【毕业学位论文】（Word原稿）avUCP基因对黄鸡能量平衡与脂肪代谢的影响动物营养与饲料科学硕士论文

密级： 公开 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 因 对黄 鸡能量 平衡 与脂肪代谢的 影响 of on he of on I 因 对黄 鸡能量平衡与脂肪代谢的影响 摘 要 1. 基因鸡 达 测定和能量、脂肪代谢 率测定 试验鸡采用 160 只 28 日龄的经 平和 平鉴定后的 基因鸡和非 称重 分成 2 组 ,基因鸡为试验组，非 基因鸡为对照组 ， 进行为期 42谢 试验。分别于 49 日龄和 70 日龄 称重， 试验结束时 每组随机抽取 10 只鸡进行屠宰试验， 测定 部分 胴体指标。 结果表明 ： 非 基因鸡的 平是 基因鸡 ， 因 的表达。 基因鸡与非转基因鸡之间 饲料转化率 、 采食量、日增重、 能量 表观 代谢率 、 粗脂肪 表观 代谢率 、能量真代谢率和粗脂肪真代谢率 差异 都 达到显著水平， 日龄和性别对 基因鸡的 生产性能、 脂肪代谢率、能量代谢率 和部分胴 体指标 有显著影响 ， 基因鸡的 生产性能、部分胴体品质、能量代谢率和 粗 脂肪代谢率都 有很大改善 。 2. 日粮 营养结构 对 基因鸡能量平衡和脂肪代谢的影响 试验采用 24 两 因子随机试验设计，即 基因鸡与非 基因鸡、 3 种日粮（高能日粮、高脂日粮和标准日粮） 和 饥饿 共 8 个处理组。试验期 28 天， 其中 饥饿 组为 6 天， 试验结束时， 3 种日粮处理组部分 鸡继续饲喂，其余 试鸡屠宰 取血 ， 测 血浆葡萄糖、游离脂肪酸、甘油 三酯 和胆固醇水平，检测血清胰岛素水平。 3 种日粮处理组剩余鸡分别在日粮饲喂 40 天和 60天时屠宰 ， 取骨 骼 肌组织， 荧光定量 定 量 ， 利用生物发光法测定骨骼肌量。 结果表明 ： 日粮营养结构和 因显著影响 血清胰岛素、 血浆甘油三酯（ 胆固醇（ 游离 脂肪酸（ 平（ P 。 日粮营养结构影响 因的表达 （ 性别对 基因鸡与非转基因鸡的采食量、日增重和饲料转化率都有显著影响（ p 但性别与 因之间的互作效应在生产性能指标上都不显著（ p 雌性鸡中 基因鸡和非转基因鸡之间采食量和饲料转化率差异都达到显著水平， 基因鸡较非转基因鸡采食量下降 明 基因鸡通过提高能量利用效率减少了采食量，在雌性鸡中稍微明显。雄性鸡中 基因鸡和非转基因鸡之间饲料转化率和日增重差异也都达到显著水平，料肉比分别为 基因鸡较非转基因鸡日增重增加 其采食量的差异达到显著水平， 基因鸡较非转基因鸡下降 这说明 基因鸡通过提高能量利用效率改善了生长速度，在雄性鸡中稍微明显。 表 2基因型和性别 对 28 生产性能的影响 of on 8别 因型 食量 FI(g/d) 日增重 g/d) 饲料 /增重 转基因鸡 基因鸡 转基因鸡 基因鸡 异来 源 of P 值 P 基因型 别 因型 性别 雄性鸡中 基因鸡和非转基因鸡之间饲料转化率差异 显著（ p 料肉比分别为 增重的差 异达到显著水平（ p 基因鸡较非转基因中国农业科学院硕士学位论文 基因鸡鉴定及基因 表达测定和鸡体能量脂肪代谢 18 鸡提高 说明 基因鸡明显改善了 雄性鸡的 生长速度 。 