2024年大学试题(医学)-医学分子生物学笔试参考题库含答案_第1页
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“人人文库”水印下载源文件后可一键去除,请放心下载!(图片大小可任意调节)2024年大学试题(医学)-医学分子生物学笔试参考题库含答案“人人文库”水印下载源文件后可一键去除,请放心下载!第1卷一.参考题库(共75题)1.简述核酶的定义、主要分类和应用方式。2.血糖指血中存在的糖的总称。3.()主要修复可影响碱基配对而扭曲双螺旋结构的DNA损伤。4.PCR介导的定点诱变法。5.TaqDNA聚合酶特性()。A、5′→3′聚合酶活性B、5′→3′外切酶活性C、转录酶活性D、较弱的非模板依赖性E、缺乏3′→5′外切酶活性6.简述蛋白质组学研究成果的应用前景和展望。7.简述σ因子在原核基因表达调控中的意义。8.荧光差异显示双向电泳的优点是什么?9.简述蛋白质组表达模式研究的主要技术及其中样品分离技术的原理。10.基因治疗中,基因转移的基本技术可以采用非病毒载体来介导。11.试述PCR基本技术过程中引物设计的原则。12.实时荧光定量RT-PCR是()。A、可以实现初始模板拷贝数的定量B、SYBRGreenⅠ特异性强C、原理利用了临界点循环D、利用PCR最终产物量高低进行定量E、特异的分子信标探针可以提高定量的准确性13.结构基因是指基因中编码蛋白质的DNA序列。14.镰刀状红细胞贫血与β珠蛋白链有关的突变是()。A、插入B、断裂C、缺失D、交联E、点突变15.Southern印迹杂交是()。A、分析RNA的技术B、用于DNA的定性或定量研究C、只能用于基因突变分析D、利用了DNA聚合酶ⅠE、不需要电泳分离16.原核生物基因组DNA分子中具有多种功能的识别区域,如()、()、转录启动区和()。17.胸腺嘧啶以烯醇式形式存在时,可以与之配对的是()。A、腺嘌呤B、胞嘧啶C、鸟嘌呤D、次黄嘌呤E、黄嘌呤18.细菌基因组是:()。A、线性双链DNAB、环状单链DNAC、环状双链DNAD、线性单链RNAE、线性双链RNA19.DNA双脱氧末端终止法中,DNA链延伸-终止反应的关键是()。A、DNA模板变成单链B、加入某一种带有标记的dNTPC、加入一对引物D、有ddNTP底物的存在E、加入EDTA终止酶活性20.外源基因表达的基本流程是()。 ①重组表达载体导入宿主细胞; ②目的基因的获得; ③重组表达载体的筛选与认; ④目的基因与载体的重组; ⑤目的基因的表达。A、②④①③⑤B、①②④③⑤C、②④③①⑤D、④②①③⑤21.作为营养不良的指标的蛋白质是(),血浆中含量最多的蛋白质是()。22.有关DNA序列自动分析技术描述正确的是()。A、电泳分离步骤可省略B、四个延伸终止反应必须独立进行C、不需要DNA聚合酶D、荧光染料标记在引物E、ddNTP分别采用了四种不同荧光标记23.有关腺病毒治疗载体的描述正确的是()。A、感染的靶细胞可以是分裂或非分裂细胞B、安全高效C、不能整合D、外源基因可以持续稳定表达E、外源基因容量很小24.RT-PCR是一种以()为模板的体外扩增()的技术。25.下列哪一条在分子印迹技术中不适用()。A、DNA向NC膜转移B、蛋白质向PVDF膜转移C、DNA向尼龙膜转移D、RNA向NC膜转移E、蛋白质向一号滤纸转移26.所有的逆转录病毒都含有三个基本的结构基因:()、()和()。27.()是逆转录病毒整合至细胞基因组过程的关键结构,由()、()、()三部分组成。28.质谱技术是将样品分子离子化后,根据什么的差异来确定样品分子量()。A、质量B、电荷C、序列长短D、吸光度E、质量、电荷比值29.超滤是根据蛋白质的溶解度的差异进行分离的。30.甲氨蝶岭可用于治疗白血病的原因是它可以直接()。A、抑制二氢叶酸还原酶B、抑制DNA的合成酶系的活性C、抑制蛋白质的分解低谢D、阻断蛋白质的合成代谢E、破坏DNA分子的结构31.DNA的半保留复制需要()。A、核心酶和单链DNA结合蛋白B、模板DNA和四种dNTPsC、引物和RNA聚合酶D、DNA聚合酶Ⅱ32.