基因表达调控医学课件教学课件

1、第十八章 基因表达调控 Regulation of Gene Expression2021/7/91神经元淋巴细胞2021/7/92第一节 基因表达调控基本概念与特点 基因(gene)：编码蛋白质或RNA等具有特定功能产物的、负载遗传信息的基本单位。一、基因表达是基因转录和翻译的过程 除了某些以RNA为基因组的RNA病毒外，基因通常是指染色体或基因组的一段DNA序列。 基因包括编码序列（外显子）、调控序列和间隔序列（内含子）。2021/7/93 基因(gene)的功能：利用碱基的不同排列荷载遗传信息。 通过复制将遗传信息稳定、忠实地遗传给子代细胞，在这一过程中为适应环境变化，可能会发生基因突变

2、。 作为基因表达的模板，使其所携带的遗传信息通过各种RNA和蛋白质在细胞内有序合成而表现出来。 2021/7/94真核基因的基本结构2021/7/95基因组（genome）一个生物体内所有遗传信息的总和。人类基因组细胞核染色体DNA2800Mb线粒体DNA16.6kb编码蛋白基因序列基因外序列约25%约75%外显子内含子约1%约24%基因间序列中度至高度重复序列2个rRNA基因22个tRNA基因13个蛋白编码基因图13-42021/7/96 基因表达（gene expression）是基因转录及翻译的过程。rRNA、tRNA编码基因转录过程也属基因表达。 生物基因组中只有部分基因表达，其表达水

3、平会随时间、环境而变化。基因表达是受调控的。DNARNA转录蛋白质翻译逆转录复制2021/7/97二、基因表达具有时间特异性和空间特异性（一）时间特异性 按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生。多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性。（二）空间特异性 在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现。又称细胞特异性或组织特异性。2021/7/98 基因表达的时间、空间特异性由特异的基因启动子和（或）增强子与调节蛋白相互作用决定。三、基因表达的方式存在多样性基因表达调控（regulation of gene expression）就是指细胞或生物体在接受内外环境信

4、号刺激时或适应环境变化的过程中在基因表达水平上做出应答的分子机制，即位于基因组内的基因如何被表达成为有功能的蛋白质（或RNA），在什么组织表达，什么时候表达，表达多少等。 2021/7/99（一）基本表达(constitutive gene expresstion)指在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达，不受环境条件的影响的基因表达。这类基因表达称为基本表达(或组成性)基因表达，这些基因通常被称为管家基因(housekeeping gene)。其基因表达产物通常是对生命过程必需的或必不可少的，且较少受环境因素的影响。这类基因表达只受启动序列或启动子与RNA聚合酶相互作用的影响，不受其它机制调

5、节。2021/7/9109、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2022/7/142022/7/14Thursday, July 14, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。2022/7/142022/7/142022/7/147/14/2022 9:22:10 PM11、人总是珍惜为得到。2022/7/142022/7/142022/7/14Jul-2214-Jul-2212、人乱于心，不宽余请。2022/7/142022/7/142022/7/14Thursday, July 14, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2022/7/142022/7/142022/7/1

6、42022/7/147/14/202214、抱最大的希望，作最大的努力。14 七月 20222022/7/142022/7/142022/7/1415、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。七月 222022/7/142022/7/142022/7/147/14/202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022/7/142022/7/1414 July 202217、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2022/7/142022/7/142022/7/142022/7/142021/7/911（二）适应性表达(adaptiveexpression)诱导(induction)：指在特定环境信号

7、刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加。这种基因称为可诱导基因。 如： DNA损伤修复酶基因激活阻遏(repression)：指在特定环境信号刺激下，相应的基因被抑制，基因表达产物减少。这种基因称为可阻遏基因。如： 大肠杆菌的色氨酸合成酶系有些基因的表达受到环境变化的诱导和阻遏。 2021/7/9129、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定。2022/7/142022/7/14Thursday, July 14, 202210、低头要有勇气，抬头要有低气。2022/7/142022/7/142022/7/147/14/2022 9:22:10 PM11、人总是珍惜为得到。2022/7/14

8、2022/7/142022/7/14Jul-2214-Jul-2212、人乱于心，不宽余请。2022/7/142022/7/142022/7/14Thursday, July 14, 202213、生气是拿别人做错的事来惩罚自己。2022/7/142022/7/142022/7/142022/7/147/14/202214、抱最大的希望，作最大的努力。14 七月 20222022/7/142022/7/142022/7/1415、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。七月 222022/7/142022/7/142022/7/147/14/202216、业余生活要有意义，不要越轨。2022/7/