表 2基因型和性别对 49生产性能的影响 of on 9别 因型 食量 FI(g/d) 日增 重 g/d) 饲料 /增重 转基因鸡 基因鸡 转基因鸡 基因鸡 异来源 of P 值 P 基因型 别 因型 性别 雄性鸡较雌性鸡日增重提高 雄性鸡的料肉比为 性鸡的料肉比为 单因素分析可知，非转基因鸡其雄性鸡和雌性鸡之间日增重和饲料转化率差异都达到显著水平（ p 采食量之间差异不显著（ p 雄性鸡的料肉比为 性鸡的料肉比为 基因鸡其雄性鸡和雌性鸡之间日增重和饲料转化率差异也都达到显著水平（ p 采食量之间 差异不显著（ p 雄性鸡较雌性鸡日增重提高 雄性鸡的料肉比为 性鸡的料肉比为 对性别而言， 基因鸡分别降低了雄性肉仔鸡与雌性肉仔鸡的采食量，提高了雄性肉仔鸡与雌性肉仔鸡的饲料转化率，提高了雄性肉仔鸡的日增重，雌性肉仔鸡的日增重变化不明显，因此， 基因鸡对改善雄性肉仔鸡日增重的作用效果优于雌性肉仔鸡，说明 相互作用的确切机制还有待进一步研究。 将两个时期的试验数据进行 T 检验，结果表明 28 49个时期之间饲料转化率、采食量和日增重差异也都达到显著水平（ p 49 28食量增加 日增重增加 料肉比分别为 单因素分析可知， 非转基因鸡中 28 49个时期之间的饲料转化率、采食量和日增重都存在显著差异（ p 49 28采食量提高 日增重增加 料肉比分别为 基因鸡中 28 49采食量和日增重也都存在显著差异（ p 49 28采食量提高 日增重增加 料肉比分别为 这表明 基因鸡对生产性能的影响在生长中期尤其明显，即 49龄的作用效果优于 28龄，据此推测 生长性能可能存在互作效应，但相互作用的确切机制还不清楚。 基因鸡对能量平衡和脂肪代谢的影响 966)提出，能量底物的氧化通过质子流与 电子从电子 传递链中的复合体 成质子电化学梯度。质子电化学梯度在 成酶作用下使 成 因此，氧的消耗即呼吸作用与 然而，线粒体解偶联蛋白 而降低能量利用效率。 2000)提出， 线粒体 基因鸡鉴定及基因 表达测定和鸡体能量脂肪代谢 22 联 。 理论上有三个原因会导致线粒体解偶联， 电子漏 质子漏 推测，电子漏可能是电子主要从复合体 且与氧形成超氧阴离子（ 同时 2000)还提出， 质子漏是质子在跨线粒体膜中不经过 而导致质子的无效循环，使质子电化学梯度中的势能转变成热能。 1993）提出，其活性被抑制（如 从而不能合成 基因鸡相对于非转基因鸡其 含量 明显降低， 这样会引 起 解偶联作用减弱，提高能量利用效率， 饲料能量的摄入 总 量 也明显减少 ，能量表观代谢率和真代谢率都明显提高， 能量 转化效率 明显提高 ，这和我们的试验结果一致，即 基因鸡与非转基因鸡之间能量表观代谢率 和 能量真代谢率差异都达到显著水平， 基因鸡较非转基因鸡能量表观代谢率 和 能量真代谢率分别提高 百分点。 而且，雌性鸡和雄性鸡之间能量表观代谢率和能量真代谢率差异都达到显著水平（ p 但其粗脂肪表观代 谢率和粗脂肪真代谢率差异都不显著（ p 百分点。 单因素分析可知，非转基因鸡其雄性鸡和雌性鸡之间能量表观代谢率 和 能量真代谢率差异都达到显著水平（ p 雄性鸡较雌性鸡能量表观代谢率和能量真代谢率分别提高 基 因鸡其雄性鸡和雌性鸡之间能量表观代谢率和能量真代谢率差异都达到 显著水平（ p 雄性鸡较雌性鸡能量表观代谢率和能量真代谢率分别提高 6个百分点。 虽然 在能量代谢上 基因型和性别之间 的互作效应不显著，但 对 雄性 鸡的作用效果 优于雌性鸡 ，这可能跟性别影响静止能量消耗有关 。 