参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究

圣匆中运雪尚硕士学位论文参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究云南中医学院学位论文独创性声明删本人郑重声明所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标注并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名压车日期避年正月L日，云南中医学院学位论文使用授权声明云南中医学院有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权云南中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存或汇编本学位论文。可以公布包括刊登论文的全部或部分内容。保密论文在解密后应遵守此规定学位论文作者签名毒翌日期巡年。L月L日学位论文导师签名龟叁日期垫2年量月羔日本人及导师同意将论文提交至清华大学“中国学术期刊光盘版电子社”进行电子和网络出版，并编入CNK3系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程规定享受相关权益学位论文作者签名血吼业年上月上日学位论文导师签名垄么日期盟年厶月日目录目录摘要1前言3第一部分文献综述5综述一中医补益心肾研究状况5综述二人参、鹿茸研究状况61人参62鹿茸83参茸提取工艺研究114参茸用药研究11综述三软胶囊剂的发展前景13第二部分参茸软胶囊的制备工艺研究15一药材来源及标准15二药材提取工艺研究151、处方依据152、提取工艺考察1621提取工艺的研究1622提取工艺的确定18三软胶囊剂型选择依据及其工艺研究181、剂型选择182、内容物的选择201基质选择202蜂蜡用量的选择203研磨混合时间214内容物的确定213、囊壳处方研究221甘油用量选择222遮光液配方选择233定型时间24目录4、工艺过程245、工艺流程图256、中试生产数据267、辅料来源及质量标准26第三部分质量标准研究27一药品名称27二处方27三制法27四性状27五鉴别281仪器、实验材料282方法28鉴别128鉴别229鉴别330六检查31L装量差异312崩解时限323铅、镉、铜、砷、汞分析考察321仪器、实验材料332铅、镉、铜、砷、汞检测研究333检测结果374微生物限度37七指纹图谱38八含量测定391、高效液相色谱含量测定研究39L仪器、实验材料392对照品溶液制备403供试品溶液制备404色谱条件与系统耐用性。41TL目录5专属性试验456标准曲线467精密度试验481重复性482中间精密度498溶液稳定性考察519准确度试验5210含量测定方法的确定541供试品含量测定542含量测定方法的确定562、紫外含量测定研究571仪器、实验材料572对照品，供试品溶液的制各583检测波长的选择584显色时间595显色剂用量606标准曲线607溶液稳定性试验618精密度试验621重复性622中间精密度629准确度试验6310供试品含量测定641供试品含量测定642含量测定方法的确定64第四部分药物稳定性研究661加速稳定性试验一662长期稳定性试验703稳定性试验考核结论73第五部分讨论74IIL目录1制备工艺方面742质量标准方面753稳定性研究764综合评价77附录78附录1参茸软胶囊质量标准草案78附录2参茸颗粒质量标准81参考文献83发表文章86致谢87IV摘要参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究摘要目的按新药申报的要求进行参茸软胶囊的药材提取、制备工艺、质量标准等研究，以期进一步提高参茸软胶囊产品的质量，从而保证人们用药的安全性和有效性。方法对人参，鹿茸的提取工艺进行正交考察，优化提取条件，并根据药物剂型的特点对软胶囊制备工艺进行研究；对产品理化及剂型按要求进行考察，采用薄层色谱法以对照药材和对照品作为对照，对方中人参、鹿茸进行了薄层定性鉴别研究根据药材特点，采用原子吸收、原子荧光对部分元素进行考察；用高效液相色谱法对其中的主要有效成分人参皂苷RGL、人参皂苷RE、人参皂苷RBL进行了含量测定及色谱鉴别研究，并结合紫外测定总氨基酸含量同时，根据研究制定的草案，对制剂的长期、加速稳定性进行考察。结果优选出了方中药味的提取、合理的制剂成型工艺，有效的建立了方中药昧的质量控制方法。结论参茸软胶囊组方合理，提取制备工艺科学先进，符合车间大批量生产，质量标准严格可控。