简述酶促切割错配检测基因突变的原理及其优、缺点。33.有关核酶的哪种表述是不正确的()。A、具有引导序列B、具有锤头状结构C、切断目的mRNA而自身没有消耗D、核酶两端的引导序列与靶分子序列互补E、使mRNA不能转录34.有关基因诊断的特点,不正确的是()。A、诊断早期性B、有很高的特异性C、诊断灵敏度高D、适用性强,诊断范围广E、技术单一,对操作人员要求低35.以下是中度重复序列的是()。A、rRNA编码基因B、tRNA编码基因C、免疫球蛋白基因D、组蛋白基因E、Alu家族36.DNA聚合酶Ⅰ和Klenow片段共同的功能是()。A、5ˊ→3ˊ聚合酶活性B、3ˊ→5ˊ核酸外切酶活性C、5ˊ→3ˊ核酸外切酶活性D、去除DNA5ˊ端的磷酸根E、去除RNA5ˊ端的磷酸根37.核酸主要包括DNA和RNA两大类物质。38.真核mRNA选择性剪接的方式有哪些?举例说明其基本生物学意义是什么?39.简述基因诊断在传染病检测中的应用。40.尿素是一种蛋白质变性剂,其主要作用是(),其作用机制为()。41.逆病毒是DNA病毒,两条DNA链5ˊ端经氢键连接。42.常用来分离血浆蛋白质的方法有()、()、()。43.测定蛋白质分子质量的方法有()、()和()。44.对于镰状细胞贫血病的突变机理可以采用的基因诊断方法不可以是()。A、设计等位基因特异性引物进行PCRB、测序C、PCR与限制性核酸内切酶技术结合D、核酸分子杂交E、在突变位点两侧设计引物再电泳分析PCR产物长度变化45.以下哪项不符合基因诊断的特点()。A、高度灵敏性B、结果稳定性C、早期诊断性D、表型依赖性E、高度特异性46.应用2-DE图像分析软件包进行的操作包括()。A、图像采集B、斑点检测C、背景增强D、物质定性E、图像间比较47.按肿瘤标志物的化学性质可将其分成哪几类?48.DNA复制生成两个新的DNA分子,这两个DNA分子()。A、均由两条新合成的DNA链组成B、一个由两条新合成的DNA链组成,一个由两条母本DNA链组成C、均由一条母本DNA链加上一条新合成的DNA链组成D、均由两条母本DNA链组成49.下列有关嘧啶二聚体哪项不正确()。A、由紫外线照射引起B、由相邻的两个核苷酸组成C、不是一种点突变D、若不能修复,易引起着色性干皮病E、这种突变不能修复50.反向斑点杂交是先固定探针于膜上。51.第一分离到的抑癌基因是()。A、APC基因B、BRCA基因C、DCC基因D、p53基因E、Rb基因52.简述Southern印迹杂交的原理和方法。53.论述小分子RNA在基因表达调控中的意义。54.随机引物标记探针时,反应时可用DNA聚合酶I。55.常用核酸分子杂交技术不包括()。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹杂交D、菌落原位杂交E、反向斑点杂交56.关于DNA损伤后切除修复说法中正确的是()。A、修复机制中以切除修复最为重要B、切除修复包括有重组修复及SOS修复C、切除修复包括糖基化酶起始作用的修复D、切除修复中有以UvrA、UvrB、UvrC、UvrD参与进行的修复E、对DNA损伤部位进行切除,随后利用未损伤的DNA为模板修补缺口57.下列哪些不是与DNA修复过程缺陷有关的疾病()。A、卟啉症B、着色性干皮病C、痛风症D、苯酮酸尿症E、黄疸58.细胞在正常生理活动中产生的O2-、H2O2等自由基家族会造成DNA损伤。59.简述蛋白质分离纯化的一般程序。60.蛋白质芯片主要包括()。A、生物化学型芯片B、基因芯片C、生物反应器芯片D、化学型芯片E、药物芯片61.逆转录病毒前病毒LTR由U3,R,U5三部分组成。62.碱基切除修复主要针对DNA单链断裂和小的碱基改变,活性氧造成的氧化性DNA损伤也由碱基切除修复通路修复。63.抑制性消减杂交技术64.简述生物芯片的技术过程?65.治疗基因的受控表达包括()。A、控制治疗基因在该表达的时候表达B、延长遗传病治疗中的基因表达时间C、控制治疗基因只在靶细胞中表达D、控制基因表达处在适当的水平E、防止治疗基因表达不受外界控制66.蛋白质降解主要通过两条途径:一是(),二是()。67.