遗传学上分析， 因座附近的标记与静止能量消耗紧密连锁， 多态性也用来检测 能量平衡及肥胖的关系。 (2001)认为大量生化模型实际上已经提出 族体作为脂肪酸载体的功能， 者把质子导回基质，或者把非酯酰化脂肪酸阴离子导出基质来降低质子梯度解，形成解偶联，降低 成效率，减少提供胃肠道消化、吸收和运输日粮中脂肪所需能量，抑制脂肪的氧化代谢。 因可能通过 把质子导回基质或者把非酯酰化脂肪酸阴离子导出基质来降低质子梯度产生解偶联，因此， 基因鸡在改善能量代谢同时也能改善粗脂肪代谢，粗脂肪表观代谢率和真代谢率都明显提高。由统计分析可知， 因和性别之间在粗脂肪代谢方面的互作效应达到显著水平 (p 单因素分析可知，非转基因鸡中 49d 和 70d 两个时期之间的粗脂肪表观代谢率和能量真代谢率都存在 显著差异（ p 70d 较 49d 百分 点，但能量表观代谢率和粗脂肪真代谢率差异都不显著（ p 基因鸡中 49d 和 70d 两个时期之间的能量表观代谢率存在显著差异（ p 70d 较 49d 其能量中国农业科学院硕士学位论文 基因鸡鉴定及基因 表达测定和鸡体能量脂肪代谢 23 表观代谢率提高 百分点，但粗脂肪表观代谢率、能量真代谢率和粗脂肪真代谢率差异都不显著（ p 因此，从以上结果分析可知，日龄和基因型之间是否存在互作效应并不清楚，还需要进一步研究。 中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 24 第三章 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 试验 3 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢的影响 无 论是脂肪的合成代谢还是分解代谢，都受肉鸡的生理状况、遗传、营养及环境等多种因素制约。 分析动物体内能量代谢的途径可以发现，脂肪、蛋白质和糖类等主要能量物质在体内代谢时都会首先变为乙酰辅酶 A，而它的去路则主要有两条，一条是进入三羧酸循环生能，另一条则是合成脂肪酸生脂。 由于 更多能量 物质 在 体内代谢时用于合成脂肪酸生脂。 脂肪酸的合成需要有推动作用的能量和有合成脂肪酸的碳水化合物。对单胃动物来说，葡萄糖是脂肪酸 合 成的主要前体。 料与方法 基因鸡鉴定 分别进行 平阳性和 平鉴定，鉴定方法与试验一相同。 验动物 试验鸡选自本课题组制备的 70 日龄 健康、 生长匀速 的 基因鸡和非 基因鸡各 40 只（公 鸡 ）。 验设计 80 只 70 日 龄的 基因鸡和非 基因鸡随机分成 8 个处理组： 基因28 天 标准日粮组、 基因 6 天饥饿 组 、 基因 28 天高能日粮组 和 基因28 天高脂日粮组，非 基因 28 天 标准日粮组、非 基因 6 天 饥饿 组 、非 8 天 高能日粮组 和非 基因 28 天高脂日粮组。每个处理组 5 个重复 ， 每个重复 2只鸡 ，自由饮水。参照中国农业科学院畜牧研究所家禽遗传育种研究室的京星黄鸡营养需要量中京星黄鸡 100 配套系种鸡的相应营养建议量而配制试验日粮（试验日粮及其营养水平见表 3 中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 25 验地点 本试验在 动物营养国家 重点实验室进行。 饲养管理 自由饮水， 24h 光照，常规免疫。