关键词人参鹿茸软胶囊制备工艺质量标准参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究THEPREPARATIONTECHNOLOGYANDQUALITYSTANDARDOFSHENRONGSOFTCAPSULEABSTRACTOBJECTIVEACCORDINGTOTHEREQUIREMENTSTOFILEFORAPPROVALOFNEWDRUG，STUDIESOFEXTRACTION，PREPARATIONTECHNIQUESANDQUALITYSTANDARDSOFSHENRONGSOFTCAPSULEWERECONDUCTEDTHEPROJECTMAYFURTHERIMPROVETHEQUALITYOFTHESOFTCAPSULEPRODUCTS，THEREFOREENSURETHESAFETYANDEFFICACYOFDRUGT11EMPYMETHODSEXTRACTIONTECHNIQUESOFGINSENGANDPILOSEANTLERWEREORTHOGONALLYINVESTIGATED，ANDTHEEXTRACTIONCONDITIONSWEREOPTIMIZEDFURTHERMORE，PREPARATIONTECHNIQUESSMDIEDACCORDINGTOTHECHARACTERISTICSOFPHARMACEUTICALDOSAGEOFTHESOFTCAPSULEPHYSICOCHEMICALANDDOSAGEFORMOFPRODUCTREQUIREMENTSFORRESEARCH，USINGTHINLAYERCHROMATOGRAPHYTOCONTROLMEDICINEANDREFERENCEASACONTROL，THEOTHERINGINSENG，LOSEANTLERRESEARCHCONDUCTEDQUALITATIVEIDENTIFICATIONTLC；ACCORDINGMEDICINALCHARACTERISTICS，USINGATOMICABSORPTION，ATOMICFLUORESCENCESTUDYOFSOMEELEMENTS；USINGHIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHYINWHICHTHEMAINACTIVEINGREDIENTOFGINSENOSIDERGL，GINSENOSIDERE，GINSENOSIDERBLWERECHROMATOGRAPHICDETERMINATIONANDIDENTIFICATIONOFRESEARCH，COMBINEDWITHTHEUVDETERMINATIONOFTOTALAMINOACIDCONTENTMEANWHILE，ACCORDINGTOTHEDRAFTSTUDYFORMULATEDLONGTERMPREPARATION，ACCELERATEDSTABILITYSTUDYRESUKSTHEOPTIMIZEDPREPARATIONPROCEDUREOFHERBSEXTRACTION，REASONABLE，EFFECTIVEANDESTABLISHEDAQUALITYCONTROLMETHODOFHERBSCONCLUSIONSHENRONGSOFTCAPSULEPRESCRIPTIONISREASONABLE，SCIENCEANDADVANCEDTECHNOLOGYTOEXTRACTPREPARATION，INLINE、析T11THEWORKSHOPMASSPRODUCTION，STRICTQUALITYCONTROLSTANDARDSKEYWORDSGINSENG；PILOSEANTLERSOFTCAPSULE；PREPARATIONTECHNOLOGY；QUALITYSTANDARD2前言刖菁中医药的发展是我国劳动人民在与疾病长期斗争中反复实践的经验总结，是我国传统医学中的瑰宝。中药制剂与质量标准是中药现代化发展的基础，其产品形态、质量直接关系到用药安全和临床疗效。我国中草药自然资源丰富，蕴藏量大，但由于药物成分复杂，药材标准不够健全，同时，产品质量控制低水平重复、制备工艺和剂型发展落后等因素导致医药产业现代化技术水平低下，严重阻碍了我国中医理论的发展和中药临床的有效推广。因此，发展壮大中医药事业，提高我国医药综合实力和水平，是我们每一位医药工作者应尽的职责。人参、鹿茸在我国资源丰富，参茸的配伍应用历史悠久，尤其是宋元时期，鹿茸的临床应用扩大之后，含有人参、鹿茸的方剂散见于各家方书。我国历史上最大的方书普济方N1一书中，就有116首含人参、鹿茸的方子，其大都具有补心气，益心肾的作用。常用于治疗肾虚精亏、筋骨失养，命门火衰，冲任虚寒，精关不固等诸虚不足之症。参茸颗粒眨1收载于国家中成药标准汇编，内科气血津液分册。参茸软胶囊处方源于参茸颗粒，其处方为人参、鹿茸二者组方。人参，味甘，微苦，温，入肺、脾二经，功能大补元气，固脱生津，安神。善治劳伤虚损，食少，倦怠，惊悸，健忘，眩晕头痛，阳痿，尿频及久病不复，一切气血津液不足之症。鹿茸，味甘咸，温，入肝、肾经，壮元阳，益精髓，补气血，强筋骨。善治虚劳赢瘦，眩晕，目暗，阳痿，滑精等症。分则可独自成方，合用则阳得阴助，阴得阳化，具有益精血，补肾气之功效。参茸产品临床常用于心肾不足所致体虚神怯，心悸气短，腰膝酸软，阳萎遗精。参茸颗粒及其同类制剂自开发上市以来，经多年临床使用，无不良反应，对肾阳虚证具有很好的疗效，取得了较为满意的效果。本研究课题在原参茸产品等制剂的基础上对其制备工艺及质量标准进一步的深入研究及总结后，发现目前的大部分参茸产品由于提取制剂工艺不尽合理，原有质量标准较低不能有效控制产品质量，致使其产品在储存期易出现崩结块，含量降低等现象。因此将原颗粒剂改为软胶囊剂，通过探索新型软胶囊囊皮中各组分组成以及内容物的配比，从而改善参茸软胶囊的质量及稳定性方面的问题。通过研究制备成的软胶囊，不但含药量准确，有效成分得以提高，还可以掩盖不良气味，服用方便，外形美观，；而且产品质量标准进一步完善，得以较好的控参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究制，提高了药物的稳定性，安全性和有效性，使其临床疗效将在原剂型基础上得到进一步的保证。