9、142022/7/1414 July 202217、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。2022/7/142022/7/142022/7/142022/7/142021/7/913在一定机制控制下，功能上相关的一组基因，无论其为何种表达方式，均需协调一致、共同表达，即为协调表达(coordinate expression)。这种调节称为协调调节(coordinate regulation) 。（三）生物体内不同基因的表达受到协调调节2021/7/914四、基因表达受顺式作用元件和反式作用因子共同调节 顺式作用元件(cis-acting element)可影响自身基因表达活性的DNA序列位于真

10、核基因转录区前后，对基因表达起调控作用的区域，因其是紧邻的DNA序列，又称旁侧序列，包括启动子、上游调控元件、增强子、加尾信号和一些细胞信号反应元件等。 反式作用因子2021/7/915五、基因表达调控呈现多层次和复杂性 基因表达调控是在多级水平上进行的复杂事件，转录起始是基因表达的基本控制点。细胞核核孔DNA 初级RNA转录物mRNAmRNA蛋白质失活蛋白质1转录控制2RNA加工控制翻译控制34蛋白质活性控制细胞质2021/7/916（一）生物体调节基因表达以适应环境、维持生长和增殖（二）生物体调节基因表达以维持细胞分化与个体发育突变六、基因表达调控是生物体生长和发育的基础2021/7/91

11、7第二节 原核基因表达调控 原核基因组的结构特点： 基因组中很少有重复序列； 编码蛋白质的结构基因为连续编码，且多为单拷贝基因，但编码rRNA的基因仍然是多拷贝基因； 结构基因在基因组中所占的比例（约占50%）远远大于真核基因组； 许多结构基因在基因组中以操纵子为单位排列2021/7/918一、操纵子是原核基因转录调控的基本单位编码序列 启动序列 操纵序列 其他调节序列(promoter)(operator)RNA-pol(2) 操纵子(operon)通常由2个以上的编码序列与启动序列、操纵序列以及其他调节序列在基因组中成簇串联组成。2021/7/919RNA转录起始-35区-10区TTGAC

12、ATTAACTTTTACATATGATTTTACATATGTTTTGATATATAATCTGACGTACTGTN17N16N17N16N16N7N7N6N7N6AAAAAtrp tRNATyrlacrecAAra BAD TTGACA TATAAT共有序列图18-1 五种E.coli启动序列的共有序列启动序列2021/7/920当操纵序列结合有阻遏蛋白时，会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合，或是RNA聚合酶不能沿DNA向前移动 ，阻遏转录。原核阻遏蛋白(repressor)的结合位点编码序列 启动序列 操纵序列 其他调节序列(promoter)(operator)RNA-pol阻遏蛋白负性调节

13、操纵元件2021/7/921原核操纵子调节序列是还有一种特异DNA序列可结合激活蛋白(activator) ，促进RNA聚合酶与启动序列的结合，增强RNA聚合酶活性。有些基因在没有激活蛋白存在时，RNA聚合酶很少或完全不能结合启动序列。正性调节编码序列 启动序列 操纵序列 其他调节序列(promoter)(operator)CAPRNA-pol(2)CAP：分解（代谢）物基因激活蛋白 转录特异DNA序列2021/7/922 原核生物基因转录调节蛋白分为三类：特异因子、阻遏蛋白和激活蛋白。编码序列 启动序列 操纵序列 其他调节序列(promoter)(operator)特异因子CAP阻遏蛋白 D

14、NA调节序列本身并不行使功能，这些序列必须被基因转录调节蛋白识别和结合才能发挥作用。2021/7/923二、乳糖操纵子是典型的诱导型调控（一）乳糖操纵子(lac operon)的结构 结构基因Z： -半乳糖苷酶Y： 通透酶A：乙酰基转移酶调控区CAP结合位点启动序列操纵序列调节基因ZYAOPDNAIPI2021/7/924mRNA阻遏蛋白IDNAZYAOPRNA-pol 没有乳糖存在时，lac操纵子处于阻遏状态1. 阻遏蛋白的负性调节阻遏基因（二）乳糖操纵子受到阻遏蛋白和CAP的双重调节 图18-2 lac操纵子与阻遏蛋白的负性调节抑制转录启动2021/7/925mRNA阻遏蛋白IDNAZYA

