等生物活性成分，以及赖氨酸、精氨酸和亮氨酸等儿童发育必需的氨工酸，能促进儿童生长及健康发育；而且金针菇具有抗癌的功效，因其含有搞肿瘤活性多糖；在日本长野县种植金针菇地区，连续栽培金针菇10年以上农户，癌症发病率是其它地区的1/6。金针菇在广东、四川、重庆及其它地区，主要消费者是吃火锅客户，还有因为其为儿童增智菇，还有广阔的市场前景可挖。所以其市场潜力巨大，加上生产成本较低，技术门坎不高，所以是投资的一个较理想的项目。在广东地区目前工厂化生产厂家就有23家，其中以上海雪榕、广东菇木真、绿阳等有名的厂家，还有新兴的品质较优的：绿和；在广东地区的市场已经基本饱和，现状的竞争已经进入白热化阶段，在2013年1月寒冷的天气中，最好品质的绿和园山仔售价才达到：180元/件，所以说在广东市场中现在拼的是：品质、实力！谁能笑到最后，就要看其在经营上的策略及管理上的成本。而在重庆/四川地区，目前白色金针菇只有上海雪榕（成都都江堰）一家有实力的工厂，其它的基本为小农户或小型工厂生产的黄色金针菇，售价及品质都不及白色金针菇的2/3；而上海雪榕采用的是主玉米芯生产，其单产高，但品质色泽并不佳；所以在重庆市场投放现在绿和公司的产品是极具竞争及发展力的。而需要打入重庆市场的确需要较大的努力。首先是：技术方面在技术方面因绿和公司还不具备标准化生产体系，所有的管理只是完全依靠人员的经验，其产生的问题就是无可复制性（这是广东各农业生产企业普遍的问题，当扩大后会出现质量失控的情况）；在投入重庆市场已经成为一个瓶颈，所以需要加大标准化管理进程；第二是：资金方面投入重庆市场所需要的资金虽然并是巨大，但也是一种风险性投资，如果投资6吨产能的工厂，投资厂房及设备方面需要约450600万元（含流动），而日产值约为6万元（30%利益约合），需要一年左右收回投资成本。但资金投资从何而来？第三：市场方面目前重庆市场在冬季为农户生产投入时期，市场容量大部分被农户及小工厂化的黄色金针菇为主导，但白色金针菇还是有市场，且不饱和，所以投入是有市场的，只是品质需要较高。第四：厂房方面重庆没有定制厂房，需要自己建设，有利也有弊；有利的一方面可以按照最优化的方式建设，且租金方面会有优势，有弊的方面是资金投入加大。第五：政府方面在投入前后，与当地政府方面的关系成为一个阻碍发展的重要因素，处理得好可以顺风顺水，并得到部分资金扶持；处理不好会有重重阻碍，产生发展的一重大阻碍。所以利用好政府政策是一个关键的节点。综上所述：现状最大问题是：标准化生产技术、政府关系节点。但从市场所得到信息及加强技术标准化管理是可以有信心投入到重庆市场的，其它方面虽然有风险，但可以想方法避免的。标准化生产体系金针菇标准化生产需要从：人、机、料、法、环、测六个方面进行管理，在金针菇生产方面首先需要确定的是：法及环，而其它方面都是围绕而展开的标准化管理，所以先从环境开始进行阐述。第一章：环境工厂化生产金针菇是全天候不间断进行，对外界的环境变化都有相应的控制管理方法，但有两个重点是需要事先进行设计的：1、工厂位置；2、用水情况；一、工厂位置在工厂化生产金针菇需要处于污染少的地区，并最好是在山林的东北面/西北面，可利用较好的通风条件的地方，或者在山脚与河流交界处，这样可以有两大好处：1、 相对湿度较低，空气中含菌机率较少；2、 相对氧气含量较高，有利于金针菇的健康生长；3、 污染相对较少，有利于环境的控制；二、厂房设计宿舍出菇191715131195732422201816141210864122123252627292830包装车间出菇191715131195732422201816141210864122123252627292830办公资材管理菌种车间木屑1/600立方培养1培养2培养3培养4培养5接种预冷木屑2灭菌木屑3装瓶木屑4木屑5搔菌锅炉清瓶废料说明：总体需求面积为：16000/12T（20亩30亩）；根据最低运转成本要求，对于厂房之间需要紧密配合，但又需要相互独立，防止干扰及病害传播； 1、 工厂占地约：130M*120M，共计15600平方米（约25亩），基本流程包含在内，并考虑了区分洁净区与普通区管理。2、 所有厂房为保温车间，分三大车间，装瓶接种车间，出菇管理车间，包装车间，每个车间地下需要用保温泡沫后再覆盖水泥，及墙面，天顶需要保温泡沫，防止温度变化、冷气流失；3、 整体设计以生产流水为主，尽可能地低减对流动时导致的生产成本损失，较少的叉车及其它运输工具，减少对人员需要。