2023届甘肃省酒泉市瓜州县高三压轴卷生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．图1为氨基酸和Na+进出肾小管上皮细胞的示意图，图2表示甲、乙两种小分子物质在细胞内外的浓度情况。下列相关叙述中，错误的是（）A．氨基酸以协助扩散方式运入肾小管上皮细胞B．氨基酸运出肾小管上皮细胞受载体蛋白的限制C．图2中的甲从胞内运输至胞外的方式与图1中Na+运出肾小管上皮细胞的方式相同D．若图2中的两种物质分别表示CO2和O2，在浆细胞内外的分布则甲为O2，乙为CO22．大鼠SCN神经元白天胞内氯离子浓度高于胞外，夜晚则相反。SCN神经元主要受递质γ-氨基丁酸（GABA)的调节。GABA与受体结合后会引起氯离子通道开放。由以上信息可以得出的推论是A．SCN神经元兴奋时膜内电位由正变负B．GABA是通过主动运输方式由突触前膜释放的C．夜晚GABA使突触后膜氯离子通道幵放，氯离子外流D．白天GABA提高SCN神经元的兴奋性，夜晚则相反3．人们利用某些微生物制作食品时，需要分析微生物的特点，控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是()ABCD食品果酒果醋腐乳泡菜主要微生物酵母菌醋酸菌毛霉醋酸菌制作装置或操作步骤A．A B．B C．C D．D4．在SARS病毒引起的肺炎病人体内，可能会出现细胞因子风暴，即在机体产生免疫应答消灭病毒的同时，免疫细胞分泌的细胞因子会活化更多免疫细胞，活化后的免疫细胞又会产生更多细胞因子，形成一个正反馈，最终导致机体免疫反应过度，免疫系统开始对宿主的正常细胞发动攻击。为抑制细胞因子风暴，临床上经常会采用注射肾上腺糖皮质激素的方法，请分析这种激素属于（）A．抗细菌药物B．抗病毒药物C．免疫增强剂D．免疫抑制剂5．下列有关植物激素的叙述，正确的是（）A．植物的生命活动都是在植物激素的调节下进行的B．向光性是由于单侧光引起生长素分布不均匀造成的C．顶芽的生长总是优于侧芽是由于顶芽部位的生长素浓度高于侧芽D．生长素能促进果实的发育和成熟6．番茄根尖经过植物组织培养过程可以获得完整的番茄植株，有关此过程的叙述错误的是A．此过程中发生了细胞的脱分化、再分化B．植物激素在此过程中起调节作用C．此过程中若发生杂菌污染则难以获得目的植株D．根尖细胞最终发育为无叶绿体的植株7．某遗传病由非同源染色体上的两对等位基因控制，某家族系谱如下图。已知同时有A、B基因的个体表现正常，I-1基因型为AABb，Ⅱ-2与Ⅱ-3都为纯合子。推断正确的是（）A．I-2的基因型一定为AABbB．Ⅱ-3的基因型为aaBB或aaBbC．若I-1和I-2再生育一个正常孩子的概率为1/2D．Ⅲ-2与基因型为aaBB的女性婚配，子代患病概率为1/28．（10分）经下列实验处理后，向试管中滴加碘液，试管内容物会变成蓝色的是（）A．室温条件下，2mL米汤与1．5mL唾液充分混合反应24hB．室温条件下，2mL牛奶与1．5mL唾液充分混合反应24hC．室温条件下，2mL牛奶与1．5mL汗液充分混合反应24hD．室温条件下，2mL米汤与1．5mL汗液充分混合反应24h二、非选择题9．（10分）三孢布拉式霉菌是一种可产生胡萝卜素的真菌，常用于胡萝卜素的工业化生产。请回答：（1）胡萝卜素是常用的食品色素，广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂，除此以外，它还可以用于治疗______。（写出一点即可）（2）配制三孢布拉式霉菌的培养基时，需将pH调至______（填“酸性”或“中性”或“微碱性”）

