蔬菜中硝酸盐含量的测定

1、蔬菜中硝酸盐含量的测定摘要 :基于硝酸根在 219 nm 处有强烈吸收 , 且干扰少 , 测定提取 液的吸光度 , 从标准曲线上查得相应浓度。提取液用 pH=9.6-9.7 的 氨缓冲液 ,从待测样品中提取硝酸根离子。此法测定的结果表明回 收率在 95.1%-100.9%之间 , 相对标准偏差为1.55%-4.14%。 操作方法 简便 , 适用于蔬菜中的硝酸盐含量的测定。关键词 :蔬菜 ; 硝酸盐 ; 紫外分光光度法前言 :蔬菜 ( 尤其叶菜类 是一种容易累积硝酸盐的作物 ,硝酸 盐含量超标已成为影响蔬菜品质的重要因素之一。由于当前我国蔬 菜在种植过程中化肥过量施用 , 而且有些蔬菜生产者采用

2、工业废水和 生活污水浇地 , 造成许多蔬菜中硝酸盐含量过高 , 已证明 , 硝酸盐在人 体内经微生物作用可被还原为有毒的亚硝酸盐 , 它可与人体血红蛋白 作用 , 使之失去载氧功能 , 造成高铁血红蛋白症 , 长期摄入硝酸盐会 造成智力迟钝等危害 1 。因此 , 蔬菜中硝酸盐的含量可作为衡量亚 硝酸盐对人体潜在危害的一个指标 2 。蔬菜硝酸盐含量的测定方法很多 ,如镉柱还原分光光度法、 离 子色谱法。其中镉柱还原分光光度法为检测蔬菜中硝酸盐含量的国 家标准方法 , 但由于干扰因素多 , 操作步骤过于繁琐 , 很难满足批量 常规分析之需要 ,而其它几种方法则需要精密仪器 , 测定条件较为 严格

3、,不适宜作常规监测分析 3。本实验采用操作简单、准确度高的紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量。1 实验仪器与材料1.1 主要仪器与试剂1.1.1 仪器紫外分光光度计; 容量瓶 ;乳钵1 .1.2 试剂氨缓冲液 (pH=9.69.7:2ml 浓盐酸加入 50ml 蒸馏水中 ,混 合后再加入 5ml 浓氨水 , 最后用蒸馏水稀释至 100ml 。 粉末状活性 炭 (除去待测样品中的色素。蛋白质沉淀剂 ,蛋白质沉淀剂 (除去蛋白质及混浊物 。 溶液 :15 克铁氰化钾 (K3Fe(CN6 溶于 50ml 蒸馏水中 , 定容于 100ml 。 溶液 :30g 硫酸锌 (ZnSO4溶于 60ml 蒸馏水

4、中 ,定容于 100ml 。硝酸盐标准液 :称 0.722g 在 110条件下烘干的 KNO3 用蒸馏水溶解后定容至1000ml 。此溶液为 100ug/ml 标准贮液 ,放入冰箱内保存。1.1.3 样品材料京白菜 (Brassica campestris L. ssp. chinensis (L. Makino. var. communis Tsen et Lee、小瓜 (Cucurbita moschata、胡萝卜 (Daucus carota、 莲花白 (Brassica oleracea L. var.capitata 、 土豆 (Solanum tuberosum L 、 黄瓜 (C

5、ucumis sativus Linn. (以上各蔬菜均在昆明蒜村农贸市场购买,产地昆明茨坝 ,高海 拔的冬天摘取 。2 实验方法2.1 标准曲线的绘制依次配制 NO 浓度为 0.4ug/ml, 0.8ug/ml, 1.2ug/ml, 1.6ug/ml, 2.0ug/ml, 2.4ug/ml,2.8ug/ml 的溶液 ,以重蒸馏水做空白 ,用 石英比色皿在 219nm 处测定吸光度 (A 。以标准溶液浓度为横坐标 , 吸光度为纵坐标绘制标准曲线。如图 2, 得回归方程为 A= 0 . 00919 +0 . 0596C,相关系数 r = 0 . 9996( n = 5。2.1.1 材料处理方法将

6、样品经自来水、去离子水洗净, 用滤纸擦干后选取有代表性的可食部分 , 将其切碎、混匀 , 并于研钵中捣碎, 处理后放入 烧杯中。2.1.2 样品测定准确称取蔬菜样品 0.5100g ,放入研钵中加入少量蒸馏水 , 研磨成匀浆 , 用 30ml 蒸馏水将研磨好的匀浆冲入 100ml 容量 瓶中 , 同时用蒸馏水 30ml 放入另一 100ml 容量瓶中做空白校 正,两瓶分别加 5ml 氨缓冲液 (pH=9.6 ,30ml 蒸馏水 , 0.5g 粉末状活性炭 ,摇动均匀 ,静置 20min ,加入蛋白质沉淀剂溶 液 1ml 和蛋白质沉淀剂 2ml, 充分混合 ,用蒸馏水定容到 100ml (V ,

7、 摇匀 ,放置 510min,定量滤纸过滤 ;取滤液用 石英比色皿在紫外分光光度计 219nm 处测定吸光度 (A 。 如吸光度太高 , 可用蒸馏水稀释510 倍后再测 (空白同样稀释 4 。3 结果与分析 :六种蔬菜的吸光度 (A 和硝酸盐浓度 (C表一0.0890 胡萝卜 0.3097 0.2274 0.2087 0.3026 1.0389 0.7644 0.7020 140.39表二：各种蔬菜的硝酸盐含量400 350 300 250硝酸盐含量 200 150 100 50 0京白菜 小瓜土豆 种类 黄瓜 莲花白 胡萝卜 系列 1 由表可看出六种蔬菜硝酸盐含量大小为：小瓜 >京白菜

8、 >黄瓜 >胡萝卜 >土豆 >莲花白。 3.1 共存离子的干扰及消除 按实验方法 , 对于硝酸盐溶液 , 以相对标准偏差 ( RSD 小于 5 %为限 , 少量的 K+, Na+ 、 Ca2+、 Mg2 +、SO42 -、F-不干扰测定 ; 而 NO-2、 CO2-3 有干扰。实验证明 ,加入 1 mo l/L 盐酸溶液 2 mL 可消除碳酸盐的干扰 ,再加 1%氨基磺酸铵 0.1 mL 能很好消除 NO-2 的干扰。NO3- 的最大吸收波长为 200nm±3nm, NO2-最大吸收波长为 210nm，实验选择条件 219nm 处， NP3-、NO2-具有等吸

9、收特征。 测定结果为 NO3- 和 NO2-之和，鉴于新鲜蔬菜中NO2-， 从而从总 和中扣除。由于仪器波长差异，测定前可先用标准 NO3-和 NO2 找出等吸收波长，再进行测定。 3.1.1 结论 利用本法测定蔬菜中硝酸盐含量 ,方法回收率在 95.1 % 100 . 9 %之间 ,相对标准偏差在 1 . 55 % 4 .14 %之间 ,准确度和精密度较高 , 且操作简便 , 尤其适用于检测大批量样。参 考 文献 1 李静娜 ,王红珠 ,梁高道 . 28 种蔬菜中亚硝酸盐含量随贮 存时间的变化 J. 中国公共卫生 , 2002, 18( 4: 474 2 中华人民共和国国家标准 GB/T15401- 94. 水果、蔬菜及 其制品亚硝酸盐