4、 厂房以钢架结构及铁皮顶为主，后外墙用单砖砌墙，出菇房及接种室、菌种培养房内部采用彩塑钢板做成小间隔，加以保温喷泡沫；培养室、装瓶车间、搔菌车间及包装车间以5米处彩塑钢板吊顶，并加以保温喷泡沫。厂高度为6米，而吊顶都为5米。5、 其它车间如：资材管理、清瓶车间及锅炉车间等为无空调车间，无需过多装饰，钢架加单墙即可。6、 清瓶车间需高温水池，可利用灭菌后的高温蒸汽对污染瓶进行消毒及清洗，另对胶片进行石灰水清洁作业；所以需要在清瓶车间处建立专门的消毒室，对以下几种情况进行管理：a) 污染瓶：高温及极少量石灰水消毒，并加以消毒液，清洗后反置晒干/晾干后使用；（水不可回收）b) 胶片：对使用后的胶片以10%的石灰水进行浸泡及清洁，并加以新洁尔灭1%浓度；（水不可回收，但可使多次使用）c) 培养房卡板：采用塑卡板，但必须使用后进行清洁，5%石灰水冲洗；（冲刷后水可用于地面清洁）d) 瓶盖清洁：使用过的瓶盖需要进行蒸汽消毒：有污染病菌的瓶盖及表面有污染必须高温清洁后，晒干使用（方法与污染瓶同）；7、 水的设置：因用水量较大，而生产用需要洁净水（未污染的水源），所以厂房内需要打水井，需要丰富的地下水；6吨量需要大约1口水井（水量需要再检讨）；另因担心停水，所以需要进行水池及高位水池建设，如下：a) 水井：用于装瓶、接种、搔菌、出菇房用水（可用水库水或未污染河水）；b) 河水：用于木屑发酵用途（可用自来水）c) 高位水池：用于洁净水贮存，保证水压及生产用水（可用水塔）；d) 低位水池：用于废水的收集及处理（底砂）；e) 同位水池：消毒用水池（清瓶车间）；高温水台（瓶/盖/胶片）；8、 电的设置：需要一个50KV变电房，电源设置：380V及220V为主；9、 压缩空气：一台空气压缩机对应，主要用于设备、出菇房喷水、及清洁用；10、 厂房内一定需要水沟导水，并加以沟盖；定期需要进行清洁，保证车间干净。三、 用水情况因生产需要大量的洁净水，最好是地下水为主，也可以是无污染的河水，这样在木屑发酵、装瓶拌料、搔菌、出菇管理中才能使产品品质有保障。采用自来水的话会出现1、水费成本高；2、因自来水含漂白粉及氯，对产品品质会有损害。3、停水会带来生产损伤。所以自来水只能做为紧急对应及普通生产/生活用水，不可做为生产主导用水。四、厂房周围厂房选择不可在有空气污染地进行建设，有地下水污染的地域更不适宜进行建厂，尤其是垃圾场、养殖场、化工厂、石灰厂等等有空气污染的工厂边，不可设厂。厂房周围也不可以是高楼地区，也不可以在小盆地中央；需要通风透气，对流较好的地域，山与河之间是最佳的选择。第二章 菌种的工艺方法金针菇工厂化生产最重要是技术加科学的管理方法，并应用标准化管理，才能生产出健康、品质优良的产品。从菌种的优选到菌种的培养、使用；从材料的测试到装瓶的控制，从接种的管理到培养的检查（因菌种是生产源头，所以菌种的检查必须非常严格，必须是有经验的专业技术人员进行管理及检查，菌种的生长情况及污染管理是工厂的根本），从搔菌的检查到出菇的管理等等都需要标准的作业流程及严格的测试检查。以下就各环节作出说明：（一） 金针菇的分类地位金针菇又名冬菇、朴菇、构菌、毛柄金钱菌，商品又称金针菇、银针菇、白金针菇、金菇等，英文名称Enoki mushroom。在真菌分类中隶属于菌物界、真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白磨科、金针菇属。（二） 形态特征金针菇主要由菌丝体和子实体两大部分组成。1、菌丝体菌丝体（图2.1）是金针菇的营养器官，具有分解、吸收、储藏、运输营养的作用。金针菇菌丝白色至灰白色，绒毛状，气生菌丝较弱。在光学显示中，菌丝管状，具间隔和分支，粗细不均，菌丝间隔处有锁状联合。菌丝生长速度较快，在25环境下810天可以长满试管斜面。菌丝生长后期菌丝断裂形成粉孢子，菌落具粉质感。有研究表明，金针菇菌丝阶段的粉孢子多少与金针菇的质量有关，粉孢子多的菌株质量都差，菌柄基部颜色较深。在斜面基上极易形成子实体。2、子实体子实体是金针菇的繁殖器官，主要由菌盖和菌柄两部分组成。人工栽培的金针菇包括黄色金针菇和白色金针菇两种。由于采用特殊的栽培管理措施，人工栽培的子实体颜色淡黄甚至纯白色，菌柄细长，菌盖较小，菌柄基部淡黄色甚至纯白色。以下主要介始的是白色金针菇的种植方法，当然也可以用于黄色金针菇的种植管理。（三） 金针菇的生活史金针菇为双因子控制的四极性异宗结合的食用菌。也就是说，不亲和因子作用是由A因子和B因子任意控制的，生活史较复杂。金针菇的有性繁殖产生担孢子，每个担子产生4个担孢子，4个后孢子的交配型分别是AB、ab、Ab、aB种。