（3）将发酵后的三孢布拉式霉菌处理后研磨成粉末，加入______（填“石油醚”或“乙醇”或“丙酮”）萃取选择该萃取剂的依据是：具有较髙的沸点·能够充分溶解胡萝卜素，并且______。（4）将提取的胡萝卜素粗品通过______法进行鉴定，据上图结果可判断出样品2中含有胡萝卜素，判断依据是____________。（5）研究者利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对三孢布拉氏霉菌的蛋白质进行分离，为了消除蛋白质分子原有电荷量对迁移率的影响，可在凝胶中加入______，原理是______，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于蛋白质分子的大小。10．（14分）2018年4月，《ReproductiveBioMedicine》期刊在线发表的一篇文章显示，到2100年，借助辅助生殖技术（即试管婴儿技术）诞生的人数可能将达到全球总入口的1．5%—约4亿人。请回答下列问题：（1）试管婴儿技术的最后一道工序是_____。（2）体外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能与_________的精子结合，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→_____→囊胚→_____→组织器官的分化。（1）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外。还需要提供_______以维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎_____，这为胚胎在母体内存活提供了可能。（4）借助于胚胎分割技术，理论上一次可以获得多个胎儿，胚胎分割操作过程霄要特别注意的问题是将_____均等分裂。（5）人也是生态系统的一员，要维持地球的和谐有序发展，我们必须关注生态工程建设。下列结构示意图最能体现生态工程中系统学和工程学原理的是_____。11．（14分）回答下列（一）（二）小题：（一）回答与固定化酶相关的问题：（1）常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有___________________，果胶酶可以在_______________等微生物体内找到，酶的固定化方法除了包埋法外，还包括______________、交联法、共价偶联法等。（2）科研人员用海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，以硏究固定化酶的相关性质和最佳固定条件。酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量。如图甲、乙为部分研究结果。分析并回答相关问题①由图甲可知，固定化小麦酯酶的最适宜温度是_______________。②由图甲和图乙可知，酶对有机溶剂不敏感，但对______________和______________非常敏感。③用固定化酶技术与微生物降解相比，其作用不需要适宜的（_______）A．温度B．酸碱度C．水分D．营养（二）回答与基因工程和动物克隆有关的问题：（1）可利用______________方法检测某人体内是否有抗体，从而判断某人是否被冠状病毒感染。（2）上海多家生物公司已研发出冠状病毒检测试剂盒。该方法采用RT-PCR技术对病毒抗原进行检测。2019新型冠状病毒是RNA病毒，应该先用______________将RNA逆转录为cDNA。再设计引物进行PCR扩增检测。（3）2020年1月10日，科学家完成病毒基因组测序，经科学家初步研究发现冠状病毒核衣壳N蛋白具有特异抗原性。因此可用____________获取目的基因，利用____________与表达载体构建成重组DNA分子。导入经____________处理的受体细菌，诱导表达后分离纯化核衣壳N蛋白作为抗原。（4）将核衣壳N蛋白注射到小鼠体内，获取经免疫的脾细胞，再与小鼠的_____________融合，经筛选获得杂交瘤细胞系。再经____________培养法筛选岀杂交瘤细胞株。经体内或体外扩増培养，获得单克隆抗体。此抗体优点是___________________________________________________。12．回答下列有关传统发酵技术的问题。（1）家庭酿制葡萄酒时，采摘的葡萄一般只需冲洗，晾干，不需要接种相应菌种，原因是_________。果醋的制作往往在果酒制作基础上进行，请用相关反应式表示：_________。（2）腐乳“闻着臭，吃着香”且易于消化吸收，腐乳易被人体吸收是因为豆腐中的成分发生了如下变化：_______；腐乳的发酵过程中能起到防腐作用的物质有_________三类。毛霉能在豆腐块上生长，是因为豆腐块能为其提供无机盐、水______等四大类基本营养物质。（3）在腌制泡菜过程中，需要测定亚硝酸盐的含量。测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与_________反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成_________色物质。亚硝酸盐在定条件下还会转变为致癌物质_________。若制作的泡菜特别咸而不酸，最可能的原因是_________。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、A【答案解析】