15、OPRNA-pol启动转录乳糖半乳糖-半乳糖苷酶 有乳糖存在时，lac操纵子即可被诱导。作为诱导剂结合阻遏蛋白mRNA 图18-2 lac操纵子与阻遏蛋白的负性调节2021/7/926+ + + + 转录 无葡萄糖及cAMP浓度高时2. CAP的正性调节ZYAOPDNACAPCAPcAMP 有葡萄糖及cAMP浓度低时cAMP与CAP结合受阻lac操纵子表达下降RNA-pol2021/7/9273. 协调调节当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用；ZYAOPDNAIPI(a)有葡萄糖，无乳糖阻遏蛋白CAPRNA-pol抑制转录启动图18-3 lac操纵子的调节2021/7/928当乳糖

16、存在时，去阻遏；但因有葡萄糖存在，CAP不能发挥作用，仍几无转录活性。(b)有葡萄糖，有乳糖ZYAOPDNAIPICAP阻遏蛋白诱导剂很少的mRNA转录图18-3 lac操纵子的调节3. 协调调节2021/7/929当葡萄糖不存在，乳糖存在时，既去阻遏； CAP又能发挥作用，对lac有强的诱导调节。(c)无葡萄糖，有乳糖ZYAOPDNAIPICAP阻遏蛋白诱导剂大量的mRNA转录RNA-pol3. 协调调节图18-3 lac操纵子的调节2021/7/930三、色氨酸操纵子通过转录衰减的方式阻遏基因表达色氨酸操纵子阻遏蛋白RNA聚合酶mRNA基因打开低浓度色氨酸高浓度色氨酸色氨酸基因关闭启动序列

17、转录起始-35+12021/7/931两种终止调节方式：衰减和抗终止依赖Rho ()因子的转录终止非依赖Rho因子的转录终止主要转录终止机制四、原核基因表达在转录终止阶段有不同的调控机制五、原核基因表达在翻译水平的调节2021/7/932第三节 真核基因表达调控一、真核基因表达的特点 真核基因组结构庞大； 真核基因组含有大量的重复序列； 真核基因具有不连续性； 真核生物mRNA是单顺反子； 真核生物DNA在细胞核内与多种蛋白质结合构成染色质； 真核生物的遗传信息不仅存在于核DNA上，还存在线粒体DNA上，核内基因与线粒体基因的表达调控既相互独立而又需要协调。 2021/7/933图18-5 真

18、核生物基因表达的多层次复杂调控2021/7/934二、染色质结构与真核基因表达密切相关 活性染色质 (active chromatin)具有转录活性的染色质 超敏位点（hypersensitive site)当染色质活化后，常出现一些对核酸酶（如DNase I）高度敏感的位点（一）转录活化的染色质对核酸酶极为敏感 2021/7/935(二) 转录活化染色质的组蛋白发生改变 （a）（b）（c）图18-6 组蛋白结构及其化学修饰2021/7/936组蛋白氨基酸残基位点修饰类型功 能H3Lys-4甲基化激活H3Lys-9甲基化染色质浓缩H3Lys-9甲基化DNA甲基化所必需H3Lys-9乙酰化激活H

19、3Ser-10磷酸化激活H3Lys-14乙酰化防止Lys-9的甲基化H3Lys-79甲基化端粒沉默H4Arg-3甲基化H4Lys-5乙酰化装配H4Lys-12乙酰化装配H4Lys-16乙酰化核小体装配H4Lys-16乙酰化Fly X激活表18-1 组蛋白修饰对染色质结构与功能的影响 2021/7/937（三） CpG岛甲基化水平降低CpG岛（CpG island) ：甲基化胞嘧啶在基因组中并不是均匀分布，有些成簇的非甲基化CG存在于整个基因组中，人们将这些GC含量可达60%，长度为300-3000bp的区段表观遗传（epigenetic inheritance) ：染色质结构对基因表达的影响可

20、以遗传给子代细胞，其机制是细胞内存在着具有维持甲基化作用的DNA甲基转移酶，可以在DNA复制后，依照亲本DNA链的甲基化位置催化子链DNA在相同位置上发生甲基化2021/7/938三、基因组中的顺式作用元件图18-7 顺式作用元件2021/7/939（一）真核生物启动子结构和调节远较原核生物复杂真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件。TATA盒GC盒CAAT盒2021/7/940CCAAT盒GC盒TATA盒转录起始点高等真核生物上游激活序列（UAS）TATA盒转录起始点酵母真核基因启动子的典型结构2021/7/941（二）增强子