只有极性不同的具有亲和力的单核菌丝之间进行细胞配合，形成每一个细胞有两个异核的双核菌丝。双核菌丝经过一定时间的发育后，就扭结形成原基，并发育成子实体。随着子实体逐渐面熟，在菌褶表面形成无数的担子，异核在担子中进行核配形成二倍体核，之后二倍体核经过减数分裂形成4个单倍体的核，每个单倍体核通过孢子小梗，在每个担子尖端形成4个担孢子，从而完成金针菇生活史的有性循环。（四） 金针菇生长对营养的需求营养是金针菇一切生命活动的物质基础。金针菇属于木腐菌，属于异养生物，在生长发育过程中，需要不断从基质中吸收营养来满足其生命活动的需要，这些营养物质包括碳源、氮源、无机盐和生长因子四大类。后面在介绍生长工艺时具体说明。第一节 母种工艺选择母种是根据当地需求进行培育，母种从大类上来分：黄色、浅黄色、纯白色等等；还可细分多种。一、菌种的概念及分级1、 菌种的概念：菌种是人工培育的纯菌丝体及其培养基的混合体。也可以说，菌种是在一定容器中，以适当的培养料为基质，培养获得的纯菌丝体及其培养基质。2、 菌种的分级：公司采用母种、原种、栽培种三级扩大繁育程序培育金针菇菌种。通过母种扩接成原种、原种扩接成栽培种，可以实现菌种数量的扩大，以满足生产对菌种的需要，同时提高菌种对培养料的适应性。a) 母种：采用纯种分离或转管获得，在含有琼脂的培养基上生长的，具有结实能力的纯菌丝体。培养用的容器一般为玻璃试管。金针菇纯种分离采用组织分离，分离部位以菌柄顶端的菌肉最好，一般第个菇分离一管。也可采用孢子分离或基内菌线分离获得母种。可以通过转管扩大繁殖母种，但转代次数不宜过多。母种一般用于原种的接种及用于保藏菌种。b) 原种：是将母种接种到培养基上培养获得的具有结实能力的菌丝体及培养基质，培养用的容器一般玻璃或塑料制成的菌种瓶。通常一瓶母种可转接58瓶原种。原种一般用于栽培种的接种，当栽培量不大时，可以用原种直接栽培。另：原种可制备成液体菌种，直接用于生产；这样可以降低污染率，提高菌丝的活度，并极大降低的生产周期及成本。c) 栽培种：是将原种接种到培养基上培养以获得具有结实能力的菌丝体及培养基质，培养用的容器一般为塑料瓶，也可用塑料袋。通常一瓶原种可以接种3050瓶栽培种。栽培种一般用于生产，栽培时用种量为35%左右。二、母种标准化生产的工艺流程母种标准化生产一般都包括培养基的制备、接种及培养三个主要环节。1母种的培养基是母种制备的关键步骤，通常工厂化生产以以下几个方案为主：序号品名配方一配方二配方三配方四123456789各种配方较常用配方一，菌丝生长营养丰富，利于后期的生产品质及产量。2.培养基的制备方法；准备工具：量杯1000ml，漏斗，试管100支（20*180mm），酒精灯，手术刀，长勾或长镊子200mm，炉子，锅子，四层纱布，棉花制成塞子，高压灭菌炉，无菌接种箱，恒温箱、冰箱等；准备物质：配方内材料，做种的金针菇一束或已制备的一级母种10管；工艺过程如下：（注意需要无菌化操作）序工艺名称工艺流程方法说明设备ST1消毒工作对所有使用的器皿进行消毒处理，1、人体；2、台面；3、环境；（无菌作业）无菌台202烧水量1000ml水进行烧水量杯、炉、锅23土豆去皮土豆削去表皮，并处理表面芽状物，并在白纸上切成1CM见方小块，倒入锅中刀54过滤煮开至20分钟后，倒出到量杯中，并用四层纱布过滤，并加水至1000ml；量杯205拌料过滤后的液体再倒入干净的锅中，加入琼脂搅拌溶化，再倒入其它配料搅拌；玻璃棒36分装把煮好的培养基用漏斗分装到试管中，每管装至1/5处，并塞上棉花球塞；漏斗；试管107灭菌把试管5个一捆用双层报纸捆上上半部，放入高压灭菌炉内，压力0.05MPa时放出冷气，在0.120.15MPa，120度下灭菌30分后，降压至0.05MPa下取出；高压灭菌8预冷把出炉后的试管放成在1525度的斜面上，使斜面至试管2/3左右为宜，等管内液体冷却到20度自然凝固；209母种准备品质最好的金针菇，用手术刀取其菌盖与菌柄连接处（或已制备一级母种）约5mm作为种母种无菌台210接种在无菌接种台内，把准备好的种母种接入试管内（长勾每次要消毒冷却），一株金针菇接一管，而原一级母种取5mm见方的菌块及培养基；放在培养基的斜面1/2处轻压；长勾，酒精灯1/支11培养把接种好的试管放在贴上制作时间及级别，放入20的恒温箱进行培养，每天检查其发菌情况；需培养10天左右恒温箱10D12冷藏保管当菌丝长满至90%95%时立即进行冷藏保管，剪去长出试管棉塞，用塑料膜包口或换用胶塞，放入冰箱4左右可保存三个月冰箱90D13检查正常母种的菌丝应该生长整齐，呈现淡白或较浓白，菌丝长满后应该呈现白色，菌丝较纤细，与棉花丝差不多3母种注意事项：一是从母种试管的菌丝上去判断好坏，正常母种的菌丝应该生长整齐，呈现淡白或较浓白，菌丝长满后应该呈现白色，菌丝较纤细，与棉花丝差不多；二是在保存母种时应该在菌丝快要长满时放入电冰箱，不要等母种菌丝完全长满后才低温保存，因为这样极易促使母种在低温环境下快速现蕾，让母种失去使用价值；三是在扩繁母种时应该选用没有现蕾的原始母种使用，如果现蕾，应该选用小菇蕾没有开伞的使用，完全开伞的母种应该坚决弃之不用，否则可能引起金针菇产量的大幅度降低。