4第一部分文献综述第一部分文献综述综述一中医补益心肾研究状况中医学对人体机能的认识，在脏器责之于肾、肝、脾，其基础在于气、血、精，肾藏精、主发育与生殖，藏精是肾的主要生理功能，也是人体的生命之源，是构成人体、促进人体生长发育和维持人体生命活动的最基本物质之一。故素问金匮真言论日“夫精者，生之本也”。中医肾虚主要有肾气不固、肾阳虚衰、阴虚火旺、阳虚水泛、膀胱湿热等证型，多与久病、内分泌失调、免疫、生理代谢功能紊乱引起。肾阳虚症在临床上有补肾壮阳、益气温阳、阴中求阳等治法，但临床上多以补肾壮阳益精为主，而人参和鹿茸是补肾壮阳益精方剂中使用频率较高的药物之一。尤其是明、清以后，参茸被广泛应用于临床治疗性功能衰退、不孕、不育等症。参茸产品由人参和鹿茸两味药材组方，人参益气生血，扶正培本作用，加上鹿茸壮肾阳，益精血，强筋骨作用，将对心肾不足所致体虚神怯，心悸气短，腰膝酸软，阳痿遗精等症的患者起到较好的治疗作用。参茸制剂自开发上市以来，经多年临床使用，对肾阳虚证具有很好的疗效，取得了较为满意的效果。目前临床上使用的产品主要有参茸片及参茸颗粒等剂型，颗粒剂使用不便，临床推广较少，临床用得较多的是片剂。同时，以人参和鹿茸为主要原料的药品还有很多，如参茸丸、参茸药酒、参茸白风胶囊、参茸百补胶囊、参茸强力胶囊、参茸保元胶囊等品种。本研究课题在原来制剂研究的基础上，对制剂工艺进行了深入研究，经制各成的软胶囊剂，具有密封性好的优点，药物长期保存而不变质。而且软胶囊剂在固体口服制剂中生物利用度较好，在保证疗效的前提下，还可保持药品较高的稳定性。同时，通过对方中人参、鹿茸有效成分提取工艺的优化、质量标准进行更为严格的控制，使该产品更加符合药品安全有效，质量可控的目的。综上所述，对参茸颗粒进行改剂型研究，并对质量标准进行相应的完善，以保证该品种的质量可控及人民用药安全是十分必要的，也是可行的。参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究综述二人参、鹿茸研究状况1人参为五加科植物人参的干燥根及根茎，人参根据其化学成分的不同具有多方面的生理活性，各方面的研究亦比较深入，简述如下1化学成分人参皂苷人参皂苷GINSENOSIDE，GS是人参的主要有效成分，现己明确知道的GS单体约40余种，在人参中的含量占4左右。主要为人参皂甙RX注X0、A13、B13、C、D、E、F、G13、H1“3、SL、S2，假人参皂甙F11等。药理学证明，皂苷作为人参的主要活性成分，如人参皂苷RBL和I沁1可使垂体前叶的促性腺激素释放增加，具有改善肾阳虚生殖机能，I遮3和RH2对癌症等有较好的辅助治疗作用。人参皂苷大都含有由30个碳原子排列成四个环的甾烷类固醇核的基本结构，依糖苷基架构的不同而被分为两组达玛烷型和齐墩果烷型。达玛烷类型包括两类人参二醇型A型，如人参皂苷RBL、RB2、RB3、RD、R93、RH2等。人参三醇型B型，包含了人参皂苷RGL、R92、RE、RHL。齐墩果烷型齐墩果酸型C型，苷原为齐墩果酸。氨基酸和多肽类人参含有23种以上的氨基酸，其含量高达10以上，特别是一些人体不能合成而又必需的氨基酸，如丝氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸等。氨基酸和多肽也是人参主要活性指标性成分之一。多糖人参含有很多的糖类，有单糖、寡糖和多糖，糖总含量为46。人参多糖能增加人体免疫能力。但由于其多糖结构的复杂性，实际研究运用也较少。2人参的药理作用人参，又名孩儿参、地精、神草、血参。分布于黑龙江、吉林、辽宁和河北北部的深山中。其味甘，微苦，性温，入肺脾二经，具有复脉固脱，生精益神的功效。善治体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤内渴，内热消渴、久病虚弱、失眠多梦、肾虚体乏、阳痿宫冷，心力衰竭，心原性休克及久虚不复，一切津液气血不足之症。神农本草经载“主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、除邪气、明目、开心益智。”纲目“治男妇一切虚证，发热自汗，眩晕头痛，反胃吐食，滑泻久痢，小便频数，淋沥，劳倦内伤，中风，中暑，痿痹，第一部分文献综述吐血，嗽血，下血，血淋，血崩，胎前产后诸病。”薛氏医案B1“人参入肺经，助肺气而通活血，乃气中之血药也。”本草蒙筌T41“大抵人参补虚，虚寒可补，虚热亦可补；气虚宜用，血虚亦宣用。”本草汇言巧1“人参，补气生血，助精养神之药也。故真气衰弱，短促气虚，以此补之，如荣卫空虚，用之可治也；惊悸怔忡，健忘恍惚，以此宁之；元神不足，虚赢乏力，以此培之，如中气衰陷，用之可升也。”庄文选61等称人参在临床上应用的特点为益气固脱，大补元气，对元气虚极，体虚欲脱的的危急病症应尽快大剂量服用。马路7|等用人参皂苷治疗肾贫血52例，结果尿毒期症13例缓解2例，明显进步4例，总有效率为461；氮质血症期21例中基本治愈4例，缓解4例，明显进步8例，总有效率809；慢性肾小球肾炎11例基本治愈7例，缓解2例，总有效率818；慢性肾盂肾炎2基本治愈2例，缓解1例，明显进步3例，总有效率857；52例肾陲贫血患者总有效率736。陈波81等探讨了人参二醇组皂苷PDS对免疫低下患儿免疫功能的影响，60例患儿随机分为2组。