基因工程和细胞工程

明师教育-明师教育-明师教育-明师教育-时间：45分钟 分值：100分一、选择题(每题5分，共50分)再重组表达。下列相关叙述正确的是(双选)()BPCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C．PCRDNA聚合酶解析PCRPCR技术扩增目的基因的PCR反应在高温条件下答 药物，首先要做的是()ADNABDNACP1氨基酸序列设计多条模拟肽解析由题中信息“Pl的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物的脱氧核苷酸序列(基因)C。答 ()B答B答 是()Dα－萘乙酸等生长素类调节剂解析本题主要考查植物组织培养的相关知识。在愈伤组织中，因植物细胞αB项错误。答 示。下列叙述错误的是()答 答 AT解析①是从已免疫的小鼠脾脏D项正确。答 芥酸会降低菜籽的品质。油菜有两对独立遗传的等位基因(Hh，G和据图分析，下列叙述错误的是据图分析，下列叙述错误的是)D．F1减数分裂时，HG基因所在染色体发生联会 类激素来诱导细胞脱分化，故A项正确；③过程是利用植物花药离体培养获得④由其获得的植株为单倍体植株，故B项正确；图中的三种途径中，利用花粉培H、h和G、g分别是两对独立遗传的等位基因，故两者是位于非同源染色体上的，在减数分裂时，HGD答案B，而列操作正确的是()mRNADNA，再扩增基因BBBCDNABDB答 可以利用mRNA经逆转录合成目的基因后再进一步扩增，A项正；因为开蓝色花的矮牵牛基因B的序列是已知的，所以该目的基因宜采用化学方获取，B项错目的基因必须与运载体结合后才能导入受体细胞，答 单克隆抗体制备的相关叙述错误的是(X抗原注入小鼠体内，获XB淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培养④筛X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从小鼠腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子促使细胞融合解析B答 () 答 二、非选择题(50分(TMV)TMVTMV具有抗感染性。烟草是TMV的烟草，主要流程如下图所示。科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目 基因，重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法

答 (1)逆转卡那霉素抗 农杆菌转化(1)由图可知，①表示逆转录(或反转录)。(2)由图示⑤培养基中含有卡答 (1)逆转卡那霉素抗 农杆菌转化(4)抗原—抗体杂交过程①所需的酶 DNAPCR扩增，得到两亲1～4PCR扩增的结果。据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有 对杂种植株进 接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株解析 本题考查植物细胞工程染色体变异的实验鉴定以及高抗性的杂种植株的筛选等相关知识。(1)去除细胞壁获得原生质体需要用纤维素酶和果胶酶处理(2)叶肉细胞含有叶绿体因此通过G诱导融合的杂种细胞应含有叶绿体以此作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体失去了细胞壁的保护作用，因此原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，使原生质体处于等渗溶液中，以维持原生质体正常形态原生质体经过细胞壁再生进而分裂和脱分化形成愈伤组织。(4)要判断染色体变异的类型，应剪取再生植株、花椰菜和黑芥植株的色体的形态和数目。(5)1、24既有1、24一定为杂种植株。(6) 保持原生质体完整 细胞双亲(或花椰菜和黑芥 解 漂1、2、13(18HSV－1HSV－1。在制备抗HSV－1－－l蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗 体内产生 反应，再从小鼠 中获取B淋巴细胞。将该B 中使其增殖，再 中提取、纯化获得通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV－1蛋白，其原 解析(1)制备单克隆抗体时，需要先给小鼠注射特定抗原(HSV－1蛋白)，HSV－1BB淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经过筛选和克隆化培养，最终获答案(1)HSV－1蛋白体液免疫(其他合理答案也可)脾脏(其他合理答案也可)骨髓瘤无限增殖且产生专一抗体(其他合理答案也可)腹腔纯度高特异性强(其他合理答案也可MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为(1)(1) 若用限制酶SmaⅠ完全切割图①中DNA片段，产生的末端是 若图①中虚线方框内的碱基对被T­A碱基对替换，那么基因D就突变为 种不同长度的DNA片段。若将图②中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重 分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中的目的基因D不能正确表达，其最可能的原 答 (1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核(2) 537bp、790bp、661 (1)在一条脱氧核苷酸链上相邻两个脱氧核苷酸之间通过3,5­磷酸二DNA片段会形成三个小的DNA片段，按切割位点计算分别是：534bp＋3bp＝537bp；796bp－3bp－3bp＝790bp；658bp＋3bp＝661bp。(3)杂合子基因型为Dd。用SmaⅠ切割基因D，会形成537bp、790bp、661bp三种类型。题图①中虚线方框内C—G被T—A替换，失去了一个酶切位点，则会被切割成534bp＋796bp－3bp＝1327bp，和658bp＋3bp＝661bp。所以一共会得到4种类型的片段(4)如果要获得完整的目的基因可用BamHⅠ和MboⅠ切割但是MboⅠ会破坏抗生素A抗性基因和抗生素B抗性基因，质粒会失去标记基因，无法筛