在自然环境条件下饲养，并按照黄鸡的饲养管理方法进行管理。 待测指标与检测方法 试验鸡 称体重后 屠宰， 分离腹部脂肪 ， 取腹部板油和肌胃周围脂肪，肠脂不易剥离故不计算在内，称重 ，腹脂率（ %）腹脂重 /活重 100%。 测定皮下脂肪厚度：测定部位在尾椎前端、背正中线切开的皮肤转角处（包括皮肤） ，用游标卡尺测量厚度，单位为 毫 米，测两侧的厚度，取其平均值。 分离肝脏称重 肝比率（ %）肝重 /活重 100%。 取其骨胳肌组织（ 5 克左右），液氮冻存，以备分析骨骼肌 平 ，分析方法与试验 1 的相同 。 血样 分别 用 理的试管 和未经处理的试管 收集， 2800g 离心 30 分钟， 测定血浆葡萄糖、 游 离脂肪酸 、甘油 三酯 和胆固醇水平 ，检测血清胰岛素水平 。 血浆葡萄糖 (按照比色法测定原理，用 日立 7600/ 血清胰岛素 (采用放射免疫分析方法测定，用北京科美东雅生物技术有限公司试剂盒测定，试剂盒编号： 20050925。 测定原理：先将标准品 (或样品 )、标记物和抗体按操作程序依次加入试管中，使标记抗原和抗原与限量抗体发生竞争性结合，待反应平衡后，加入分离剂，离心沉淀，使游离抗原与抗原抗体复合物分离，测量沉淀中放射性强度。随胰岛素含量增加，放射性强度减少。 主要仪 器：放免测定仪 (计数器 )， 京核仪器厂 (国营 261厂 )。 血浆游离脂肪酸 (采用比色法测定，用南京建成生物工程研究所试剂盒测定，试剂盒编号： 20060104。 测定原理：游离脂肪酸与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶入氯仿中，其含量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量，即可推算出游离脂肪酸的含量。 甘油 三酯 ( 试剂盒 (北京中生生物技术公司产 )和生化分析仪 (在医院 )测定 胆固醇 ( 试剂 盒 (北京中生生物技术公司产 )和生化分析仪 (在医院 )测定 中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 26 表 3验日粮及其营养水平 of ) 成分 准日粮能日粮脂日粮养水平准日粮能日粮脂日粮米 代谢 能 C/豆粕 蛋白 麦麸 氨酸 酸氢 胱氨酸 氨酸 氨酸 氨酸 氨酸 混料 a 盐 效磷 粉 米蛋白粉 物油 氨酸 a: 每公斤预混料含： 2g; g; 3I 150,500,00000,000 300000050005烟 酸 6500泛酸 4000叶酸 150生物素 15氯化胆碱 60g; 以及抗菌促长剂、防霉防腐剂、抗氧化剂等。 据分析 用 的 行多因素方差分析，数据用平均数 x 表示，用 进行多重比较，显著水平设在 p 高能日粮组较标准日粮组 其 别增加 降 这些说明了饥饿、高脂和高能状态下胰岛素水平的上升 可以提高葡萄糖和脂肪酸的利用 。 