21、是一种能够提高转录效率的顺式调控元件 增强子的功能及其作用特征如下： 与被调控基因位于同一条DNA链上，属于顺式作用元件。是组织特异性转录因子的结合部位。不仅能够在基因的上游或下游起作用，而且还可以远距离实施调节作用作用与序列的方向性无关需要有启动子才能发挥作用（三）沉默子能够抑制基因的转录2021/7/942四、转录因子是转录调控的关键分子真核基因的转录调节蛋白又称转录调节因子或转录因子（transcription factor, TF）。绝大多数真核转录调节因子由其编码基因表达后，进入细胞核，通过识别、结合特异的顺式作用元件而增强或降低相应基因的表达。转录因子也被称为反式作用蛋白或反式作用

22、因子。2021/7/943可特异识别、结合自身基因的调节序列，调节自身基因的表达的蛋白质因子。这种调节作用称为顺式作用（顺式调节） 。由某一基因表达产生的蛋白质因子，通过与另一基因的特异的顺式作用元件的识别、结合反式激活另一基因的转录。这种调节作用称为反式调节。 真核基因转录调节蛋白(转录调节因子或转录因子) 反式作用蛋白或反式作用因子 顺式作用蛋白2021/7/944 转录因子(transcription factors,TF)的分类（一）通用转录因子是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。为个别基因转录所必需，决定该基因的时间

23、、空间特异性表达。（二）特异转录因子转录激活因子转录抑制因子2021/7/945（三）转录因子的结构特点DNA结合域转录激活域TF蛋白质-蛋白质结合域（二聚化结构域） 谷氨酰胺富含域酸性激活域脯氨酸富含域2021/7/9461. 转录因子的DNA结合结构域主要有以下几种（1）锌指模体(zinc finger)常结合GC盒C=半胱氨酸；H=组氨酸；F=苯丙氨酸；L=亮氨酸；Y=酪氨酸；Zn=锌离子图18-9 锌指结构2021/7/947（2）碱性螺旋-环-螺旋（basic helix-loop-helix,bHLH)（a）独立的碱性螺旋-环-螺旋模体结构示意图；（b）bLHL模体二聚体与DNA结

24、合的示意图。两个-螺旋的碱性区分别嵌入DNA双螺旋的大沟内常结合CAAT盒图18-10 碱性螺旋-环-螺旋2021/7/948（3）碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper, Bzip) 常结合CAAT盒（a）碱性亮氨酸拉链模体结构示意图；（b）bZIP模体与DNA结合的示意图。两个-螺旋上的亮氨酸残基彼此接近，形成了类似拉链的结构，而富含碱性氨基酸残基的区域与DNA骨架上的磷酸基团结合图18-11 碱性亮氨酸拉链模体结构2021/7/949DNA-蛋白质相互作用2021/7/950（四）二聚化是常见的蛋白质-蛋白质相互作用方式2021/7/951五、转录起始复合物的动态构成是

25、转录调控的主要方式（一）启动序列/启动子与RNA聚合酶活性（二）调节蛋白与RNA聚合酶活性启动序列或启动子的核苷酸序列会影响其与RNA聚合酶的亲和力，而亲和力大小则直接影响转录起始的频率真核RNA聚合酶II不能单独识别、结合启动子，而是先由基本转录因子与RNA聚合酶II形成一个功能性的转录前起始复合物。2021/7/952图18-12 转录激活因子参与转录起始复合物的形成PolTAFTFFTAFTAFTFATFBTBP DNATATAEBPTBPTFHTBP辅因子增强子结合蛋白2021/7/953六、转录后调控主要影响真核mRNA的结构与功能（一）mRNA稳定性的影响真核生物基因表达5-端的帽

26、子结构可以增加mRNA的稳定性3-端的poly(A)尾结构防止mRNA降解 RNA无论是在核内进行加工、由胞核运至胞浆，还是在胞浆内停留（至降解），都是通过与蛋白质结合形成核蛋白颗粒(ribonucleoprotein, RNP)进行的。 2021/7/954（二）一些非编码小分子RNA可引起转录后基因沉默与原核基因表达调节一样，某些小分子RNA也可调节真核基因表达。这些RNA都是非编码RNA（noncoding RNA, ncRNA）。如：具有催化活性的RNA（核酶）、细胞核小分子RNA （snRNA）以及核仁小分子RNA（snoRNA）目前人们广泛关注的非编码RNA有miRNA和siRNA

27、。小分子RNA对基因表达的调节十分复杂， 2021/7/955（三）mRNA前体的选择性剪接可以调节真核生物基因表达真核生物基因所转录出的mRNA前体含有交替连接的内含子和外显子。通常状态下，mRNA前体经过剔除内含子序列后成为一个成熟的mRNA，并被翻译成为一条相应的多肽链。但是，参与拼接的外显子可以不按照其在基因组内的线性分布次序拼接，内含子也可以不完全被切除，由此产生了选择性剪接。2021/7/956七、真核基因表达在翻译以及翻译后仍可受到调控（一）对翻译起始因子活性的调节主要通过磷酸化修饰进行蛋白质合成速率的快速变化在很大程度上取决于起始水平，通过磷酸化调节翻译起始因子（eukaryo