治疗组采用PDS术前2天和术后30RAIN静滴，结果对照组术后外周血T细胞总数和辅助性T细胞明显降低，抑制性T细胞亚群明显增多，血清IGG明显降低，但PDS组术后T细胞亚群及免疫球蛋白含量稳定。刑建华四1等进行了人参皂苷诱导直肠癌细胞凋亡的临床观察，术后观察肿瘤的组织情况，结果治疗组用药后临床症状好转23例657，可见部分癌细胞的超微结构形态与对照组相似，但在癌细胞间明显可见凋亡的癌细胞。说明人参皂苷对诱导直肠癌细胞凋亡有较好的辅助作用。陈明帝101等观察了人参皂苷20RRGA对肺癌的临床辅助疗效，口服20MG，每日两次；对照组仅采用化疗，68周。结果治疗组有效率明显高于对照组，生活质量改善，体重增加。说明人参皂苷20RR93对肺癌有较好的辅助治疗作用。周郁鸿N等进行了人参总苷胶囊治疗中性粒细胞减少症的临床观察。治疗组53例服用人参总苷胶囊，对照组52例服用利血平片。观察48周。结果治疗组总有效率、治疗后外周白细胞改善情况及所需时间均优于对照组。总之，人参有效成分在增强细胞免疫，提高机体机能及耐力，预防感染方面有较好的疗效。人参为扶正固本药，还通过扶正培本，增强机体免疫系统的双向参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究调节作用，从而提高祛除病邪的能力。2鹿茸鹿茸为鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。主产吉林、黑龙江、辽宁等地。从文献及研究中可以了解到，对于鹿茸在化学成分、药理作用方面的研究中，药理作用的研究连续性较强，也更为深入广泛，而相对其化学成分方面的研究要滞后一些。在化学成分方面，表现为不能为每一种药理作用而定位其发挥作用的药效成分。在鉴别方法上，限于仪器与技术的要求，还主要停留在感官及常规理化检验上。在鹿茸的质量评价方面，到目前为止，还没有形成统一内在质量评价体系，只限于外观和含量方面的规定。根据多方面文献报导，现对其相关研究简述如下1化学成分鹿茸中化学成分比较复杂，目前人们对鹿茸的研究比较深入，鹿茸中许多化学成分已经得到鉴定，已知的有几十种，包括有机成分和无机成分。主要研究如下氨基酸氨基酸21是鹿茸有机成分中含量居首的营养物质，主要含有甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、丙氨酸、亮氨酸等17种以上氨基酸，其总量达50以上，包含了人体不能合成7种必需氨基酸，人们把鹿茸当作滋补营养保健品及药品，与其富含氨基酸密切相关。鹿茸中氨基酸含量的差异已渐渐成为判断鹿茸品质的内在指标。蛋白质和多肽类氨基酸是组成蛋白质的基本单位，结合型的氨基酸均是以蛋白的形式来表达。鹿茸中蛋白质含量较为丰富，其中以角蛋白最为突出，且在每一种鹿茸中都共同存在，因此它也可以做为判断茸角化学成分标准的指示物。无机元素鹿茸因为是骨质角，研究证实含有大量的氮、磷、钾、钙、钠、镁等无机元素，这些元素是人体的重要组成部分，也是维持人体正常运转必不可少的物质，所以也有人将无机元素的含量作为鹿茸产品质量的评价指标。而其中以钙和磷的含量检测研究最多。脂肪酸和磷脂鹿茸中富含磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸等磷脂以及豆蔻酸、棕榈酸、油酸、亚油酸等脂肪酸。磷脂是生物膜的重要组分，对维持生物膜结构的完整性与功能具有重要意义。是动物脑、神经组织、骨髓、生殖第一部分文献综述腺和精液等内脏中不可缺少的组成部分。磷脂对幼龄动物的生长发育非常重要，而且也有助于改善和加强男性性腺营养、调节和增强性功能的作用。磷脂对脂肪的消化、吸收、转运和形成起到非常重要的作用。碱基成分和多胺类化合物鹿茸中主要含有尿素、次黄嘌呤、脲、尿嘧啶等碱基成分，多胺类化合物是刺激核酸和蛋白质合成的有效成分，在鹿茸尖部含量较高。生长因子131主要为表皮生长因子、神经生长因子和胰岛素样生长因子，他们之间具有许多相同的生物活性，主要为刺激神经纤维的生长，诱导分化期细胞形态的变化。性激素和前列腺素1942年，日本学者发现鹿茸中含有雌酮，此后科学家又发现鹿茸中还含有雌二醇、睾酮、前列腺素等激素。睾酮可调控鹿茸的生长，雌二醇是鹿茸治疗宫冷不孕的物质基础。此外，鹿茸中还含有硫酸软骨素、神经节苷脂、酸性多糖、粘多糖等活性多糖。多糖类化合物含量与鹿茸的品种、生长阶段、部位等不同有一定的差异。21药理作用鹿茸常为滋补保健类中药，入药距今己有两千多年的历史。其味甘、咸、温，归肾、肝经，壮肾阳，益精血，强筋骨等。用于阳痿滑精，宫冷不孕，赢瘦，神疲，畏寒，眩晕，耳鸣耳聋，腰脊冷痛，筋骨痿软，崩漏带下，阴疽不敛诸症。纲目称“生精补髓，养血益阳，强健筋骨。治一切虚损，耳聋，目暗，眩晕，虚痢。”别录载“疗虚劳洒洒如疟，赢瘦，四肢酸疼，腰脊痛，小便利，泄精，溺血，破留血在腹，散石淋，痈肿，骨中热，疽痒。”药性论“主补男子腰肾虚冷，脚膝无力，梦交，精溢自出，女人崩中漏血。”日华子本草“补虚赢，壮筋骨，破瘀血，安胎下气。”本经逢原1141“鹿茸功用，专主伤中劳绝，腰痛赢瘦，取其补火助阳，生精益髓，强筋健骨，固精摄便，下元虚人，头旋眼黑，皆宜用之。”鹿茸不但在我国用于临床入药和民间处方的历史源远流长，在日本、朝鲜、苏联、蒙古和东南亚地区民间医学中，鹿茸被用于补养元气、增加身体耐力、抗疲劳、减缓精神压力、治疗创伤以及促进儿童发育等也被广泛引用。