[基础科学]实验四_血凝和血凝抑制试验ppt课件

1、实验四实验四 血凝和血凝抑制实验血凝和血凝抑制实验一、实验目的一、实验目的 掌握血凝和血凝抑制实验的原理和操作方法，可以正确断定实验结果并对结果进展分析。二、血凝实验二、血凝实验 Hemagglutination, HA Hemagglutination, HA血凝景象：有些病毒可凝集某些动物如鸡、鹅、豚鼠、绵羊和人的红细胞(RBC)原理：血凝素与RBC外表相应受体结合，引起RBC凝集，用以测定病毒的含量HAHA实验的原理表示图实验的原理表示图 用途：确定病毒的含量； 计算病毒的血凝价，为血凝抑制实验做预备血凝价：能使血球产生50%凝集的病毒最高稀释度血凝单位实验资料实验资料鸡新城疫病毒鸡红细

2、胞：采集安康鸡血液，以阿氏液抗凝，用生理盐水洗涤3-5次，将血浆、白细胞等充分洗去，用生理盐水配成1%红细胞悬液备用灭菌0.85%生理盐水96孔U型微量反响板、微量移液器、灭菌塑料吸头操作步骤操作步骤在血凝板第一排的1-12孔参与50l生理盐水。在第1孔中参与50l病毒，混匀后吸50l到第2孔，如此倍比稀释直到第10孔，混匀后弃50l；最后两孔11、12为红细胞对照。将1%的红细胞悄然摇动混匀，在1-12孔中每孔参与50l。手工震荡，37静置30min (室温40分钟 )后察看结果 孔孔号号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11（C） 12（C） 生生理理盐盐水水（l） 50 50

3、50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 病病毒毒悬悬液液（l） 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 / / 1%红红细细胞胞（l） 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 弃50l 结果断定血凝价 A:26 B:25 C:22 D:27ABCD以以50%50%的红细胞发生凝集的病毒悬液的最高稀释度作的红细胞发生凝集的病毒悬液的最高稀释度作为该病毒液的红细胞凝聚效价，即一个血凝单位。为该病毒液的红细胞凝聚效价，即一个血凝单位。血凝价血凝价: :1:2561:256三、血凝抑制实验HemagglutinationInhib

4、ition, HI 原理：抗体与血凝素结合，封锁血凝素，使之不能与红细胞结合HIHI实验的原理图实验的原理图 用途: 用于检测血清中抗体含量； 鉴定病毒的型、亚型； 血凝抑制价：能完全抑制血球凝集的最高血清稀释度即为该血清的血凝抑制价实验资料4个血凝单位鸡新城疫病毒鸡红细胞：同上被检血清(采自被检鸡的血清)灭菌0.85%生理盐水96孔U型微量反响板、微量移液器、灭菌塑料吸头在血凝板的1-12孔参与25l生理盐水，最后2孔加50l。第1孔参与待检血清25l，混匀后吸25l至第2孔，倍比稀释直至第10孔，混匀后弃25l。在1-10孔，每孔加稀释好的25l 4个血凝单位的病毒悬液，室温静置30分钟 将红细胞悄然摇动混匀，在1-12孔中每孔参与50l手工震荡1min，在37静置30min(室温40分钟)后察看结果操作步骤断定结果：能将病毒凝集红细胞的作用完全抑制的血清断定结果：能将病毒凝集红细胞的作用完全抑制的血清的最高稀释倍数为该血清的红细胞凝集抑制效价，以的最高稀释倍数为该血清的红细胞凝集抑制效价，以2 2的指数表示。上图抗体结果从上至下依次为：的指数表示。上图抗体结果从上至下依