2022年景山学校高考生物五模试卷含解析

1、2021-2022学年高考生物模拟试卷注意事项1考生要认真填写考场号和座位序号。2试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B 铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1人类遗传病调查中发现两个家系都有甲遗传病（基因为H、h）和乙遗传病（基因为T、t）患者，系谱图如下。携带h基因的同时患有血脂含量明显升高的并发症，含h基因的精子成活率为1/2。I3无乙病致病基因，已知在男女比例为1:1的人群中出现乙病女性的概率为1/200

2、00。下列分析错误的是（ ）A从理论上分析，I1和I2后代的表现型共有9种BII5与II6结婚,生一个患甲乙两病男孩的概率为1/72CII7与II8结婚,生下的孩子患乙病的概率为1/202D若只考虑甲病的遗传,I2和III3基因型相同的概率为63/1612下列关于物质跨膜运输的叙述中，不正确的是 ()A同一物质进入不同细胞的方式可以相同，如葡萄糖进入肝脏细胞和骨骼肌细胞B不同物质进入相同细胞的方式可能相同，如氨基酸和核苷酸进入小肠上皮细胞C同一物质进入相同细胞的方式可能不同，如水分子进入某些具有水通道蛋白的细胞D不同物质进入不同细胞的方式可能相同，如乙醇进入小肠上皮细胞和Na进入神经细胞3下列

3、哪一项不是生物多样性的内容（ ）A多种多样的基因B丰富的物种数目C丰富的个体数量D多种多样的生态系统4番茄根尖经过植物组织培养过程可以获得完整的番茄植株，有关此过程的叙述错误的是A此过程中发生了细胞的脱分化、再分化B植物激素在此过程中起调节作用C此过程中若发生杂菌污染则难以获得目的植株D根尖细胞最终发育为无叶绿体的植株5下列有关T2噬菌体侵染细菌实验过程的说法，正确的是AT2噬菌体是一种专门寄生在肺炎双球菌体内的DNA病毒B实验过程中保温时间长短、搅拌是否充分均会影响放射性物质的分布C噬菌体侵染细菌实验证明了DNA是主要的遗传物质D噬菌体增殖过程中所需模板、原料、酶均来自宿主菌6生物的生命活动

4、是由不同的细胞共同完成的，同一细胞中的不同结构在功能上也各有分工。下列有关叙述正确的是（ ）A在细胞有丝分裂过程中，中心体和纺锤体会周期性地出现和消失B叶绿体膜和类囊体薄膜上具有将光能转换成化学能的酶系统C线粒体外膜和内膜上分布着有氧呼吸三个阶段必需的酶和ATPD生物膜将真核细胞分隔成不同区室，使细胞内能同时进行多种化学反应二、综合题：本大题共4小题7（9分）生物体的大部分细胞都可分泌外泌体，它是内含生物大分子的小膜泡，研究人员发现胰腺癌细胞的扩散转移与外泌体相关。为了给胰腺癌的综合治疗提供方向和思路，科学家进行了相关的研究。（1）请写出题干中未提到的癌细胞的两个特点_。（2）肿瘤内部处于低氧

5、条件下的胰腺癌细胞会分泌外泌体，内含一段小分子RNA（称为miR-650），外泌体可将miR-650传递给周围常氧条件下胰腺癌细胞N。miR-650可与细胞N中某些mRNA结合，从而导致mRNA被降解或其_过程被抑制。（3）研究人员进行了划痕实验，证明细胞N的迁移是由外泌体中的miR-650引起的。具体做法：将细胞N与外泌体混合培养至细胞刚刚长满培养板时，在培养板上均匀划两条直线。划线后，用培养液洗去两线之间的细胞并在显微镜下拍照；然后放入培养箱中继续培养24小时后，取出培养板在同一位置拍照，对比细胞的迁移情况，结果见下图。请写出该实验应设置的另一组及其结果_。（4）目前已知的细胞缺氧调控机制