鹿茸具有广泛的药理作用，现代药理实验从以下几个方面进行了证明。鹿茸具有补血，温肾壮阳，抗衰老和心肌保护的作用。鹿茸N31通过强壮身参茸软胶囊制各工艺及质量标准研究体、恢复体能、提高人体的免疫能力、改善荷尔蒙而使人体保持健康平衡，是一种可预期用以提高“性能量”的手段，在日本鹿茸提取液用于治疗男性性功能失调、男性不育症，在我国更多的是在组方中添加鹿茸，用来治疗男性性疾病。丁钰熊N51等用鹿茸精注射液对血虚动物进行了治疗，结果表明鹿茸精注射液有促进骨髓造血和提高外周血象红细胞和血红蛋白的作用，对肾虚贫血所引起血清氨基酸浓度降低有升高作用，并具有较好的生精血功效。陈书明酗等进行了鹿茸醇提物抗氧化作用的实验研究，鹿茸醇提物可提高小鼠清除自由基的能力，增强小鼠的抗氧化作用，从而延缓机体衰老。同时，其提取物对环磷酞胺所诱导的小鼠白细胞减少、骨髓有核细胞减少均有显著的对抗作用。王岩等人也发现鹿茸的乙醇提取物对青年及老年小鼠可以明显的抑制MAO活性和提高SOD活性，具有一定的抗衰老作用。洪文N71等对30例精液异常的不育症患者进行针刺治疗，并配合。肾俞穴位注射鹿茸精注射液治疗，观察其对精液异常不育症I临床疗效及对精液质量等生殖机能的调节作用，其结果临床症状、精液质量及精子活动力均有明显改善，总有效率为9334。此外，鹿茸提取液对性器官的发育、性激素的分泌及性功能的改善也有较好的疗效。田育璋舳等对健康成年大鼠饲以鹿茸乙醇提取液，结果发现鹿茸乙醇提取液对正常成年大鼠生精过程有一定程度促进作用，随饮用时间延长，作用愈趋显著。鹿茸的提取液具有明显的免疫促进功效，可以提高人体的免疫能力。金光湖的实验就证明鹿茸对免疫功能低下具有提高作用。丁长海N91等对鹿茸液药理作用的研究，表明鹿茸液明显延长小鼠在25温水中的游泳时间和在20环境中的存活时间，增加肾上腺重量，提高脾脏及胸腺脂数，促进脾脏T、B淋巴细胞增殖反应，表明鹿茸液有促进生长、增加耐力、提高免疫力等作用。鹿茸在治疗骨质疏松方面也有很好疗效。新光毅等报告，鹿茸精对风湿性关节炎、胆石症、高脂血症、更年期综合征、甲状腺功能低下症等有较好的疗效。郝汉远等用鹿茸加味治疗腰问盘突出症36例，总有效率9440。赵文海呓等用鹿茸生长素治疗肾阳虚型骨质疏松60例，结果表明治疗前后骨密度，骨代谢生化指标明显改善。鹿茸对一些不良反应还具有拮抗作用。王本祥眩等发现鹿茸多糖具有抗胃溃疡的作用，余明泽等就曾报道利用大鼠进行鹿茸对酒精肝损害的作用研究发第一部分文献综述现，鹿茸对酒精肝损害有明显的拮抗作用。3参茸提取工艺研究对于人参提取工艺研究较多，生产及运用也相对较为成熟，但其主要指标大多以其主要药用成分人参皂昔为主。王坤221对独参注射液提取工艺研究，分别按渗滤法、冷浸法、水煎法、乙醇回流法对人参进行提取，检查提取液中人参总皂苷含量，独参注射液提取工艺以回流法为佳，优选的提取工艺为加LO倍量757,醇回流提取三次，每次提取LH。刘继菊23对人参总皂昔提取工艺条件优化研究，采用乙醇水浴回流提取，通过正交试验，以总皂苷得率为指标，其影响因素为乙醇浓度提取温度提取时间料液比。最佳提取工艺条件为70乙醇浓度、温度70、提取时间3H、料液比为120。鹿茸作为我国的一种传统中药材，针对不同的用药方向结合其有效成分选择不同的提取方法，其主要以不同浓度的乙醇、水作为提取溶剂。黄晓巍等阱1对鹿茸乙醇提取工艺的研究，通过正交试验，对乙醇提取鹿茸的工艺方法进行优化，以鹿茸浸提物的出膏率和游离氨基酸量为指标。正交统计分析结果乙醇浓度、回流次数有极显著性，乙醇量、回流时间无显著性，最终鹿茸乙醇提取的最佳工艺为10倍量702,醇，回流提取3次，每次1个小时。曾宇等眩51对鹿茸药材的质量控制方法研究，以10倍量70乙醇，超声提取60分钟提取效率最高。邹龙等眨6在对氨基酸测定研究中发现，醇浓度对氨基酸保留影响较大，当醇浓度在70时，除杂效率较好，而氨基酸得到最大的保留。4参茸用药研究心血不足，则神无所依，体虚神怯，心悸气短；肾阳不足，则腰膝酸软，阳痿遗精等。参茸软胶囊制剂采用人参和鹿茸二者为伍，取人参益气补血之功，所谓“血虚者，补其气而血自生”，心血充足，心神得养，则心神安定；取鹿茸温肾助阳之效，二者合用，从补益心肾入手，临床常用于心肾不足所致体虚神怯，心悸气短，腰膝酸软，阳痿遗精等症，可收到良好的效果。楼一层陀7等用参茸百补胶囊含人参、鹿茸治疗肾炎，治疗组参茸百补胶囊81例，对照组桂附地黄丸82例，结果治疗组治疗慢性肾炎有效率为9259，对照组有效率为7927，治疗组疗效确切是因为方中大量使用了人参鹿茸，起到了较好的滋阴补肾，益气壮阳的作用。参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究陈国庆眩81采用冠脉再通丹鹿茸、龟板、人参、红花、琥珀、水蛭等治疗冠心病心绞痛240例，并与60例采用复方丹参滴丸治疗该病进行对照，其结果显示，治疗组临床疗效总有效率为9375，心电图疗效总有效率为4375，提示本方有滋阴助阳，通脉宣痹，补益心肾的功效。姚克霓眨91等对补血生髓胶囊由人参、黄芪、阿胶、鹿茸等进行了药理作用的研究，其结果表明有补气养血9益肾填精等功效，该药可增加小鼠贮精囊重量，并能提高雄性小鼠的交配能力，有明显的抗疲劳和扶正祛邪等作用。张红梅日O3在对人参与鹿茸配伍对肾阳虚大鼠生殖机能影响进行了实验研究，结果表明参茸对雌性动物能加速其性成熟，使动情周期缩短、动情期延长，黄体激素分泌增多，子宫和卵巢重量增加；对雄性幼年动物，可使睾丸及附睾的重量增加，使家兔辜丸中精子增多，且活动力得到增强，在体外生存期延长。