四是转接母种不可过多，在转接及制备的过程中要保证不受污染；转接最多以三种母种为宜，超过三级无法保证污染传播。五是选择市场上优质的菇种做为母种对象，或是直接购买优质母种进行生产后，自己再进行母种配制。市场上母种分类如下：1) 纯白色金针菇8801，89092) 淡黄色金针菇3) 黄色金针菇4.主要生产设备：高压灭菌炉，无菌接种台 第二节 原种工艺原种按工艺分为；固体原种及液体原种，本文先介绍固体原种的制作工艺，再对液体原种进行研讨，因为液体原种以其周期短、成本低、污染少是日后工厂化生产的趋势，最终工厂必须按液体菌种进行投资生产。一、 固体原种1. 固体原种的培养料配比管理序号品名配方一配方二配方三配方四配方名称123456789注意：木屑需要用发酵后（36月）的非新鲜木屑，加水发酵及15天翻堆一次，使用时含水率应在70%左右，以阔叶木屑或杉木屑加20%阔叶木屑较好。同时棉籽壳需要提前一天预湿堆积。木屑使用前进行筛料，保证粗细搭配好，2-3粗据末占20%，1.5mm以下细锯末占80%。2工艺流程序工艺名称工艺流程方法说明设备ST1配料按配方进行配料，并对需要处理的材料预先进行处理，如发酵加湿；配料车1D2一次拌料对配料依次均匀倒入，先进行干拌（手工或小拌料机），并搅拌均匀为止；拌料机203二次拌料对干拌料逐步加入溶糖后洁净水，进行加湿拌料，并拌至用手紧握有水珠但不滴为止，松开手料即散；104测含水率用含水测试仪对料的含水率进行测试，达到67%2%为宜含水测试仪35三次拌料对不达标的培养料再次进行加湿或加干拌料，直到达到标准含水率56测试PH值对拌好的料进行PH值测试，达到6.30.1为宜，不合格不可使用，可用少量石灰进行调整；但差异太大需重新配料；PH仪37手工装瓶对测试OK的培养料手工装入瓶中，边装边压紧，直到装满整瓶为止58称重对装好料瓶进行称重，重量要求在330350g，需在装瓶前称好瓶的重量后，再在装满后称重相减所得，并适量增减电子称19压实用偏心圆形对装好的料进行压实处理，压至表面料距瓶口：约4CM左右偏心压杆210打孔用直径约2CM的圆锥木棒在料中心处打孔，可轻摇下压，直到瓶底圆锥木棒2 11清洁用清水对瓶身及瓶口内没有料的地方进行清洁，完全清理直至无残留；1012盖棉塞用医用棉花做成的盖子，塞上棉花塞，要求塞紧压实；113灭菌把塞好的培养瓶放入小型的高压灭菌炉内进行高压灭菌；条件：123/1.5H，0.150.18MPa压力下灭菌灭菌炉3H14预冷灭菌完成后，需要把培养瓶立即移入预冷室进行预冷10H，并在使用前用紫外线进行30分以上的杀菌消毒预冷室10H15准备接种试管母种用来苏儿溶液擦洗后放置于接种箱内，第一箱用甲醛加高锰酸钾熏蒸消毒，从第二箱开始及接下来的几箱都可用气雾消毒盒（剂）812 g消毒，消毒30min后方可接种无菌工作台4016手工接种用母种对原种培养料进行接种，在无菌工作台上，每瓶手工接入：用接种针稍微刮掉斜面上的菌丝，将斜面母种分成六小块；瓶口靠近火焰，用接种针把小块的培养基再分成成一个小块和一个大块，并勾入菌瓶内，塞上棉花球。接种完毕后，进行摇瓶，使小块的掉入孔穴中，大块的在培养料上面接种针317培养放置于温度为15菌种培养房中，二氧化碳浓度低于1000ppm，培养25D菌丝可走满整个菌瓶恒温培养室25D18培养检查在培养过程中，每天进行培养情况检查，并记录温度/湿度/Co2浓度，在培养中发现异常立即分析，当菌丝走满95%左右可用于生产或用于栽培种的接种。1D提倡二级制菌，不提倡三级制菌。一般菌种可以作如下分级，母种试管是一级，用试管繁殖的玻璃瓶菌种等是二级种，再用二级种繁殖的玻璃瓶等菌种我们称之为三级种。经验证明，用试管母种繁殖的二级种直接接种生产出菇袋，菌丝发育良好，成功率高，污染率低，后期的金针菇产量明显高、质量明显好；而用三级菌种接种生产出的菇袋在各方面的表现都明显不如前者。