6、是：缺氧情况下，细胞中的HIF-1（低氧诱导因子）会进入细胞核激活缺氧调节基因。这一基因能进一步激活多种基因的表达，引起系列反应，如：促进氧气的供给与传输、促进细胞的转移等。而正常氧条件时，HIF-1会与VHL蛋白结合，最终被蛋白酶体降解。具体机制如下图所示。研究发现，与低氧胰腺癌外泌体混合培养后的常氧胰腺癌细胞N中HIF-1水平明显升高。请结合上述研究，推测低氧胰腺癌细胞促进其周围的常氧胰腺癌细胞N转移的机理_。8（10分）回答下列问题。（1）雄鼠精细胞经过变形，_发育形成精子的顶体，顶体内含有的_能溶解卵丘细胞之间的物质，协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。（2）雌鼠排卵时，减数第一次分

7、裂尚未完成，此时卵子处于_卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂_期时，才具备受精能力。（3）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h,黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是_。然后从雌鼠的_中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是_。再在37、5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部开始出现裂隙，这是胚胎_期开始的标志。（4）如果体外受精后，在精核和卵核融合之前，用微型吸管吸除雄核，再用细胞松弛素B（能抑制纺锤体的形成）

8、处理，处理后的受精卵可发育成小鼠。这种育种方法叫_育种,在动物新品种选育中的显著优点是_。（5）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于_。（6）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能的原因_ 。9（10分）为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得转基因油菜品种。（1）研究人员从陆地棉细胞中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，如图为所示限制酶的识别位点。这

9、样可以用_（填酶）处理两个基因后，可得到_端（填图中字母）相连的融合基因。（2）将上述融合基因插入如图2所示Ti质粒的T-DNA中。构建充足质粒并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含_的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。（3）剪取油菜的叶片放入染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，经筛选后再将该油菜细胞通过植物组织培养获得转获因油菜。整个过程涉及的原理是_。10（10分）菊花很美，但其害虫较多，利用基因工程培育抗虫菊花是害虫防治的有效手段。胰蛋白酶抑制剂能干扰昆虫的代谢，引起昆虫死亡，但对人体无害。科学家将马铃薯胰蛋

10、白酶抑制剂基因（Pin）通过农杆菌导入菊花细胞，培育成了抗虫菊花。图1表示含目的基因的DNA分子，图2表示质粒，图中Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，复制原点是质粒DNA复制的起点，使其能在受体细胞中存在和遗传。箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。请回答下列有关问题：（1）上述基因工程中，受体细胞是_，属于_（填“动物”“植物”或“微生物”）基因工程。（2）为使目的基因与质粒高效重组，最好选用_（限制酶）作用于含目的基因的DNA和质粒，然后在_的作用下形成重组质粒。（3）用农杆菌感染时，应优先选用菊花_（填“受伤的”或“完好的”）叶片与含重组质粒的农杆菌共

11、培养，选用这种叶片的理由是_。成功导入重组质粒的细胞会表现为_。（4）用转基因菊花叶片喂养某种菊花害虫，发现害虫死亡率显著增加。试从分子水平写出转基因和非转基因菊花的叶片细胞的不同点：_。11（15分）新冠肺炎是指由新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染引起的急性呼吸道传染病。SARS-CoV-2通过关键刺突蛋白与人体细胞膜受体-血管紧张素转换酶2（ACE2）结合，才得以进入细胞。ACE2参与催化血管紧张素的形成，血管紧张素是调节血压，维持血浆渗透压、pH等稳态所必需的激素。请回答下列相关问题：（1）血管紧张素通过_运输到靶器官，靶细胞；血浆渗透压的大小主要与_等无机盐离子及蛋白质的含量有关

12、。（2）新冠肺炎患者一旦出现急性呼吸窘迫综合征，_呼吸增强后，就会出现乳酸酸中毒等情况，甚至会死亡。正常机体中，细胞外液中增多的H+，一方面迅速与HCO3-结合产生CO2，另一方面刺激相应感受器，引起位于脑干的_中枢兴奋，使呼吸加快加深，加速CO2排出，使血浆pH重新恢复正常。（3）SARS-CoV-2“偏好”攻击人体呼吸道纤毛细胞和肺泡上皮细胞，据题干可知，其原因主要是这两类细胞的细胞膜上_的含量高，容易被SARS-CoV-2识别并与之结合。（4）在治疗新冠肺炎的过程中，对危重症患者采取了设法延续生命特征的措施，如使用高压将氧气输入肺部，为患者自身免疫系统打败病毒争取时间。人体免疫系统具有_