说明参茸配伍能改善或治疗肾阳虚生殖功能减退。楚0432等对HSB口服液人参、鹿茸、雄蚕娥、冤丝子等进行了药理试验，实验证明该药有明显促进正常动物性器官及附性器官发育成熟的作用，并能使去势大鼠附性器官生长发育接近正常水平，提示该药可通过不同环节发挥补肾壮阳、改善性功能的作用。刘筱茂【33】采用中药制剂生精丹鹿茸、红参、熟地等治疗男性不育104例，总有效率961596，提示该药有补肾填精，益气生血的作用，为治疗男性不育的理想药物。方全【34】等的实验证明康宁口服液人参、鹿茸、熟地黄、冤丝子等对雷公藤多苷所致的大鼠翠丸生精细胞的损伤有明显的修复作用，其机理是通过促进精母细胞和精子细胞的线粒体与膜结构的修复而改善生育能力。马孔琛3卯等对参茸保元东方神宝胶囊壮阳抗衰老作用进行了实验研究，实验证明参茸保元胶囊具有壮阳、抗肾阳虚，有促进动物性腺和性附属器官的发育，促进老年大鼠睾丸酮分泌，增强动物性机能作用。葛迎春等妇们对鹿茸提取物和人参皂甙对衰老细胞的琥珀酸脱氢酶和多糖含量的影响，其结果表明鹿茸提取物能显著增加年轻细胞中SDH和PSR的含量，对衰老细胞的影响较小，而人参皂甙则能显著增加衰老细胞中PSR的含量，对年轻细胞有降低含量的作用，增加年轻和衰老细胞中SDH的含量。李继海B71对梅花鹿茸活性成分提取分离、功能评价及功能食品研究，鹿茸第一部分文献综述软胶囊功能食品人参、鹿茸具有滋补强壮作用，可提高小鼠的免疫功能和造血功能，促进小鼠附属性器官的生长发育和创伤修复，具有较好抗疲劳、抗应激、耐低温能力，可改善缺氧环境下小鼠脑组织MDA水平，具有较好的抗缺氧能力。王义评B81等用参茸四子荣血汤含人参、鹿茸治疗再生障碍性贫血6例。治疗结果全部病例均完全缓解，1例存活14年，亡于子宫颈癌；L例缓解12年后J中风死亡；L例缓解情况良好，后死于产后大失血，余3例发病至今已缓解8年。隋道敬391等也观察了补益类中药治疗因化疗导致白细胞减少症的疗效，结果显示自拟升白汤鹿茸、胎盘、黄茂、人参等具有较好的升白作用，其疗效明显优于现临床常用的升白药物。陈莉萍4等的试验证明参茸白凤膏对失血性大鼠有增加红细胞总数、血红蛋白含量的作用，给药能对抗胃酸所致的小鼠疼痛反应。肖柳英4等用参茸白风丸考察对小鼠免疫功能的影响，研究结果表明，参茸白凤丸对体液、细胞免疫功能有促进作用。以上相关文献中所涉及中成药均含人参、鹿茸这一药材，且其实验机理和临床运用有许多相吻合的地方，从而可以借鉴或参考作为参茸软胶囊制剂的适应范围及药用方向，指导临床辨证用药。因此，以中医药理论为基础，借助现代科学手段研究参、茸的配伍规律具有重要意义。综述三软胶囊剂的发展前景软胶囊421的发展是由改善药物服用方法而来，我国很早就用食物包裹药物掩盖不良气味随着胶囊填充机的问世，胶囊剂从理论到生产运用有了较大的突破；随着软胶囊相关辅料和制备工艺的不断发展，传统中药学与现代制剂学得到了相应的发展，软胶囊剂也得到了日益广泛的应用。中药软胶囊剂与西药软胶囊不同，中药制备成软胶囊剂在处方工艺上要有所选择，中药软胶囊剂应该尽量选用提取物作为填充物，在工艺设计中应尽量避免药材细粉加入，防止细粉沉降在囊壳上，吸收水分，造成崩解时限不合格以及含量测定误差。原则上药味简单，挥发性成分含量较高、以及含糖类、含水及淀粉量少的组方适宜制成软胶囊。但往往由于中药处方成分复杂多样化，大多易吸湿，内容物及囊皮相容性需要考虑的影响因素也较多。有关中药软胶囊内容物基质的制备方法，文献报道及相关研究还不够详尽，需要在实践中结合具体产品研发情参茸软胶囊制各工艺及质量标准研究况进行摸索。目前，软胶囊制备方法有两种，一种是浸膏直接制备，另一种是粉末直接制备成混悬或糊状物。但这两种方法均要求内容物均匀稳定、流动性好。如临床运用较为广泛的血塞通软胶囊是从传统活血化瘀药物三七根中提取的三七总皂苷加适量赋形剂制成的软胶囊。具有活血祛瘀、通脉活络、抑制血小板聚集和增加脑血流量作用。用于脑路瘀阻、眼底病变、中风偏瘫、心脉瘀阻、胸痹心痛、脑血管病后遗症、心绞痛等症候的治疗上疗效显著。中药软胶囊剂的制备，单纯依靠粉末与油混悬还不能起到较理想的效果，容易出现内容物混合不均匀，易分层等缺点，从而造成装量的误差较大。选择适宜的助悬剂是软胶囊制备的关键，在生产上通常使用的助悬剂是蜂蜡、PEG4000或PEG6000。润湿剂与助悬剂配合使用较单一使用助悬剂效果好，其种类及配比要依靠内容性试验结果加以确定。软胶囊囊壳的制备十分关键，它直接关系到胶囊的成型和美观。囊壳的制备包括胶料、增塑剂、水、附加剂。胶料主要以明胶、虫胶、阿拉伯胶为主，增塑剂常用的有甘油、山梨醇，附加剂包括防腐剂、香精、色素、遮光剂等。由于中药内容物大多颜色较深，一般应在囊壳中加入色素及遮光剂等，总体来说，其采用的胶壳色泽要深于内容物的颜色较为适宜。而且，在囊壳加入钛白粉等遮光材料，能有效防止药物成分被氧化、或受潮、光照等造成的质量等问题。由于软胶囊具有剂量准确、溶出快、生物利用度高、副作用小、产品质量稳定性好及易控制、疗效好等优点，因此受到医药界广泛的重视。14第二部分参茸软胶囊的制备工艺研究第二部分参茸软胶囊的制备工艺研究一药材来源及标准人参本品“31为五加科植物人参PANAXGINSENGCA朋如的干燥根及根茎。收载于中国药典2010年版一部。主产吉林，于秋冬季节采收。检验标准按收载标准标准执行，合格品入库进入下一道工序。