究其原因，一是一级母种的纯化程度很高，菌龄很短，一般要10天左右即可长成，没有隐性污染，不存在老化情况，用它接种的二级原种菌龄一致，再接种生产出菇袋，效果自然很好；二是用二级原种再接种三级生产种时，如果挑选不严，极有可能选入带有细菌等隐性污染的菌种，用这些二级原种再接种三级菌种，极有可能造成细菌性污染的扩大化，严重影响金针菇的产量。因此在这里建议采用二级制菌方式，二级制菌的生产流程可以简单概括为母种试管接种原种玻璃瓶，原种瓶接种出菇瓶，出菇瓶菌丝发育成熟直接出菇。对于原种的管理是需要进行每日检查，从而总结出菌丝发育的全过程，并严格控制发菌过程中出现的异常，及时分析处理；保证生产源头的稳定性，是整体生产的关键环节。原种也可以用1100ml的聚丙烯进行生产（主要是用于二级菌种生产方式），但接种量及接种方式需要进行研讨实验。3.固体原种的注意点：一是：生产过程中瓶身的清洁很重要，必须细致地进行，使不是培养料部分完全无残留的物质；同时灭菌过程要严格管理，并记录以保证不会因为设备问题导致灭菌无效（灭菌效果需要检查，即灭菌后直接放在培养房内23天无变异视为合格）。二是：接种过程中消毒很重要，人员进入接种室时需要进行消毒处理，所以需要建设无菌车间及风淋室，需要更换无菌工作服；而培养瓶需要用苯扎溴铵稀释溶液进行清洁消毒处理。三是：接种室要求室温在1516，而培养室温与接种室温一样管理；湿度要求在65%左右，而二氧化碳浓度要求在1000ppm以下（通风很重要），培养在黑暗环境下进行，避免强光照射。四是：发菌检查，发菌情况需要进行记录，并与前几次进行对比管理，是否出现发菌情况不一致及发菌速度不一样时，需要开会检讨问题的存在，并进行及时的改善。应该在25天内完成95%以上的菌丝布满，如未能完成，可能需要进行废弃处理。4.使用的主要设备：无菌接种台、灭菌炉；无菌车间，无菌培养房等二、液体原种的制备金针菇生产过程中，通常工厂会采用三级固体菌种进行生产，但随之而来的问题是：污染增加，另因转接过多，会导致菌种部分变弱，使生产品质及产量下降；如用二级菌种生产，而原种的数量不足会导致生产量不足。现在一般大型的食用菌生产厂家，都会采用二级液菌种进行生产，其好处是：（1）成本低：制种成本是固体的三十分之一；（2）时间短：制种时间是固体的1/10；（3）萌发快：接种后6小时萌发，24小时菌丝布满接种面；（4）生长快：栽培养菌时间比固体缩短1/2；（5）纯度高：设备完全密闭运行，菌种纯度高、活力强；（6）污染少：菌种萌发速度快，杂菌几乎没有侵染机会； （7）菌龄短：菌包上下菌龄一致，出菇齐、产量高；（8）自动化：按键操作，自动化程度高。常规制备液体菌种多采用“母种一级瓶种二级瓶种培养（发酵）器”的生产工艺，环节多，操作复杂，周期长。全禾菌业研制的CQY系列液体菌种培养器及其配技术，将母种经过提纯、活化制备成大量的“液体菌种专用母种”,直接接种到培养器中培养。使用液体专用母种，解决了液体菌种生产及使用上的一系列难题。传统的生产从一级瓶、二级瓶到培养器一个生产周期需50天，而专用种直接接到培养器上到生产出成品液体种只需24天时间，使得液体菌种自身的生产周期大大缩短。同时节约了投资和生产成本，减少了中间环节的污染；菌球量大，菌龄一致。液体菌种制种工艺流程如下：清洗和检查培养基配制上料装罐培养基灭菌降温冷却接入专用菌种发酵培养接出菌种。1液体菌种的优势液体菌种是采用生物培养（发酵）设备，通过液体深层培养（发酵）的方式生产食用菌菌球，作为食用菌栽培的种子。其液体菌种是相对固体菌种（木屑、棉壳、麦麸、枝条等）的物理性状而言的。液体菌种具有固体菌种不可比拟的优势：其一是制种快：在液体菌种培养罐内菌体细胞处于最适温度、酸碱度、氧气、碳氮比等条件下，以动态方式培养，菌丝分裂迅速，在短期内能获得大量菌丝体（球）。固体菌种培养，其菌丝体是以自然数的速度自上而下匀速生长；而液体菌种培养，其菌体细胞是以几何数字的倍数加速增殖。采用大连全禾菌业有限公司的液体菌种培养器生产液体菌种一般24天完成一个培养周期，而固体菌种从原种再到栽培种，每级扩繁都得1个多月。其二是活力强。液体菌种不仅营养、温度、氧气、酸碱度等环境通过控制，最大限度地满足了菌体的生长需求，而且呼吸作用产生的代谢废气能及时排除，新陈代谢旺盛，所有菌球菌龄基本一致，因此菌丝活力强。而固体菌种菌体细胞代谢物积留混杂于培养基营养物中间，自然影响菌体质量。况且固体菌种往往是瓶（袋）上下菌龄不一致，下面刚长好，上面可能老化，并失去活力。其三是纯度高。