核酶是通过转录一个新的基因来达到基因治疗的目的。68.在聚丙烯酰胺凝胶电泳的制胶过程中,过硫酸铵的作用是(),灌胶后表面加水的作用是()和()。69.人工合成的碱基类似物如5-氟尿嘧啶、5-溴尿嘧啶、2-氨基腺嘌呤等进入细胞后能替代正常碱基掺入到DNA链中而干扰DNA复制合成。70.有关基因治疗描述错误的是()。A、主要针对生殖细胞B、可实现缺陷基因序列的矫正C、可实现有害基因的表达抑制D、可用于传染病的治疗E、可用于遗传病的基因治疗71.用缺口平移法标记DNA探针时,常用()。A、限制性核酸内切酶B、DNA聚合酶ⅠC、DNA聚合酶Ⅰ大片段D、DNA连接酶E、碱性磷酸酶72.外源基因与载体的连接方法有黏性末端连接、()、()、()。73.转染是指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。74.具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称()。A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针75.Klenow片段(Klenowfragment)具有5ˊ→3ˊ聚合酶活性及()外切酶活性,失去了()外切酶活性。第2卷一.参考题库(共75题)1.PCR产物的产量只与初始模板数有关。2.下列哪些是DNA损伤修复机制()。A、切除修复B、SOS修复C、光修复D、重组修复E、嘧啶二聚体修复3.使用了限制性核酸内切酶的技术是()。A、寡核苷酸探针杂交B、RFLPC、RT-PCRD、DNA测序E、Westernblot4.关于增强子的描述错误的是()。A、没有方向性B、可以在内含子中C、有基因特异性D、调控邻近基因的转录E、有的含有负调控序列5.染色质和染色体是()。A、同一物质在细胞中的不同时期的两种不同的存在形式B、不同物质在细胞中的不同时期的两种不同的存在形式C、同一物质在细胞的同一时期的不同表现D、不同物质在细胞的同一时期的不同表现E、染色质是染色体的前体物质6.简述E.coli核苷酸切除修复机制。7.以下哪种检测技术不属于DNA诊断()。A、RFLP分析B、PCRC、Southern杂交D、限制性内切酶酶谱分析E、Northern杂交8.何谓反义技术?试述其主要分类及其原理。9.电离辐射可致DNA分子发生碱基修饰改变、脱氧核糖分解、DNA链断裂以及分子交联。10.人类发生镰刀型红细胞贫血症的根本原因在于基因突变,其突变的方式是基因内()。A、碱基发生改变(替换)B、增添或缺失某个碱基对C、增添一小段DNAD、缺失一小段DNAE、单核苷酸多态性变化11.蛋白质是由()高分子含氮化合物。12.治疗基因的受控表达其策略包括:基因内部调节机制、()、利用病灶微环境使治疗基因特异性表达及()等。13.一般28S(或23S)RNA的荧光强度约为18S(或16S)RNA的几倍,否则提示有RNA的降解()。A、2B、3C、4D、5E、614.DNA损伤修复机制中,主要针对DNA单链断裂和小的碱基改变而进行修复的是()。A、错配修复B、直接修复C、核苷酸切除修复D、碱基切除修复E、重组修复15.列举几种真核基因的顺式作用元件。16.SDS中,凝胶的单体为(),()是交联剂。蛋白质结合SDS后均带()电荷,肽链越长迁移速度越()。17.去垢剂是一类既有亲水部分又有疏水部分的分子。18.无论在原核生物还是真核生物中,DNA复制均发生在()。A、细胞分裂之前B、细胞核内C、在组蛋白周围D、细胞质内19.真核生物的结构基因由编码的外显子和非编码的内含子组成,是()。A、复等位基因B、多基因C、割(断)裂基因D、编码序列20.简述反义RNA、RNA干扰及核酶三种基因干预方法的差异。21.以下哪项是真核生物基因组结构特点()。A、只有一个复制起点B、有大量重复序列C、大部分是编码序列D、有操纵子结构E、转录的RNA为多顺反子22.E.coli核苷酸切除修复过程中,UvrD的作用是()。A、识别损伤部位B、解旋双链C、3ˊ末端内切D、5ˊ末端内切E、DNA合成23.有关逆转录病毒载体描述正确的是()。