探讨酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响

精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创1/8探讨酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响摘要目的探讨酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响。方法在恒温、恒湿、自动光控及电磁屏蔽条件下，给予实验动物不同剂量酸枣仁汤，采用慢性电极埋植技术描记电刺激所致失眠大鼠自由活动情况下的皮层脑电图。分析给予实验动物不同剂量的酸枣仁汤前后失眠大鼠脑电图的变化。结果低剂量酸枣仁汤对失眠大鼠慢波睡眠期（SWS1）睡眠时相有显著延长作用（P），中剂量酸枣仁汤能明显延长失眠大鼠SWS1和SWS2（P关键词失眠大鼠脑电图睡眠时相酸枣仁汤酸枣仁汤源自金匮要略“虚劳虚烦不得眠，酸枣仁汤主之”。长期临床观察结果表明酸枣仁汤或其加减方对各种失眠均有明显的改善作用。近几年来，开展了酸枣仁汤的现代药理实验研究，实验结果表明酸枣仁汤具有显著的镇静催眠作用15。为了进一步验证酸枣仁汤的改善睡眠作用，为临床应用酸枣仁汤治疗失眠提供实验依据，我们观察了酸枣仁汤对电刺激所致失眠大鼠的睡眠时相的影响。1器材动物WISTAR大鼠，雄性，体重215225G（黑龙江中医药精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创2/8大学实验动物中心提供，许可证号黑动字第P00101006）。试剂戊巴比妥钠（上海化学试剂采购供应站分装厂，批号020402，临用时以蒸馏水配制成1溶液）；自凝牙托水（哈尔滨齿科器材厂，批号040805）；注射用青霉素钠（哈药集团制药总厂，批号A05065612）。供试药品酸枣仁ZIZIPHUSJUJUBAMILLBUNGEHUEX、茯苓PORIACOCOSSCHWWOLF、川芎LIGUSTICUMCHUANXIONGHORT、知母ANEMARRHENAASPHODELOIDESBGE、甘草GLYCYRRHIZAURALENSISFISCH以上中药材购于哈尔滨宝丰药店,均经黑龙江中医药大学生药教研室孙慧峰老师鉴定。仪器ND97数字化脑电图仪（上海医疗器械高技术公司）；大鼠脑立体定位仪（美国STOELTING公司）；有机玻璃笼（自制）。2方法药液的制备（酸枣仁汤的制备）按酸枣仁汤配比炒酸枣仁18G，茯苓5G，川芎10G，知母10G，甘草5G，称取5味药材共454G，加8倍量水，浸泡1H后煎煮，沸后30MIN精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创3/8滤过，药渣加6倍量水煎煮，沸后20MIN，滤过，合并滤液,浓缩成G/ML的高剂量药液。将高剂量药液分别稀释成G/ML的中剂量药液和G/ML的低剂量药液，备用。环境控制实验环境为通风、避光、电磁屏蔽状态，采用自动定时光控系统对大鼠生活环境实行12H/D的明暗光照周期处理，实验温度232，相对湿度4550。时间每天上午830将大鼠脑部电极插座与仪器相连，开机运行30MIN，并于上午900正式开始描记实验。在记录皮层脑电时以视频监控系统观察大鼠状态。ND97数字化脑电图仪运行参数在脑电图描记前设置低频滤波截止频率为HZ，高频滤波为35HZ。通过同时对10只大鼠脑电图描记预实验观察，设定仪器增益为200，速度为2（每屏20S）时，各通道脑电信号清晰且未见重叠。大鼠睡眠时相区分标准和定量分析指标根据大鼠脑电图，并参考有关文献612，将大鼠觉醒睡眠周期分为觉醒（WAKE）、慢波睡眠期（SWS1）、慢波睡眠期（SWS2）和快动眼睡眠（REMS）4个时相。规定任何一个独立的睡眠时相持续时间至少在20S以上，并以每20S作为一个分析单元。精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创4/8电极埋置将实验动物置于上述实验环境中适应7D后，采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（40MG/KG）后，脑立体定位仪固定，头部剪毛，消毒后，剪去头部皮肤，充分暴露颅骨，剥离骨膜。分别于颅骨上（AP2，R2；AP2，R2）钻孔，将2个直径1MM不锈钢螺丝钉植入颅骨内，使之与硬脑膜接触，但不穿透硬脑膜，作为皮层电极；在额骨正中（AP5，R0）钻孔安置接地电极，并将电极螺丝钉制成微型插座，以牙科水泥固定1316。