13、功能。康复者的血浆有助于救治危重症患者，其免疫学原理是_。参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】由于生殖细胞或受精卵里的遗传物质发生了改变，从而使发育成的个体患疾病，这类疾病都称为遗传性疾病，简称遗传病。I1和I2生下II2患甲病，说明甲病为常染色体隐性遗传病。I3无乙病致病基因，但却生下了II9患乙病，说明乙病是伴X染色体隐性遗传病。假设乙病的致病基因Xt的基因频率为p，已知在男女比例为1:1的人群中出现乙病女性的概率为1/20000，则pp/2=1/20000，p=1/100。若仅考虑乙病，则雌配子：XTXt=991，雄配子：X

14、TXtY=991100，人群中XTXT的基因型频率为：99/10099/200=9801/20000，XTXt的基因型频率为：99/1001/200+99/2001/100=198/20000，正常女性中XTXt的频率为：198/20000（9801/20000+198/20000）=2/101。若仅考虑甲病，含h基因的精子成活率为1/2，I1、I3产生的精子均为Hh=21，I2、I4产生的卵细胞均为Hh=11，II5 、II6均正常，基因型为2/5HH、3/5Hh。同理，II5产生的精子均为Hh=143，II6产生的卵细胞均为Hh=73，III3基因型为HH：7/1014/17（1-3/10

15、3/17）=98/161，Hh：（3/1014/17+3/177/10）（1-3/103/17）=63/161。【详解】A、从理论上分析，I1的基因型为HhXTY，I2的基因型为HhXTXt，后代的表现型共有33=9种，A正确；B、II5的基因型为H_XTY，II6的基因型为H_XTX-，生一个患甲病的小孩的概率为9/170，II6的关于乙病的基因型为1/2XTXT、1/2XTXt，生一个患乙病的男孩的概率为1/21/21/2=1/8，生一个患甲乙两病男孩的概率为9/1701/8=9/1360，B错误；C、考虑乙病，II7的基因型为XTX-（99/101XTXT、2/101XTXt），II8的

16、基因型为XTY，生下的孩子患乙病的概率为2/1011/21/2=1/202，C正确；D、若只考虑甲病的遗传，I2的基因型为Hh，II5的基因型为H_（2/5HH、3/5Hh），II6的基因型为H_（2/5HH、3/5Hh），III3基因型为98/161HH、63/161Hh，I2和III3基因型相同的概率为63/161，D正确。故选B。2、D【解析】物质通过简单的扩散作用进出细胞，叫做自由扩散，如水、氧气、二氧化碳、甘油、乙醇、苯等物质进出细胞。进出细胞的物质借助载体蛋白的扩散，叫做协助扩散，如葡萄糖进入红细胞；从低浓度一侧运输到高浓度一侧，需要载体蛋白的协助，同时还需要消耗细胞内化学反应所释

17、放的能量，这种方式叫做主动运输，如氨基酸和葡萄糖进入小肠绒毛上皮细胞。【详解】同一物质进入不同细胞的方式可以相同，如葡萄糖进入肝脏细胞和骨骼肌细胞，都是主动运输，A正确；不同物质进入相同细胞的方式可能相同，如氨基酸和核苷酸进入小肠上皮细胞，都是主动运输，B正确；同一物质进入相同细胞的方式可能不同，如水分子进入某些具有水通道蛋白的细胞，有自由扩散和协助扩散两种运输方式，C正确；乙醇进入小肠上皮细胞是自由扩散，Na进入神经细胞是协助扩散，这两种物质进入不同细胞的运输方式不同，D错误；因此，本题答案选D。【点睛】解答本题的关键是：区分自由扩散、协助扩散和主动运输三种运输方式，以及相关的实例，再根据题

18、意作答。3、C【解析】物多样性的内涵通常包括三个方面，即基因的多样性、物种多样性和生态系统的多样性。【详解】ABD、生物多样性通常有三个主要的内涵，即基因的多样性、物种多样性和生态系统的多样性，ABD正确。C、丰富的个体数量不是生物多样性的内容，C错误。故选C。【点睛】解答此类题目的关键是理解生物多样性的内涵。4、D【解析】植物组织培养可以分为四个阶段：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，经脱分化形成愈伤组织；（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的；（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可