A、很安全B、随机整合C、治疗基因表达易丢失D、辅助细胞株是可有可无的E、辅助病毒颗粒最好具有重复感染能力24.常用的核酸探针包括()、()和()。25.()是指DNA链上一个或一段核苷酸的消失。26.以下有关转录的叙述,不正确的是()。A、DNA双链中指导RNA合成的链是模板链B、DNA双链中一条链可转录,互补的另一条链的基因序列不转录C、能转录出RNA的DNA序列被称为结构基因D、染色体DNA双链中仅一条链可转录27.三梭酸循环有何重要的生理意义?28.与一般的反义RNA相比,核酶具有较稳定的空间结构,不易受到()的攻击。更重要的是,核酶在切断mRNA后,可从杂交链上解脱下来,()和切割其它的mRNA分子。29.Ⅲ型限制性核酸内切酶切割位点的序列是固定的。30.二维凝胶电泳中由哪些电泳组成()。A、琼脂糖凝胶电泳B、免疫电泳C、等电聚焦凝胶电泳D、脉冲电场凝胶电泳E、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳31.基因诊断可作为肿瘤的第一诊断手段。32.能编码酶并能使无毒性的药物前体转化为(),诱导靶细胞产生自杀效应的基因是()。33.体内氨主要在()合成()而解毒。34.有关核酸分子杂交描述错误的是()。A、可以在组织切片上直接进行B、主要用于核酸的检测C、也可用于蛋白质的检测D、斑点杂交无需电泳分离E、可用于核酸拷贝数的检测35.电子克隆的基本步骤。36.下列哪项不是水溶性维生素()。A、维生素BB、维生素GC、维生素PPD、维生素CE、维生素D37.PCR引物设计的原则主要有哪些?38.海洋性贫血是常见的单基因病。39.下列哪种储存方式可以长时间保存蛋白质()。A、溶液状态常温保存B、溶液状态4℃保存C、硫酸铵溶液中以沉淀方式4℃保存D、硫酸铵沉淀蛋白,离心后在液氮中保存E、冻干的粉末形式保存40.甲基甲烷碘酸、二乙基亚硝胺属单功能基烷化剂,只能使一个位点烷基化。41.标记的参与杂交反应的核酸分子,称()。A、变性B、复性C、复杂性D、杂交E、探针42.试述基因突变可能引起的hnRNA剪接变化情况。43.甲基甲烷碘酸属单功能基烷化剂,只能使一个位点烷基化。44.基于质谱的蛋白质相互作用研究方法主要有()。A、串联亲和纯化耦联质谱技术B、噬菌体显示技术C、亲和层析耦联质谱技术D、生物传感器耦联质谱技术E、免疫共沉淀耦联质谱技术45.碱基切除修复通路主要修复可影响碱基配对而扭曲双螺旋结构的DNA损伤。46.哪些类型的基因突变易导致肿瘤的发生?47.T4DNA连接酶可以()。A、使双链DNA3ˊ-OH与另一双链DNA的5ˊ端磷酸根形成3ˊ→5ˊ磷酸二酯键,B、连接相同黏性末端的DNAC、连接平末端的DNAD、补齐双链DNA的3ˊ末端E、形成3ˊ或5ˊ粘性末端48.真核细胞转染的DEAE-葡聚糖(DEAE-Dextran)法基本原理。49.多色荧光原位杂交可同时检测同一细胞核中的多种DNA序列。50.已知目的的cDNA序列,拟采用基因工程技术使其在哺乳细胞中表达,请写出设计方案。51.转染真核细胞的主要方法有()。A、磷酸钙共沉淀法B、电穿孔法C、DEAE-葡聚糖法D、脂质体介导E、显微注射52.简述真核基因转录因子分类及功能。53.信号转导通路对靶蛋白调节最重要的方式是()。A、通过G蛋白调节B、通过可逆性磷酸化调节C、通过配体调节D、通过受体数量调节54.以下哪项属于启动子元件()。A、内含子B、外显子C、TATA盒D、终止子E、CAAT盒55.反向斑点杂交先固定于()杂交膜上。56.蛋白质组研究并不是对传统的蛋白质研究的简单重复,而是一种升华。57.关于RNA复制的叙述,不正确的是()。A、是RNA病毒在宿主细胞内扩散的一种方式B、原料为dNTPsC、是以RNA为模板合成RNA的过程D、需要依赖RNA的RNA聚合酶58.识别碱基改变的感应因子是()。A、ATMB、ATRC、Chk1D、Chk2E、Cdc25A59.SD序列与30S小亚基中的16SrRNA3ˊ端一部分序列互补。60.TaqDNA聚合酶具有较高的热稳定性。61.酵母双杂交技术是利用其什么特点建立起来的?