术后将实验动物置于特定的环境中，单笼饲养，连续3D腹腔注射4万单位青霉素，恢复7D，并于术后第7天将附有导线的插头与大鼠头部电极插座相连，进行大鼠对电极插座连接的适应性训练，训练H。大鼠失眠模型的复制术后第8天将大鼠置于失眠刺激器内，通过笼底部的电栅刺激大鼠足底部8H（刺激参数电流MA，波宽15MS，频率1HZ，在刺激期间，EEG和EMG记录线路可自行中断。电刺激可被两个可调定时器自动启动。这样，每刺激30S间隔30MIN,以造成大鼠失眠），同时进行皮层脑电的描记，描记时间从9001700共计8H。步骤每天830经灌胃途径给予失眠大鼠高中低剂量的酸枣仁汤，连续给药7D，于末次给药30MIN后，再对失眠大鼠进行8H的脑电描记和电刺激，分别计算此描记时精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创5/8间段内给药前后高中低剂量组失眠大鼠WAKE，SWS1，SWS2，REMS内各自的总时间，应用自身配对T检验法进行统计分析。3结果实验结果见表1。表1不同剂量酸枣仁汤对失眠大鼠睡眠时相的影响（略）从表1可知，电刺激后大鼠的W，SWS1，SWS2，REMS，TST与电刺激前相比均有显著性差异，表明失眠模型制作成功。3种不同剂量的酸枣仁汤均可明显减少失眠大鼠的觉醒时间；低剂量酸枣仁汤对失眠大鼠的SWS1期有延长作用（P2李哲酸枣仁汤对小鼠脑组织内啡肽的影响J河南中医，2001，215213张丽萍，卢建酸枣仁汤合甘麦大枣汤治疗更年期失眠症25例J浙江中西医结合杂志，2002，1263624沈鸿，肖红，陈建芳，等酸枣仁汤对血虚小鼠的镇静催眠作用J中医康复研究，2005，9431065杨晓霞，陈彤伟酸枣仁汤改善心肌梗塞患者睡眠和情绪障碍J中国临床康复，2004,81223706CLAUDEGOTTESMANN,THETRANSITIONFROM精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创6/8SLOWWAVESLEEPTOPARADOXICALSLEEPEVOLVINGFACTSANDCONCEPTSOFTHENEUROPHYSIOLOGICALPROCESSESUNDERLYINGTHEINTERMEDIATESTAGEOFSLEEPJNEUROSCIENCEANDBIOBEHAVIORALREVIEWS,1996,2033677PIERREGAUTHIER,CHRISTIANARNAUD,GABRIELGANDOLFO,ETALINFLUENCEOFGABA2RECEPTORANTAGONISTONTHESLEEPWAKINGCYCLEINTHERATJBRAINRESEARCH,1997,7731088张杰，王明时睡眠脑电的研究J国外医学生物医学工程分册，1997,202659,ETEFFECTSOFBENZODIAZEPINETRIAZOLAM,CYCLPYRROLONEZOPICLONEANDIMIDAZOPYRIDINEZOLPIDEMHYPNOTICSONTHEFREQUENCYOFHIPPOCAMPALTHETAACTIVITYANDSLEEPSTRUCTUREINRATSJEUROPEANNEUROPSYCHOPHARMACOLOGY,1999,912910KOICHISAITOU,YOSHIOKANEKO,YUKIOSUGIMOTO,ETWAVESLEEPINDUCINGEFFECTSOFFIRSTGENERATIONH1ANTAGONISTSJBIOL,1999,2261079精品文档2016全新精品资料全新公文范文全程指导写作独家原创7/811IMERIL,MANCIAM,OPPBLOCKADEOF5HYDROXYTRYPTAMINESEROTONIN2RECEPTORSALTERSINTERLEUKIN1INDUCEDCHANGESINRATSLEEPJNEUROSCIENCE,1999,92574512YOUSSEFSLISLI,RENAUDDEBEAUREPAIREINTERLEUKINANDCALCITONIN,BUTNOTCORTICOTROPINRELEASINGFACTOR,ALTERSLEEPCYCLESWHENINJECTEDINTOTHERATHYPOTHALAMICLATERALPARAVENTRICULARAREAJNEUROSCIENCELETTERS,1999,26542913DEPOORTEREHSOMEASPECTSOFTHEPOLYGRAPHICSTUDIESONSLEEPWAKEFULNESSCYCLEINRATJWAKI