液体菌种所用母种一般需经筛选纯化制备而成，种源纯度高。而固体菌种所用斜面母种经一些商家无限转代后纯度降低。液体菌种培养是在密闭罐体内运行，供氧系统空气经过滤，以全禾菌业液体菌种培养器为例，其纯度达到99.%，从而保证所培养的液体菌种是纯种。其四是防污染。液体菌种具有流动性，接种后易分散，萌发点多，菌球接入后萌发快，在适宜条件下，接种后24小时左右菌丝布满接种面，使栽培污染得到有效控制。而固体菌种接种时，菌体经过剥离与撕裂和药物薰杀，从萌发吃料到封闭接种面，一般得57天。所以杂菌污染机率多。其五是缩短栽培周期。液体菌种使栽培发菌速度快一倍，出菇集中，减少潮次，周期缩短，栽培的用工、能耗、场地等成本都大大下降。有的品种（如杏鲍菇、金针菇）从制种到栽培、采收上市不超过30天，更容易抓季节，赶行情。其六是成本低。以130型全禾液体制种培养器为例，每罐菌种成本100元左右，接种40005000袋，菌种成本不超过3分钱。2液体菌种的不足事物都是一分为二的。液体菌种目前也有着不尽人意之处。诸如培养设备需要有电源。比如停电问题，目前全禾菌业培养器能在停电后继续自动运行1020小时，短期停电不用怕，全禾菌业不仅负责培训技术，出现问题还能上门服务，这也是科研单位应有的服务。3对液体菌种认识的误区其一是液体菌种培训器污染。是的，发酵液营养丰富，比固体木屑培训基杂菌生产速度快。然而，现在的国际先进的膜过滤材料，其过滤孔径为0.01微米，是最小细菌个体的几十分之一，从而保证了供养纯度并有效控制杂菌。其二是液体菌种技术要求高，不易掌握。实际上我们现在的液体菌种培养器全部是自动控制，按键操作。其三是液体菌种贮藏运输难。实际上，液体菌种培养器制种2-3天就一罐，一罐百八十块钱，就能接几个至上万袋，现用现作，现作现用，无需贮藏运输。其四是液体菌种对出菇的影响。有人怀疑液体菌种物理搅拌造成菌体单核化，营养液体造成菌性变异退化等等。这些问题是多年前液体发酵中存在的问题，现在技术已经解决了的问题。气体搅拌代替机械搅拌，天然有机物代替化学试剂，专用母种代替传统母种，并取消摇瓶工艺，从而保障了菌种的种性，使食用菌栽培产量质量都有了保障。 其五是简单化认识倾向。这种倾向和以上怀疑态度相反，认为液体菌种好干，设备谁都可造，技术也没啥，其实也需要进行不断的经验积累才能做好液体菌种。 4.液体菌种培养基制备 金针菇的液体培养配方主要以下几种序号品名配方一配方二配方三配方四配方五配方六配方名称123456789101112131415PH制法：14相同：即将上述配料溶于水，混匀；其中2菌丝成长较好 而5则是与母种基料做法一致。优良的液体菌种，是液体发酵液内有较多均匀、大小一致的菌丝球。而不同液体培养基对金针菇菌球的大小、结构、黏度影响较大。高糖低氮(CN=18：1)的培养基有利于菌球的形成，而低糖高氮(CN=2：1)的培养基因碳氮比失调，形成的菌球大呈絮状，不仅接种不方便，而且由于“发育点”少，接种效果不佳。玉米粉是极好的氮源，用5的玉米粉既可调节培养基的黏度，又能作为营养被降解利用，培养出的菌丝球颗粒小，分散度好，数量多，接种入固体培养基(栽培种或栽培袋)后发育快速。5. 接种培养把配好的培养液分装于盛有1015粒小玻璃珠的500ml的三角瓶中，装量约为150ml，塞好棉塞，将瓶口和塞用牛皮纸扎好，在1.kgcm2压力的高压锅中灭菌30min。冷却后，按无菌操作每瓶接入2c左右的生长旺盛的金针菇斜面母种一块，使气生菌丝的一面向上悬浮于液面。在23左右下静止培养23d，之后置于往复式摇瓶机(振荡频率为80100次min)或旋转式摇瓶机(转速拟在220次min左右)上进行振荡培养34d，当培养液呈浅黄色，清澈透明，有许多菌丝小球，具有金针菇的香味时，即可使用。若培养液混浊，有臭味，大多是细菌污染，不可使用。液体菌种接种前的消毒准备工作与固体菌种相似。消毒完毕，在接种箱内，按无菌操作，在靠近酒精灯火焰口处将液体菌种倾斜倒入液体栽培种的培养基表面，接种量为1015ml左右。以上液体菌种为摇瓶生产原种菌种，一般用于150ml/瓶摇瓶（1000ml6瓶）生产，如需要直接用于生产中，需要大规模制备，所以需采用发酵通气培养，需要一整套工业发酵设备。