分析图1可知，肾小管上皮细胞从肾小管吸收氨基酸是从低浓度向高浓度运输，是逆浓度梯度运输，因此是主动运输；肾小管上皮细胞从肾小管吸收钠离子是从高浓度向低浓度运输，是顺浓度梯度运输，且需要载体蛋白质协助，是协助扩散；肾小管上皮细胞将氨基酸排出到组织液，是顺浓度梯度运输，需要载体协助，是协助扩散；肾小管上皮细胞将钠离子排出到组织液，是逆浓度梯度运输，需要载体协助、也需要消耗能量，是主动运输。图2：甲物质细胞外浓度高于细胞内，该物质是主动运输排出细胞的；乙物质细胞内的浓度高于细胞外，乙物质可以顺浓度梯度出细胞，是协助扩散，据此答题。【题目详解】A、氨基酸运入肾小管上皮细胞是从低浓度向高浓度运输，是逆浓度梯度运输，因此是主动运输，A错误；B、氨基酸运出肾小管上皮细胞，进入组织液，是顺浓度梯度运输，需要载体协助，是协助扩散，受载体蛋白的限制，B正确；C、图2中的甲物质细胞内的浓度低于细胞外，从胞内运输至胞外，是主动运输，图1中Na+运出肾小管上皮细胞是主动运输，C正确；D、若图2中的两种物质表示CO2和O2，在浆细胞内氧气浓度低，二氧化碳浓度高，则甲为O2，乙为CO2，D正确。故选A。2、D【答案解析】神经元兴奋时，由于Na+内流，使兴奋部位膜内侧阳离子浓度高于膜外侧，表现为内正外负，所以此时膜内电位由负变正，A项错误；由题意可知，GABA属于神经递质，而神经递质是通过胞吐方式由突触前膜释放的，B项错误；夜晚胞内氯离子浓度低于胞外，所以夜晚GABA使突触后膜氯离子通道幵放，氯离子会顺浓度梯度内流，故C项错误；白天胞内氯离子浓度高于胞外，所以白天GABA使突触后膜氯离子通道幵放，氯离子会顺浓度梯度外流，使外正内负的静息电位的电位差绝对值降低，从而提高SCN神经元的兴奋性。由C项分析可知，夜晚GABA使突触后膜氯离子内流，增大了外正内负的静息电位的电位差绝对值，从而降低了SCN神经元的兴奋性，D项正确。【答案点睛】要解答本题，首先要掌握神经细胞膜电位的变化及兴奋产生的相关知识：神经纤维未受到刺激时，K+外流，细胞膜内外的电荷分布情况是外正内负，形成静息电位；当某一部位受刺激时，Na+内流，其膜电位变为外负内正，形成动作电位。然后认真审题：SCN神经元白天胞内氯离子浓度高于胞外，夜晚则相反。神经递质与受体结合后会引起氯离子通道开放，使氯离子顺浓度梯度进出细胞。最后根据各选项描述结合基础知识做出判断。3、B【答案解析】该装置中液体太满，发酵液会从导管溢出发酵瓶中不需要插入温度计，A错误；醋酸菌是好氧菌，通入氧气有利于醋酸菌发酵，B正确；腐乳制作过程先让毛霉生长，后加盐腌制，否则盐会抑制毛霉生长，C错误；制作泡菜的原理是乳酸菌发酵，而不是醋酸菌，D错误。【答案点睛】解答本题的关键是了解在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵，这样才可以提高产量。4、D【答案解析】

根据题干信息分析，细胞因子风暴是由于SARS病毒侵入人体后引起的，人体消灭病毒的同时分泌了很多细胞因子，活化了更多的免疫细胞，进而产生了更多的淋巴因子，导致机体免疫功能过强并攻击正常的细胞。【题目详解】根据以上分析已知，细胞因子风暴是SARS病毒侵入人体后引起的免疫功能过强的现象，免疫系统会对宿主的正常细胞发动攻击，而注射肾上腺糖皮质激素的方法能够抑制细胞因子风暴，即肾上腺糖皮质激素可以降低免疫系统的功能，属于免疫抑制剂。故选D。5、B【答案解析】

生长素能促进生长、促进果实发育、促进插枝生根、防止落花落果；乙烯能增强细胞膜的透性和酶的活性，加强果实细胞的呼吸作用，促进果实中有机物的转化，从而促进果实的成熟，还能刺激叶子脱落、抑制茎的伸长。顶端优势是指植物顶芽优先生长，侧芽受抑制的现象，因为顶芽产生生长素向下运输，大量积累在侧芽，使侧芽生长受抑制，体现了生长素作用的两重性。【题目详解】A、激素调节在植物生长发育和对环境的适应过程中发挥着重要的作用，但是激素调节只是植物生命活动调节的一部分，A错误；B、向光性是由于单侧光引起生长素在尖端发生了横向运输，使背光侧生长素分布多于向光侧，背光侧的生长速度大于向光侧，从而表现了向光性，B正确；C、顶芽的生长总是优于侧芽是由于顶芽产生的生长素不断向侧芽运输，生长素积累在侧芽部位，抑制了侧芽的生长，C错误；D、生长素能促进果实发育，乙烯能促进果实的成熟，D错误。故选B。6、D【答案解析】