中国药典2010年版一部人参药材标准对其进行了显微鉴别和薄层鉴别用高效液相色谱法测定了人参中人参皂苷R91C42H72014和人参皂苷REC4SIIS20LS的总含量及人参皂苷RBLC54H92023的含量。鹿茸本品431为鹿科动物梅花鹿CEROUSNIPPONTEMMINCK或马鹿CEROUSELAPHUSLINNAEUS的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角。收载于中国药典2010年版一部。主产吉林、辽宁、黑龙江等地夏、秋季节采收。检验标准按收载标准标准执行，合格品入库进入下一道工序。中国药典2010年版一部对其进行了理化鉴别和薄层鉴别。以上二味药材均购买于云南药材有限公司中药饮片厂。二药材提取工艺研究1、处方依据本课题研究的参茸软胶囊，由从参、鹿茸的提取物组成，处方源于参茸颗粒见附录2参茸颗粒质量标准，为原产品的改剂型品种。参茸颗粒2处方原料人参409鹿茸79辅料蔗糖4909糊精4909以上二味药材，粉碎成粗粉，用30乙醇浸渍24小时，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，缓缓渗漉，收集漉液350ML，药渣再同法渗漉二次，合并渗漉液，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度12012550“2的清膏，加入蔗糖、糊精，混匀，干燥，制成颗粒10009，即得。每袋109，其服用剂量为每次L袋，一日2次。参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究参茸软胶囊沿用其组方中人参4009、鹿茸709的比例，提取有效成份后制成软胶囊1000粒。2、提取工艺考察21提取工艺的研究提取工艺的设计是在参考大量文献的基础上，根据处方药物所含的有效成分及其理化性质，各药物在现代制剂中的提取方法，传统用药习惯及现代药理研究结果。考虑到该药物以人参、鹿茸为贵细药材的组方，为最大限度的把组方中药物的有效成分提取出来，参考生产实践经验和中国药典中的要求，结合我公司近些年来三七总皂苷及其类似制剂血塞通软胶囊的生产等设备情况，我们在对原有参茸颗粒制剂工艺研究及实际生产的基础上进行了改进，使其更符合生产的规模化。参茸颗粒用渗漉法提取，其采用30乙醇浓度作为提取溶剂，主要成分提取后制备成浸膏。参考参茸颗粒提取工艺，我们考察了渗漉乙醇浓度、溶剂用量、流速对收率的影响。预实验结果渗漉法溶媒用量大，提取时间长，收集成分不易完全流出，浓缩回收加热时间较长，溶剂回收效率低，既浪费药材，又影响疗效。在此基础上，参考文献，采用回流法考察了鹿茸、人参的提取工艺，最终结合实际生产情况，我们选择了按比例处方进行合提，并进一步对回流提取的工艺条件进行了优化。回流提取方法中影响药材有效成分及提取物收率的因素主要与乙醇浓度、提取次数、提取时间、溶剂用量等有关。根据预试验结果和结合生产实践经验，选取乙醇浓度A、提取次数B、提取时间C、溶剂用量4个试验因素，每个因素3个水平，结果以参茸药材中提取物中总皂苷为主要评价指标，按L934正交表进行试验。其结果见表L表1L934正交试验因素水平表第二部分参茸软胶囊的制各工艺研究精确称取按比例混合的人参鹿茸粗粉1009，分别按下表正交试验条件进行考察，收集提取液，滤液减压浓缩至相对密度为12012550，干燥，得干浸膏粉，称量干浸膏粉重量。取干浸膏粉，采用紫外分光光度法，香草醛高氯酸显色，以人参皂苷RE对照品作对照，按中国药典2010年版一部项下人参总皂苷测定方法中的紫外测定方法，测定干浸膏粉中人参总皂苷的含量，并计算总皂苷得率。实验结果见表2、表3表2正交试验结果表3方差分析表参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究结果分析由直观分析得出最佳结果应为A2BLCLD3。根据方差分析结果，在人参皂苷得率的影响因素中，乙醇浓度、提取次数对人参总皂苷得率有显著性影响，提取时间、溶剂用量的影响不显著，四因数的影响顺序依次为乙醇浓度A提取次数B提取时间C溶剂用量D。在这四个因素中，乙醇浓度对提取效果的影响最大，达到显著水平P混悬物软胶囊内容物为混悬液硬胶囊片剂。软胶囊剂具有生物利用度高、吸收快、剂量准确、密封性好、可掩盖药物不良味道、保持较高稳定性的优点，是其他口服固体制剂不能与之相比的。软胶囊制剂是一种全封闭型的剂型，药物成分与空气完全由软胶囊壳分隔，另外油性基质将药物完全包裹，不存在水溶性药物接触空气吸潮的现象。同时在工艺中采用了胶体磨混合，使浸膏粉充分细化，即利于混悬液的稳定性，又保证了药物在进入胃中能充分分散，更利于加快药物的吸收及提高药物的生物利用度。由于软胶囊长期以来作为一种技术密集型剂型，专业性强，对技术设备要求较高，因此在一定程度上制约了软胶囊的推广及其发展。我公司拥有先进的软胶囊生产设备，多年来一直以生产软胶囊为主导产品，在实际科研、生产工中积累了丰富的经验，为软胶囊这一技术难度较高的剂型提供了技术支持和生产条件。通过文献及实验研究，对人参、鹿茸的提取和软胶囊制备工艺、质量标准控制以及稳定性等进行研究，优化，使其临床疗效将在原剂型基础上得到进一步的保证。在制备工艺中，将提取所得浸膏粉与大豆油、蜂蜡经胶体磨混合成混悬后制备为软胶囊；在含量测定研究中，并将参茸软胶囊与原参茸颗粒的含量进行比对，制备成软胶囊后，有效成分的利用得以提高。