饥饿组 基因鸡较非转基因鸡其 别降低 标准日粮组 低 高脂日粮组 基因鸡较非转基因鸡其 别升高 5%、 高能日粮组 基因鸡较非转基因鸡其 别降低 高 非转基因鸡饥饿处理组较标准日粮组其 别降低 别增加 高脂日粮组较标准日粮组其 别增加 别下降 高能日粮组较标准日粮组其 别增加 异不显著（ p 基因鸡饥饿处理组较标准日粮组其 别降低 别增加 高脂日粮组较标准日粮组其 别增加 其 别下降 异不显著（ p 高能日粮组较标准日粮组其 异不显著（ p 其中血浆胆固醇、甘油三酯和游离脂肪酸含量图详见图 3 3图 3 中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 29 表 3因型和日粮处理对血浆激素和代谢物浓度的影响 of on 粮 因型 G IU/饿组 转基因 转基因 准日粮 转基因 转基因 脂日粮 转基因 转基因 能日粮 转基因 转基因 异来源 P 值 P 基因型 粮 基因型 日粮 p p p p p 1B a r s s h o w M e a n 基因0 1 2 3处理0 . 0 0 01 . 0 0 02 . 0 0 03 . 0 0 0 1 2 3处理饥饿 标准日粮 高脂日粮 高能日粮 饥饿 标准日粮 高脂日粮 高能日粮图 3同试验处理下血浆胆固醇含量 CH of in 国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 30 0 1B a r s s h M e a n 标准日粮 高脂日粮 高能日粮 饥饿 标准日粮 高脂日粮 高能日粮非转基因转基因0 1 2 3处理0 . 0 0 00 . 1 0 00 . 2 0 00 . 3 0 00 . 4 0 0 1 2 3处理图 3同试验处理下血浆甘油三酯含量 G of in 1B a r s s h o w M e a n 标准日粮 高脂日粮 高能日粮 饥饿 标准日粮 高脂日粮 高能日粮非转基因 转基因0 1 2 3处理0 . 0 0 00 . 2 0 00 . 4 0 00 . 6 0 0 1 2 3处理图 3同试验处理下血浆 游离脂肪酸 含量 FA of in 论 因对脂肪代谢的影响 腹脂率 有所提高 ，说明 试验鸡 体内以腹部脂肪形式沉积的可利用能量的增加是由 在机体上水平上说明了 即 粒体 质子漏 作用降低 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 31 合成效率，使质子梯度中的能量以热能形式损耗 。 体内有更多能量以脂肪形式贮存，因此显著提高了腹脂率 ，这与我们的试验结果一致 。 基因鸡较非转基因鸡其 高 别降低 4%和 说明 基因鸡体内胰岛素水平降低可以促进肝糖原分解，导致血浆葡萄糖水平升高。 基因鸡 血液中乳糜微粒 日粮中的脂肪主要在门静脉直接沉积，合成外源性脂肪的能力增强，从而提高了脂肪组织中脂肪的沉积。 基因鸡 较非转基因鸡其血浆 平稍微上升，血浆 量与脂肪沉积有一定的相关性， 量的升高会促进 肝脏脂肪的转运，此时把肝脏合成的大量脂肪转运至脂肪组织贮藏起来。 基因鸡较非转基因鸡其血清胰岛素水平稍微下降，胰岛素水平下降 还 能抑制葡萄 的利用，因此 有出现显著变化，说明 和 2001)报道的 说明在高能高脂营养应激下 2000)提出 脂肪酸才是真正的质子载体。 长链 脂肪酸通过线粒体膜肉碱酰基转移酶系统进入线粒体，在基质中进行 氧化。其中肉碱棕榈酰转移酶 1是长链脂肪酸氧化的限速酶，脂肪酸以 只能以这种形式进行氧化。有某些原因可能会导致游离脂肪酸在线粒体的蓄积。首先，某些脂酰 硫酯酶作用下使 而抑制脂肪酸的氧化；其次，膜内膜外多余的 H+有利于中性脂肪酸的形成，中性脂肪酸穿过内膜扩散进入线粒体基质，内部的负电环境有利于 H+的解离，从而形成脂肪酸阴离子，并且在基质中蓄积。