植物组织培养可以分为四个阶段：（1）建立无菌体系，即外植体及培养基的消毒、接种，经脱分化形成愈伤组织；（2）进行增殖，不断分化产生新的植株，或直接产生不定芽及胚状体，也可以根据需要反复进行继代培养，以达到大量繁殖的目的；（3）将植株转移进行生根培养，可以转入生根培养基，也可以直接切取进行扦插生根；（4）试管苗过渡，即试管苗出瓶后进行一定时间对外界环境的适应过程。【题目详解】A、植物组织培养过程中涉及到脱分化形成愈伤组织和再分化形成根或芽的过程，A正确；B、植物组织培养时所用培养基中除含有各种营养物质外，还要加入起调节作用的植物激素，B正确；C、植物组织培养过程中应进行无菌操作，防止培养基和培养材料滋生杂菌，若发生杂菌污染则难以获得目的植株，C正确；D、根尖细胞中虽然没有叶绿体，但是细胞内含有叶绿体基因，所以经植物组织培养形成的植株中有叶绿体，D错误。故选D。7、D【答案解析】

由题干信息可推知，该遗传病为常染色体隐性遗传病，由于I-1基因型为AABb，Ⅱ-2与Ⅱ-3都为纯合子，所以Ⅱ-2的基因为AAbb，又由于第Ⅲ代中全部正常，可推知Ⅱ-3的基因型为aaBB，进而可逆推知Ⅰ-2的基因型为A_Bb，Ⅰ-3和Ⅰ-4的基因型为：AaB_。【题目详解】A、Ⅱ-2患病且是纯合子，一定能从I-1（AABb）获得A基因，所以其基因型为AAbb，其母亲Ⅰ-2不患病，为A_B_，且一定有b传给下一代，因此基因型是AABb或AaBb，A错误；B、II-3也患病且是纯合子，与II-2的婚配后代都正常，所以基因型一定为aaBB，B错误；C、I-1（AABb）与Ⅰ-2（A_Bb）的后代为正常（A_B_）的概率是3/4，C错误；D、由Ⅱ-2(AAbb)与II-3(aaBB)推出III-2基因型一定为AaBb，与aaBB婚配后代患病概率是1/2，D正确。故选D。【答案点睛】提取题中有效信息，正确分析和推断题图中各代的基因型及相关概率，合理利用基因分离定律解自由组合定律进行求解。8、D【答案解析】

淀粉遇碘变蓝色，麦芽糖遇碘不会变蓝；鸡蛋清的主要营养物质是蛋白质，唾液中的唾液淀粉酶对蛋白质和脂肪没有消化作用。【题目详解】A、唾液中含有唾液淀粉酶，能够将淀粉分解为麦芽糖，因此米汤与一定量的唾液充分混合后反应24h，滴加碘液后不变蓝色，A错误；B、牛奶的主要成分是蛋白质，不会被唾液淀粉酶分解，遇淀粉也不会变蓝，B错误；C、牛奶的主要成分是蛋白质，与汗液充分混合后，遇淀粉不会变蓝，C错误；D、米汤中含有淀粉，汗液对淀粉没有作用，因此滴加碘液会变蓝色，D正确。故选D。二、非选择题9、因缺乏维生素A而引起的各种疾病，如：夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等酸性石油醚不与水混溶纸层析样品2具有与标准样对应的色带1SDSSDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS混合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量【答案解析】

1.萝卜素的提取：

（1）胡萝卜素的性质：胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。

（2）胡萝卜素的提取来源：提取天然胡萝卜素的方法主要有：一是从植物中提取；二是从大面积养殖的岩藻中荻得；三是利用微生物的发酵生产。

（3）萃取剂：最适宜作胡萝卜素萃取剂的是石油醚。

（4）实验流程：胡萝卜→粉碎→干燥→萃取（石油醚）→过滤_→浓缩→胡萝卜素→鉴定（纸层析法）。

2.凝胶电泳法：

（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。【题目详解】（1）胡萝卜素是常用的食品色素，广泛地用作食品、饮料、饲料的添加剂，除此以外，它还可以用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，如：夜盲症、幼儿生长发育不良、干皮症等；