19、以直接切取进行扦插生根；（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。【详解】A、植物组织培养过程中涉及到脱分化形成愈伤组织和再分化形成根或芽的过程，A正确；B、植物组织培养时所用培养基中除含有各种营养物质外，还要加入起调节作用的植物激素，B正确；C、植物组织培养过程中应进行无菌操作，防止培养基和培养材料滋生杂菌，若发生杂菌污染则难以获得目的植株，C正确；D、根尖细胞中虽然没有叶绿体，但是细胞内含有叶绿体基因，所以经植物组织培养形成的植株中有叶绿体，D错误。故选D。5、B【解析】噬菌体具有专性寄生的特点，它的增殖必须在活细胞中，基本过程：吸附注入-合成组装-释放，在此过程中

20、以自身DNA为模板进行复制和表达，原料、酶都来自于宿主细胞【详解】A、T2噬菌体是专门寄生在大肠杆菌体内的DNA病毒，A错误；B、实验过程中保温时间过长，细菌裂解释放子代噬菌体进入上清液，导致32P在上清液中分布增多；时间过短，噬菌体可能不能把DNA注入到细菌体内，导致32P在上清液中分布增多；搅拌不充分，噬菌体颗粒更多的出现在沉淀物中，35S在沉淀物中分布增多，B正确；C、噬菌体侵染细菌实验证明了DNA是遗传物质，但不能说明DNA是主要的遗传物质，C错误；D、噬菌体增殖过程中所需模板来自于自身，原料、酶，能量均来自宿主菌，D错误；【点睛】弄清子代噬菌体的外壳和DNA的来源是分析问题的关键。6

21、、D【解析】中心体与有丝分裂过程中纺锤体的形成有关；叶绿体中的色素能够将光能转化为化学能；有氧呼吸分为三个阶段，其中第一阶段发生在细胞质基质，二、三阶段在线粒体内。【详解】A、在细胞的有丝分裂中，中心体在间期复制，此后在前期发出星射线形成纺锤体，纺锤体在前期出现，末期消失；故中心体不周期性地出现和消失，A错误；B、能将光能转换成化学能的是位于叶绿体的类囊体薄膜上的色素，B错误；C、有氧呼吸第一阶段不在线粒体内进行，而是在细胞质基质中进行，C错误；D、生物膜将真核细胞分隔成不同的区室，使得细胞内能够同时进行多种化学反应，而不会相互干扰，D正确。故选D。【点睛】本题综合考查细胞的结构和功能，熟记相

22、关知识是解答本题的关键。二、综合题：本大题共4小题7、无限增殖、细胞形态结构改变 翻译 对照组处理：敲除外泌体A miR-650，与胰腺癌细胞N混合培养至细胞刚刚长满培养板，随后进行划痕实验预期结果：24h后无细胞区域的宽度与0h差别不大 低氧条件下的胰腺癌细胞外泌体A的miR-650进入周围常氧胰腺癌细胞N中，与VHL基因mRNA 的部分序列结合，抑制VHL的表达，解除了VHL对HIF-1a的降解作用，HIF-1a 含量升高，激活低氧信号通路，促进N的转移。 【解析】癌细胞是构成癌症的最小的一个单位。一般癌细胞的特征主要表现在细胞核上，可能细胞核比普通的正常细胞要大很多，而且形态不规则，可能

23、含有丰富的染色质，所以染色的时候会表现出颜色深浅不一。癌细胞由于基因发生改变，粘连蛋白减少或缺少，容易在组织间转移。另外癌细胞还有一个最重要的特点，是无限增殖的特性，正常的细胞不可能出现无限增殖。【详解】（1）题干中提到了癌细胞易扩散转移，未提到的癌细胞的两个特点：无限增殖、细胞形态结构改变。（2）mRNA是翻译的模板，miR-650可与细胞N中某些mRNA结合，从而导致mRNA被降解或其翻译过程被抑制。（3）欲证明细胞N的迁移是由外泌体中的miR-650引起的，自变量是外泌体中的miR-650的有无，题干中设置的实验组是含外泌体中的miR-650的，从0h与24h对比可以看出对细胞迁移的影响