三、生产用的液体栽培菌种 以上已经闸述了液体菌种的好处，液体菌种可用于固体栽培种，也可以大规模制备直接用于生产，现在来讨论直接用于生产的液体栽培种种制备方法；序号品名配方一配方二配方三配方四配方五配方六发酵罐配方简易法PDA氮基1白砂糖300g2豆饼粉50g3磷酸二氢钾15g4硫酸镁10g5水10L678PH值6-8液体栽培种的培养基制备方法与各厂家设备有关，此篇还需进行试验后，再行完成第三节 固体栽培种固体栽培种是固体菌种的第三步，由固体原种接种得来，是直接用于生产的菌种，其接种培养的周期需要26天，其中装瓶接种1天，培养25天；栽培种的培养的好坏直接影响生产中的品质及产量。1. 固体栽培种的配料：序号品名配方一配方二配方三配方四123456789其中的木屑需要发酵后的木屑（36个月，每15天翻堆一次，需保持木屑湿润），使用前要进行筛料，粗细搭配好，2-3粗据末占20%，1.5mm以下细锯末占80%。2. 固体栽培种的生产工艺序工艺名称工艺流程方法说明设备ST1配料按配方进行配料，并对需要处理的材料预先进行处理，如发酵加湿；配料车2筛木屑用振动筛料机对已经发酵良好的木屑进行筛料处理。筛料机2一次拌料对配料依次均匀倒入，先进行干拌，并搅拌均匀为止；拌料机203二次拌料对干拌料逐步加入洁净水，进行加湿拌料，并拌至用手紧握有水珠但不滴为止，松开手料即散；104测含水率用含水测试仪对料的含水率进行测试，达到67%2%为宜含水测试仪35三次拌料对不达标的培养料再次进行加湿或加干拌料，直到达到标准含水率56测试PH值对拌好的料进行PH值测试，达到6.30.1为宜，不合格不可使用，可用少量石灰进行调整；但差异太大需重新配料；PH仪37装瓶对测试OK的培养料设备装入瓶中，并用打模机进行5孔打模，（压模后高度为瓶口2.5CM，中孔2CM，边四孔1CM）装瓶机打孔机12s8称重对装好料瓶进行称重，重量要求在330350g，需在装瓶前称好瓶的重量后，再在装满后称重相减所得，并适量增减电子称19盖瓶盖用盖瓶盖机对培养瓶进行盖盖，并装到灭菌车上；10贴标签贴上装瓶日期标签，11灭菌把塞好的培养瓶放入小型的高压灭菌炉内进行高压灭菌；条件：125/80分钟，0.15压力下灭菌高压灭菌炉5H14预冷灭菌完成后，需要把培养瓶立即移入预冷室进行预冷10H，并在使用前用紫外线进行40分以上的杀菌消毒预冷室10H15准备接种清洁菌种瓶表面（苯扎溴铵溶液），并检查菌丝的生产情况，菌丝满瓶95%左右，无现蕾；不合格的需要取出废弃；无菌工作台4016手工接种用原种对栽培种培养料进行接种，在无菌工作台上，每瓶手工接入：用接种针稍微刮掉斜面上的菌丝，并勾松菌瓶内原种菌料，勾入打开瓶盖的栽培种瓶内，盖上栽培种瓶盖。接种时进行摇瓶，使原种料部分掉入孔内。每瓶接种量为10ml.。接种针317培养放置于温度为15菌种培养房中，二氧化碳浓度低于1000ppm，培养25D菌丝可走满整个菌瓶恒温培养室25D18培养检查在培养过程中，每天进行培养情况检查，并记录温度15/湿度65%/Co2浓度1000ppm以下，在培养中发现异常立即分析，当菌丝走满95%左右可用于生产或用于栽培种的接种。1D栽培种的检查比生产菌种要严格很多，当出现菌丝没长满时（95%）及个别瓶的上、中部出现无菌丝情况，都视为不合格产品；（所以做种里需要多做10%左右，因接种量为25ml1/40,则6吨需500瓶栽培种）（培养期为2325天，不可超过25日）接种、培养需要在无菌的环境中进行，所以工作人员需要进行严格的消毒，需要设立无菌车间及消毒风淋室。3. 需要注意的情况一是：菌种全部是在无菌的情况下生产，出现污染则需视为大问题，需要全面进行分析研究，不可以忽视。菌种需要专门的生产车间，与生产分开以防止被污染情况的产生；二是：菌种生产培养过程中需要专门人员进行检查、管理，不可因为成本问题而与生产接种车间人员混和，容易造成管理失当；三是：菌种培养需要专门的培养车间，并且需要建立无菌车间，并保证无光或低光，温度：15，湿度65%左右，Co2浓度低于1000ppm，所以需要专门的通风换气设备；四是：所有进入人员都必须严格消毒，以保证场所有无菌可靠。4. 主要生产设备：装瓶设备与生产过程中的装瓶设备相同，并可通用，只是在预冷杀菌时进行分开管理；振动筛料机、二次拌料机、三次拌料机、装瓶机、压模机、重量称、瓶盖机、高压灭菌炉、无菌接种台、无菌接种室、培养房。总结，菌种的生产与管理都必须在无菌的环境下进行，建立通风可靠的无菌车间是保证下一步生产的重要指标。菌种的管理也需要严格进行，不仅是需要优选生产品种，还需要建立菌种使用级别，其中母种只能进行二级转管原种不可自身转接栽培种不可自身转接。另一定要研究母种加强母种液体原种生产，因为转型及成本的需要。并可极大低减污染的产生。第二章 金针菇的生产金针菇的生产应采用标准化管理手段，结合有经验的生产技术人员进行管理，才能稳质、高产、低成本。