因为脂肪酸阴离子是表面活性 剂，能破坏线粒体膜。到保护线粒体氧化底物的正常功能。酰基 致 果硫酯酶能够把 样 2001)发现 1的量会上调。逐出 负电的内膜逐出带负电的 没有明确证据证实 且，且， 另一方面有研究者提出， 者把非酯酰化脂肪酸阴离子导出基质来降低质子梯度解，形成 偶联，减少提供胃肠道消化、吸收和运输日粮中脂肪所需能量，抑制脂肪的氧化代谢。 结合我们的前期实验结果， 明 质子漏 降低 质子 梯度 形成 降低能量利用率，而胃肠道脂肪的吸收与运输 ，脂肪酸与甘油的酯酰化和乳糜颗粒的形成都需要 此 降低血浆游离脂肪酸水平，促进脂肪组织脂肪的合成。 在骨胳肌， 对 上调有利于脂肪作为代谢底物，节省组织对葡萄糖的利用，满足大脑对葡萄糖的需求。 1998)提出， 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 32 跨线粒体膜的载体。据 (1998)报道，骨胳肌和棕色脂肪组织的 并不在于调节生热作用。这 种观点已经在大量的实验结果中得到支持，其中比较显著的证据是： 1998)提出的 空腹时 变化幅度白色肌肉（快速糖分解型）比红色肌肉（慢氧化）显著 ，这与慢氧化型肌肉较多依赖于脂肪作为燃料底物、快糖解型肌肉在葡萄糖和脂肪作为燃料底物之间的转变较大是一致的。 2001)报道食物中脂肪的增加会导致骨胳肌和其他组织中 饲对脂肪代谢的影响 试验鸡 饥饿状态下 血清 胰岛素水平的上升可以提高葡萄糖的利用， 减轻饥饿对试验鸡造成的应激， 同时血浆葡萄糖水平会下降， 血浆 量 的 下降 会 抑制 肝脏脂肪的转运，此时 会大大减少脂肪在 脂肪组织 的 贮藏。 而且，理论上 禁饲能促进骨骼肌和脂肪组织中 达 ，它可以减少胰岛素与受体的结合，降低胰岛素对脂肪合成（包括葡萄糖向脂肪的转化）的作用，增加血清胰岛素水平，这与我们的试验结果一致。 鸡的禁 饲 也会导致血浆 降，同时会增加 度。所有 员和胰岛素与鸡肌肉 平高度相关。虽然这些相关关系并不意味着因果关系，但 胰岛素 确实可以调节家禽的脂肪代谢。 2002)报道给鸡注射外源性 2002)报道用 理会出现相反的结果 ， 与大多数哺乳动物不 一样，在其 研究中禁饲鸡的血浆葡萄糖、乳糖、胰高血糖素水平与自由采食鸡的没有显著差异。 (2003)报道胰岛素和胰高血糖素能显著调节葡萄糖水平， (1998)提出，大多数用来诱 导生热反应的刺激，如饥饿、 寒冷、高脂、 肾上腺能激动剂和瘦素都能增加脂肪作为燃料底物的利用。 啮齿类动物在空腹时其 平都会上调，而且两者对能量消耗的影响不同，但都会加快游离脂肪酸的循环、提高脂肪的氧化速率。 高脂 高能 对脂肪代谢的影响 高脂和高能状态下 试验鸡血清 胰岛素水平的上升可以提高脂肪酸和酮体的利用 ，血浆 量上升，血浆 量与脂肪沉积有一定的相关性， 量的升高会促进肝脏脂肪的转运，此时把肝脏合成的大量脂肪转运至脂肪组织贮藏起来， 减缓高脂高能对试验鸡造成 的营养应激。 而且，理论上 高脂高能日粮能促进骨骼肌和脂肪组织中 达 ，它可以减少胰岛素与受体的结合，降低胰岛素对脂肪合成（包括葡萄糖向脂肪的转化）的作用， 增加血清胰岛素水平，这与我们的试验结果一致。 据 1997) 、 1997)和 1998)报道 ， 高脂食物可以导致棕色脂肪组织 （ 、白色脂肪组织 （ 及骨胳肌的 另据 2000)报道， 老鼠饲喂高脂食物后胃肠道的 这说明脂肪 同的调控机制。