24、，因此应设置对照组：不含外泌体中的miR-650的组别。故对照组处理为：敲除外泌体A miR-650，与胰腺癌细胞N混合培养至细胞刚刚长满培养板，随后进行划痕实验预期结果：24h后无细胞区域的宽度与0h差别不大。（4）缺氧情况下，细胞中的HIF-1（低氧诱导因子）会进入细胞核激活缺氧调节基因。这一基因能进一步激活多种基因的表达，引起系列反应。结合图中信息可知，低氧条件下的胰腺癌细胞外泌体A的miR-650进入周围常氧胰腺癌细胞N中，与VHL基因mRNA 的部分序列结合，抑制VHL的表达，解除了VHL对HIF-1a的降解作用，HIF-1a 含量升高，激活低氧信号通路，促进N的转移。【点睛】本题以

25、实验和图解的形式考查学生对癌变知识的理解和应用，要求学生有一定的实验设计能力，且对图形信息有一定的处理能力，以此来解释常氧胰腺癌细胞N转移的机理。8、高尔基体 顶体酶 初级 中 促进排卵（或超数排卵） 输卵管（或卵巢） 使精子获能 囊胚 单倍体 明显缩短育种年限（时间） 小鼠甲（体细胞）核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因 外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达 【解析】受精是精子和卵细胞结合形成合子的过程，包括受精前的准备阶段和受精阶段，在自然条件下，受精是在雌性的输卵管内完成的，在准备阶段精子获能，卵子在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂的中期时，才具备与精子受精

26、的能力，受精阶段获能后的精子和卵子相时，发生顶体反应，释放顶体酶，溶解卵丘细胞之间的物质，形成精子穿越放射冠的通路。【详解】（1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，精子与卵细胞相遇，发生顶体反应，使得顶体内的顶体酶释放出来，溶解放射冠，接着穿过透明带。（2）雌鼠排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于初级卵母细胞阶段，当卵母细胞在输卵管内发育至减数第二次分裂中期时，才具备受精能力。（3）对雌鼠进行光控周期饲养并注射促进性腺激素，其目的是促进排卵； 然后从雌鼠输卵管中取出卵子；在一定条件下培养成熟；从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是使精子获能，因为受精作用进行时

27、，精子要消耗大量能量；卵裂开始后胚胎内部出现裂隙，这是胚胎囊胚期开始的标志。（4）处理后的受精卵由于只有雌核，而细胞松弛素B处理作用能抑制纺锤体的形成，所以处理后的受精卵染色体数目将加倍，这种育种方法叫单倍体育种，在动物新品种选育中的显著优点是容易获得纯合子并明显缩短育种时间。（5）将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因。（6）若外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达，则插入外源基因的这种受精卵可能会死亡，不会发育成转基因小鼠。【点睛】本题考查核移植和胚胎工程的相关知识，

28、意在考查考生的识记能力、理解能力和迁移应用能力，属于中等难度题。9、Cla 1（限制酶）和DNA连接酶 A、D 四环素 基因重组和植物细胞的全能性 【解析】（1）研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用PCR法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用Cla限制酶和DNA连接酶处理两个基因后，得到A、D端相连的融合基因；（2）将上述融合基因插入图乙所示Ti质粒的T-DNA中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中，将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于

29、转化的浸染液；（3）剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过植物组织培养技术，其原理为基因重组和植物细胞具有全能性。10、菊花细胞 植物 EcoRI和PstI DNA连接酶 受伤的 叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞 不抗氨苄青霉素，抗新霉素 比较转基因和非转基因两种菊花的叶片细胞，转基因菊花细胞中含有胰蛋白酶抑制剂基因、胰蛋白酶抑制剂的mRNA、胰蛋白酶抑制剂 【解析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达

30、载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）该基因工程需

31、要将胰蛋白酶抑制剂基因导入菊花细胞，使菊花具有抗虫性，所以受体细胞是菊花细胞，属于植物基因工程。（2）目的基因的两端含有EcoRI、TthIII I、PstI三种限制酶的酶切位点，为了避免目的基因自身环化，不能只用EcoRI这一种限制酶进行切割，若用EcoRI和TthIII I切割目的基因，相应的在对质粒进行切割时会将复制原点切去，因此、为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstI作用于含目的基因的DNA和质粒，然后在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。（3）用农杆菌感染时，应优先选用菊花受伤的叶片与含重组质粒的农杆菌共同培养，选用这种叶片的理由是叶片伤口处的细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞；重组质粒构建过程中用EcoRI和PstI进行切割，PstI会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此质粒上保留完整的标记基因是