而且由于参茸颗粒为袋装，开水冲服。方中人参总皂苷易吸湿，味苦；而鹿茸气腥，口感较差，采用添加蔗糖、糊精等辅料来掩盖并改善口感，使服用剂量提高到主药有效量的20倍以上。与颗粒剂相比，参茸软胶囊以油脂为载体，具有吸收快，起效快，不受胃酸降解，生物利用度高，而且口感较佳，服用数量减少1粒软胶囊相当于1袋LOG的参茸颗粒，同时，存储中受湿度的影响较颗粒剂有所提高。而且在口服剂型中，软胶囊是国际认可的质量稳定性最强，既无嗅无味，便于12服又最美观便于保管的剂型。参茸软胶囊制备工艺及质量标准研究参茸软胶囊由于其剂型特点，具有外形美观、密封性好、服用方便、吸收快、剂量准确、生物利用度较高，稳定性高等优点。同时本品在质量标准研究中，对制剂中的药物成份进行了深入研究，制定了严格的控制限度，对本品的质量控制将会得到较好的保证。综合以上因素，决定选择软胶囊剂作为参茸颗粒的改剂型产品，以期提高产品稳定性和药物的综合利用度，确保用药安全有效，在以后的临床推广中将是本研究的一个亮点，具有较为广阔的发展远景。2、内容物的选择1基质选择目前，中药软胶囊制剂较为常用的基质有PEG400、花生油、大豆油、精紫苏油等。PEG400虽然是软胶囊中常用的分散介质，常与PEG4000、PEG6000联用。但压丸时药液经过喷体受热，压丸后在胶囊中会出现分层，影响含量和均匀度的测定。PEG400用量少，则药液呈膏状，易粘附在容器壁上，损耗大，且压丸时难以从喷体中出来；如PEG400太多，则药液呈溶液状，药物则易于沉淀下来，压丸时在料斗中就分层。而且，由于其在储存过程中，会从囊壳中吸收水分，导致囊壳变硬；同时，由于其容易发生氧化反应，生成低分子醛类物质，醛类物质与明胶形成交联，导致体外溶出速率降低或崩解延长。除此之外，防腐剂、遮光剂、色素等辅料也能诱致PEG400中低分子醛类物质的产生，并增加其对胶囊壳的交联作用。所以，综合考虑以上因素及实际生产情况，选用油类作为基质使得产品较为稳定。而其中大豆油属于药典品种，收载于中华人民共和国药典，质量能得到有效控制，同时，其价格相对于其它基质来说，比较便宜，在一定程度上可有效降低生产成本，成为众多中药软胶囊制剂的首选基质。综上所述，本品种拟选择大豆油作为基质。2蜂蜡用量的选择蜂蜡在处方中能够起到防止药物沉降的作用，使产品压丸或存放时药物不易沉淀。但其用量又不能过大，否则容易导致药液的流动性下降，影响灌装生产。称取参茸提取物5份，每份LLG，分别加入大豆油209，加入蜂蜡029、049、069、O89、109作为混悬剂，稍加热使熔解，搅拌均匀，补加大豆油至409。N第二部分参茸软胶囊的制备工艺研究置比色试管中，静置不同时段，计算沉降系数。沉降系数塑堕笔篆霍瓣结果见下表5表5蜂蜡用量选择实验结果表明，当蜂蜡用量达到1OG时，既有较好的流动性，同时还能保证有较好的混悬效果。故选用109的蜂蜡用量，即药液总量的25，按本配方制备的药液，质量稳定可控。3研磨混合时间将配好的药液注入胶体磨研磨，并对出来的药液每隔10分钟取样观察一次，连续观察4次，记录结果见下6表6研磨时间选择以上结果表明，胶体磨研磨时间在20分钟以上，混悬的药液均匀、细腻，无细颗粒。因此，确定研磨时间为20分钟。4内容物的确定通过以上实验，确定本品的处方为原料人参4009鹿茸709辅料大豆油2809蜂蜡109以上原辅料，按处方用量，制备成药液，压制成软胶囊1000粒。参茸软胶囊制各工艺及质量标准研究3、囊壳处方研究软胶囊主要的外观特征是可塑性强、弹性大、并取决于其囊材组成，即胶、增塑剂和水三者的比例。软胶囊用胶基本上以明胶为主，增塑剂以甘油为代表，水则以去离子水或纯水以上为好，一般城市饮用水由于含有氯离子和其它成分，对明胶有反作用或不符合药典及出口标准等。软胶囊软硬度与明胶、增塑剂之间的重量比例直接有关，如甘油明胶15时，得到的产品非常硬，甚至于比硬胶囊还硬实得多，产品储运在北方冬季，会导致冷爆破损，而在南方没有问题；若甘油明胶25时，得到的干燥后的产品非常软，有形而富有弹性，甚至于用手指可以拧撕开软胶囊。所以调整好两者之间的比例关系是非常重要的。内外辅助用溶剂或辅料均应考虑到其与胶的相容性和尽可能不会产生反应的物质。酸、胺、碱和水溶性重金属盐类等应避免，由于它们能比较强烈或明显地改变软胶囊的许多特性，包括交联、水解、溶化和变性。囊壳的研究主要依据经验及生产仪器、设备的特点进行考察。1甘油用量选择1设计处方软胶囊较好的弹性和可塑性取决于明胶、增塑剂甘油和水三者之间的比例，软胶囊的崩解、溶出度等不合格，其主要原因就是由于囊壳中各组分的比例不协调所致。软胶囊成型及产品质量也与明胶和水的比例有关，水分太多胶带缺乏粘弹性和凝冻力，容易导致接口粘合不牢，产品外形差，异形丸较多；而水分太少则胶太粘稠，容易粘滚，导致生产力下降。生产上一般以明胶水约11较为适宜。甘油的用量在囊壳成型制备过程中尤为重要，甘油用量少，囊皮弹性差，囊壳就会变硬。在保持明胶和水的比例不变的情况下，改变甘油的量，其用量分别为明胶用量的20、30、40、50、60，结果见下表7表7甘油用量选择2胶皮制备按设计处方称取明胶，加水浸泡，45加热使之溶解5分钟，第二部分参茸软胶囊的制备工艺研究再加入甘油搅拌均匀，70。C加热20分钟，用纱布滤去气泡，液态下均匀铺于玻璃板上厚度约2RAM，冷却，30以下干燥，用刀片切成2REX2锄胶皮，备用。3观测所制成的胶皮的性状，并拉伸一定程