因为两者处在不同的生理环境中，胃肠道负责脂肪的吸收与运输，脂肪组织负责脂肪的贮存与利用。高脂食物对胃肠 其吸收的脂肪酸与甘油的酯酰化中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 33 和乳糜颗粒的形成都需要 且，脂肪组织 (1998)通过 对饥饿状态下 骨胳肌和棕色脂肪组织代谢的结果分析 ，提出 两种组织的 达量与脂肪作为代谢底物的利用都会发生改变。在棕色脂肪组织， 于空腹对交感神经系统 棕色脂肪组织的抑制，该组织总的代谢活动下调。 啮齿类动物在饲喂高脂日粮时其 平都会上调，而且两者对能量消耗的影响不同，但都会加快游离脂肪酸的循环、提高脂肪的氧化速率。 试验 4 不同能量浓度日粮对 基因鸡能量代谢的影响 自 1997 年 人的小鼠解耦联蛋白 (因敲除实验证实 示了 体内供热代谢途径中的机制以来，很快引起了遗传学家和营养学家们的 关注。已知三磷酸腺苷（ 生物体的能量来源，它作为动物维持生命活动最重要的能量库，其含量在一定程度上能够反映动物本身的能量状况，而 位于线粒体内膜的质子转运体，影响着 形成。当线粒体中有更多的燃料被氧化时，其释放的能量以热能的形式释放出来，而不是形成 类的 要存在于骨骼肌中。目前有关 未见文献报道。本研究旨在探讨 量及其变化规律的影响，探讨 因在鸡体能量代谢及其能量代 谢调控方面的作用，以及 因表达量与鸡体能量（ 用率之间关系，为动物能量代谢调控提供理论依据。 材料与方法 基因鸡的介绍 本试验的 基因鸡是通过 涉技术和转基因技术相结合制备，本质是将载有人动子的 体显微注射到京星黄 鸡的 卵 巢 中而产生转基因鸡，其显著特点是能够特异性抑制 因的表达。 基因鸡鉴定 本试验在试验 1 对 平阳性和 量 鉴定 的基础上展开。 中国农业科学院硕士学位论文 不同能量浓度日粮对 基因鸡脂肪代谢和能量平衡的影响 34 验 设计 试鸡选用 70 日龄、体重基本一致的非 基因鸡和本课题组制备的 基因鸡各90 只（公鸡）。采用 233 三因子完全随机设计，即 2 种基因型鸡分别为 基因鸡和非基因鸡， 3 种日粮分别为高能日粮、高脂日粮和标准日粮， 3 种日粮饲喂时间分别为饲喂 28 天、 40 天和 60 天，共组成 18 个处理组 (其中 28天处理组与试验 3 相同 )。分别将 180 只 基因鸡随机分成 18 组，饲养于不锈钢镀塑笼，每组 5 笼，每笼 2 只，分别饲喂相应试验饲粮。试验期 60 天， 在 试验 28 天、 40 天和 试验 结束时 ， 对应各 组分别选取 6只与平均体重相近的鸡屠宰，立即取其骨胳肌组织（ 5g 左右），液氮冻存，以备分析骨骼肌 平和 量。 验日粮 参照中国农业科学院畜牧研究所京星黄鸡 100配套系种鸡的相应营养建议量而配制试验日粮（试验日粮及其营养水平 见表 3 验地点 本试验在 动物营养国家 重点实验室进行。 养管理 自由饮水， 24h 光照，常规免疫。在自然环境条件下饲养，并按照黄鸡饲养管理方法进行管理。 品预处理 将样品从液氮中 取出 , 按每 50 品量加入 液 (0.3 )，充分匀浆 , 取上清液在冰水浴上静置 10后在 0下以 3000 r/温离心 5上清液， 的 调至 3000r/温离心 5上清液待测。 准曲线制备和样品测