28、tic initiation factor, eIF）的活性对起始阶段有重要的控制作用。1翻译起始因子eIF-2的磷酸化抑制翻译起始 2021/7/9572eIF-4E及eIF-4E结合蛋白的磷酸化激活翻译起始 帽结合蛋白eIF-4E与mRNA帽结构的结合是翻译起始的限速步骤，磷酸化修饰及与抑制物蛋白的结合均可调节eIF-4E的活性。磷酸化的eIF-4E与帽结构的结合力是非磷酸化 的eIF-4E的4倍，因而可提高翻译的效率。2021/7/958（二）RNA结合蛋白参与了对翻译起始的调节RNA结合蛋白（RNA binding protein, RBP），是指那些能够与RNA特异序列结合的蛋白质。

29、 基因表达的许多调节环节都有RBP的参与，如前述转录终止、RNA剪接、RNA转运、RNA胞浆内稳定性控制以及翻译起始等。 2021/7/959（三）对翻译产物水平及活性的调节可以快速调控基因表达新合成蛋白质的半衰期长短是决定蛋白质生物学功能的重要影响因素。因此，通过对新生肽链的水解和运输，可以控制蛋白质的浓度在特定的部位或亚细胞器保持在合适的水平。许多蛋白质需要在合成后经过特定的修饰才具有功能活性。通过对蛋白质的可逆的磷酸化、甲基化、酰基化修饰，可以达到调节蛋白质功能的作用，是基因表达的快速调节方式。 2021/7/960是一大家族小分子非编码单链RNA，长度约20-25个碱基，由一段具有发夹

30、环结构，长度为7090个碱基的单链RNA 前体(pre-miRNA)经Dicer酶剪切后形成。这些成熟的miRNA 与其他蛋白质一起组成RNA诱导的沉默复合体（RNA-induced silencing complex, RISC），通过与其靶mRNA 分子的3 端非翻译区域（3 UTR）互补匹配，再以目前尚不清楚的机制抑制该mRNA 分子的翻译。 （四）小分子RNA对基因表达的调节十分复杂1微小RNA (microRNA, miRNA)2021/7/961其长度一般为2025个碱基；在不同生物体中普遍存在；其序列在不同生物中具有一定的保守性；具有明显的表达阶段特异性和组织特异性；miRNA

31、基因以单拷贝、多拷贝或基因簇等多种形式存在于基因组中，大多位于基因间隔区。 miRNA的特点：2021/7/962是细胞内一类双链RNA(double-stranded RNA，dsRNA)在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度(2123个碱基)和特定序列的小片段RNA。双链siRNA参与RISC组成，与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。由siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干涉(RNA interference，RNAi)。2小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)2021/7/963 30bp 双链RNA（d

32、sRNA）水解生成21-23nt siRNA 5335 RISC形成 识别特异序列并使其降解图18-13 RNA干扰作用机制2021/7/964siRNAmiRNA前体内源或外源长双链RNA诱导产生内源发夹环结构的转录产物结构双链分子单链分子功能降解mRNA阻遏其翻译靶mRNA 结合需完全互补不需完全互补生物学效应抑制转座子活性和病毒感染发育过程的调节表18-2 siRNA 和miRNA的差异比较2021/7/965（五）长链非编码RNA在基因表达调控中的作用不容忽视长链非编码RNA（lncRNA）是一类转录本长度超过200个核苷酸的RNA分子，不直接参与基因编码和蛋白质合成，但是可在表观遗传

33、水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达。2021/7/966真核生物细 菌 细菌和真核生物基因转录激活机制主要差别的总结。另外，真核DNA包装成核小体（未显示）。基因调控序列RNA聚合酶转录起始转录因子调控蛋白启动子TATA框RNA聚合酶基因调控序列调控蛋白启动序列转录起始2021/7/9671、试述原核生物和真核生物基因组的特点。4、试比较原核生物和真核生物基因转录激活机制。3、以乳糖操纵子为例介绍原核生物的操纵子调控模式。2、基因转录激活的基本要素有哪些？思考题2021/7/968 增强子（激活蛋白结合部位）激活蛋白转录起始转录起始TATA框转录因子和RNA聚合酶的结合转录因子RNA聚合酶增 强 子2021/7/969 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 顺式作用元件 结构基因-GCGC-CAAT-TATA转录起