完全采用人工化管理，会出现因人员情绪问题，及管理不当问题导致生产成本的过高，从而失去市场竞争力。另外在技术革新时，切忌一次性全面试验，必须进行独立小范围试产后，总结出丰富经验后再行推广；许多公司正是因为这样才出现崩溃的局面。切切！第一节 材料配置管理在金针菇生产过程中，材料配置后的营养是稳质高产的关键部分，不仅是配比的好坏，连材料本身的品质也是极其重要的，所以必须建立来料品质检查机制，防止不良材料流入生产环节，对整体品质产量造成损害。一、 生长发育条件 金针菇生长发育需要适宜的外部条件。主要有：营养度、温度、温度、光度、二氧化浓度和酸碱度等方面，这6个方面对金针菇栽培产量及品质起决定性作用。作为生产者认真掌握金针菇生长发育需要适宜的外部条件。主要有：营养度、温度、温度、光度、二氧化浓这些生产长条件，对栽培成功、稳产、高产是必不可少的。* 营养：金针菇是一种腐生菌，其菌丝分解木材的能力较弱，坚硬的木材伐后达到一定的腐朽程才能适合金针菇的生长。金针菇生长所需的营养物质可为：碳源、氨源、无机盐和生长素四度大类。A. 碳源碳源是金针菇最主要的营养源，是合成碳水化合物和氨基酸的原料及生命活动力的能量素源。金针菇能利用木材中的纤维素、木质素和糖类等化合物作为碳源。常用的碳素营养以淀粉为好，其次是葡萄糖、蔗糖和麦芽糖。富含家作物纤维素的农副产品下脚料几乎都能用来栽培金针菇，如棉壳、玉米芯等。锯木屑以阔叶树（构树、杨树、柳树等阔叶树种的木材内所含的养分最适合需要）的木屑较好，不同树种的木屑对金针菇的产量有明显的影响，经堆积的陈旧木屑比新鲜的好。B. 氮源-氮是构成蛋白质和核酸的主要成分，蛋白质和核酸是原生质的主要成分，在有机生长和繁殖过程中起着重要的作用。氮源的数量对金针菇菌丝体和子实体的生长发育有很大的影响。金针菇可以利用多性氮源，其中以有机氮最好，如蛋白胨、天门科酰胺、谷氨酸、尿素、牛肉浸膏、酵母浸膏、麦芽浸膏等。列机氮中的铵态氮，如硫酸铵也能利用，硝态氮和亚硝态氮，如硝酸钠、亚硝酸钠利用最差。在大面积生产中，以麸皮、细米糠、玉米粉、豆粉和饼肥为主要氮源。培养料的碳氮比例是：30：1为宜C. 无机盐类-无机盐类是食用菌生命活动中不可缺少的物质，其主要功能是构成菌体成分，作为酶的组成部分，调节氧化还原电位和酶的作用、调节培养基的渗透压和PH值。金针菇生长发育需要一定量的无机盐类，其中以磷、钾、镁最为重要，如镁或磷酸根离子对金针菇生长有促进作用。因此在生产中常添加硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾或过磷酸钙等作为主要的无机盐营养。各种微量元素如铁、锌、锰、钴、钼等元素对金针菇菌丝的生长和子实体的形成也是必需的，但用量极微，普通原料以及水中的含量已能基本满足需要，一般不再另外添加。D. 生长素-金针菇生长发育中还需要吸收一定量的生长素。生产素是一种制微生长和调节生长的有机物质。金针菇是维生素B1和维生素B2的天然缺陷型，因此必须添加维生素B1和维生素B2才能加快菌丝的生长速度，一般在培养料中添加B族维生素含量较多的麸皮和米糠，即可解决金针菇所需的维生素B1和维生素B2，但要注意维生素B1不耐热，高于120时容易迅速分解,因此高压菌压力不宜大于0.15MPa。二、材料配比管理营养配方是生产的关键环节，要保证培养料的营养及通气性，通常会采用木屑、玉米芯、棉籽壳做为载体，配以其它营养补充，来保证金针菇生长的必要条件。序号品名1有需要请联络：23456789101112131415*其中绿和品质较好时期是采用配方1，冬天发酸较少时，可用配方2；而配方3（未记录）虽然产量上升，但出菇单条较幼，且污染会较大（当然不仅是配比问题，与管理有很大关系）材料中需要注意：一是：木屑一定需要进行预发酵处理，一般需要36个月的发酵，并在15天一周期进行翻堆处理，发酵方法就是露天堆放，并每日进行洒水处理，保持木屑全部湿透；使用前用手紧握，无刺感并有水珠不滴可使用；二是：木屑使用前需要进行筛料，去除大的杂物；使用时含水率应在70%左右，以阔叶木屑或杉木屑加20%阔叶木屑较好；木屑使用前需要进行筛料，保证粗细搭配好，2-3粗据末占20%，1.5mm以下细锯末占80%。三是：同时棉籽壳需要提前一天预湿堆积。而玉米芯也需要堆积一周左右，每23天进行一次翻堆工作，堆积方法同木屑。四是：虽然木屑作为生产基料成本不高，但因场地需求量大，且容易出现污染问题，所以建议尽可能使用玉米芯、棉籽壳为载体较合适于工厂化的生产。三