（2）在三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中，为其提供氮源的成分是玉米蛋白水解物和豆粕。在制备该培养基的过程中，灭菌之前应将培养基的pH调至酸性；

（3）萃取胡萝卜素选用石油醚，其原因是石油醚具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶；

（4）提取的胡萝卜素粗品通过纸层析法进行鉴定，据图示结果可判断出样品2中含有胡萝卜素，判断依据是样品2具有与标准样对应的色带1；

（5）利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对三孢布拉氏霉菌的蛋白质进行分离，为了消除蛋白质分子原有电荷量对迁移率的影响，可在凝胶中加入SDS，原理是SDS能与各种蛋白质形成蛋白质-SDS混合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电泳迁移率完全取决于蛋白质分子的大小。【答案点睛】本题考查了胡萝卜素的提取的有关知识，要求考生识记胡萝卜素的特点和理化性质，识记从生物材料中提取某些特定成分的原理、方法及注意事项，能结合所学的知识准确答题。10、胚胎移植获能桑椹胚原肠胚CO2基本上不发生免疫排斥反应内细胞团D【答案解析】

1、试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。2、胚胎移植的生理基础：（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（1）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。1、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。（2）桑椹胚：12个细胞左右的胚胎[之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞。（1）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔[注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化]。

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层。下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔[细胞分化在胚胎期达到最大限度。【题目详解】（1）试管婴儿技术的最后一道工序是胚胎移植。

（2）体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。采集的卵子，需将其培养到减数第二次分裂中期才具备与精子受精的能力，才能与获能的精子在体外受精，形成受精卵。受精卵发育成胎儿的大致过程是受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚→组织器官的分化。（1）动物细胞培养时，提供CO2的作用是维持培养液的正常pH。母体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在母体内存活提供了可能。

（4）胚胎分割操作过程需要将内细胞团均等分裂，否则会影响分割后胚胎的进一步发育。（5）系统学和工程学原理包括系统的结构决定功能原理和系统整体性原理，其中系统的结构决定功能原理的含义是：生态工程需要考虑系统内部不同组分之间的结构，通过改变和优化结构，达到改变系统功能的目的，据此分析图示可知，D结构示意图最能体现生态工程中系统学和工程学原理。故选D。【答案点睛】本题考查胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生识记试管婴儿技术的概念；识记早期胚胎发育的具体过程以及胚胎移植的基本程序；识记生态工程的原理及实例，能结合所学的知识准确答题。11、酶可以多次利用，使酶和产物实现分离黑曲霉和苹果青霉吸附法45℃高温强酸碱D抗原-抗体杂交逆转录酶化学方法合成限制性核酸内切酶和DNA连接酶氯化钙骨髓瘤细胞克隆（细胞克隆）特异性强，灵敏度高【答案解析】

固定化酶是指用物理学或化学的方法将酶与固相载体结合在一起形成的仍具有酶活性的酶复合物。在催化反应中，它以固相状态作用于底物，反应完成后，容易与水溶性反应物和产物分离，可被反复使用。基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。工具：限制酶、DNA连接酶和运载体。【题目详解】（一）（1）固定化酶的优点：酶可以重复利用，增大利用率；可以实现酶和产物分离，产物纯净率提高；黑曲霉和苹果青霉可以合成果胶酶；酶的固定化方法：包埋法、吸附法、交联法、共价偶联法等。（2）①由图甲可知，在45℃时，固定化酶的活力最高，故固定化小麦酯酶的最适宜温度是45℃；②由图甲和图乙可知，酶在高温及强酸、强碱条件下酶活力会降低甚至失活，故酶对上述条件非常敏感；③酶多数是蛋白质，不像细胞类生物需要营养物质维持生命活动。（二）（1）若检测某人体内是否有抗体，以此判断某人是否被病毒感染，在分子水平上可用抗原—抗体杂交方法检测。（2）PCR对象为DNA，而2019新型冠状病毒是RNA病毒，因此提取病毒RNA后要先用逆转录酶进行逆转录。（3）因为抗原蛋白的基因序列已知，因此获取目的基因的方法为化学方法合成或PCR扩增，并将目的基因与经限制酶酶切的载体用DNA连接酶连接，因此构建重组质粒除DNA连接酶外，还需要限制性核酸内切酶；而受体细菌需要用氯化钙处理，以增加细菌细胞壁的通透性。（4）经免疫的脾细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合后获得的是杂交瘤细胞系；要分离出既能无限增殖又能产生特定抗体的