在科学研究中有什么作用?62.核苷酸切除修复和碱基切除修复通路均为无错修复通路。63.双链DNA分子中,碱基组成为A=T,G=Co。64.可以按蛋白质的分子质量,电荷及构象分离蛋白质的方法是()。65.Northern杂交是用来检测RNA的杂交种类。66.以下属于研究基因工程产品蛋白质间相互作用的技术的是()。A、二维凝胶电泳B、图像分析技术C、质谱技术D、蛋白质芯片技术E、噬菌体显示技术67.真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程称为()。A、转化B、转染C、感染D、侵入E、诱导68.聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨力之所以很高,是因为它具有()、()、()三种效应。69.基因转移途径可分为经活体和活体内两类。70.RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开,然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上,同一放射DNA探针杂交的技术称()。71.可以用于血友病B的基因治疗策略是()。A、基因干预B、RNA干扰C、自杀基因治疗D、基因添加E、基因免疫治疗72.作为克隆载体的质粒应具备下列特点()。A、分子量相对较小,能在细菌内稳定存在,有较高的拷贝数B、具有一个以上的遗传标志,便于对宿主细胞进行选择C、具有多个限制性内切酶的单一切点,便于外源基因的插入D、能容纳40~50kb的外源DNA片段E、含有复制起始点,能在细菌体内独立地进行自我复制73.基因免疫治疗可增强肿瘤微环境中的抗癌免疫反应。74.质粒能在宿主细胞内自主复制。75.启动子总是存在于未被转录序列中,终止子总是存在于被转录序列中。第1卷参考答案一.参考题库1.参考答案:核酶是具有生物催化活性的RNA,能按碱基互补原理识别特定核苷酸序列并特异地剪切底物RNA分子。根据其分子大小可分为大分子核酶和小分子核酶两种,前者包括I型内含子(groupIintron)、II型内含子(groupIIintron)和核糖核酸酶P的RNA亚基,均由数百到数千核苷酸组成;小分子核酶按结构分为锤头(hammerhead)型、发夹(hairpin)型等,大小多在35-155个核苷酸之间,应用广泛。根据核酶结构特点和靶RNA的特异性序列特征,设计并合成针对性核酶基因,构建表达载体,导入细胞内,基因表达后通过特异序列识别降解靶RNA。2.参考答案:错误3.参考答案:核苷酸切除修复4.参考答案: PCR介导的定点诱变法是一种高效定点诱变方法。其基本原理是:除了合成所需的5ˊ端及3ˊ端常规引物(a,d)之外,再合成一对带有诱变位点的互补寡核苷酸引物(b,c),具体步骤如图所示。分别利用诱变引物b和5ˊ端引物a,以及诱变引物c和3ˊ端引物d,扩增出两个诱变的DNA片段(a/b片段和c/d片段)。经去除扩增反应的剩余引物后,将扩增出两个诱变的DNA片段(a/b片段和c/d片段)等量混合、变性、退火,用KlenowDNA聚合酶补齐。再利用5ˊ端及3ˊ端引物(a,d)进行PCR扩增反应,从而得到所需的含诱变位点的DNA片段。 5.参考答案:A,B,C,D,E6.参考答案: (1)在基础研究方面:近几年来蛋白质研究技术已被应用于各种生命科学领域,如细胞生物学、神经生物学等。在研究对象上,覆盖了原核微生物、真核微生物、植物和动物等范围,涉及各种重要的生物学现象,如信号转导、细胞分化、蛋白质折叠等等。在未来的发展中,蛋白质组学的研究领域将更加广泛。 (2)在应用研究方面:蛋白质组学将成为寻找疾病分子标记和药物靶标最有效的方法之一。在对癌症、早老性痴呆等人类重大疾病的临床诊断和治疗方面蛋白质组技术也有十分诱人的前景,目前国际上许多大型药物公司正投入大量的人力和物力进行蛋白质组学方面的应用性研究。 (3)在技术发展方面:蛋白质组学的研究方法将出现多种技术并存,各有优势和局限的特点,而难以像基因组研究一样形成比较一致的方法。除了发展新方法外,更强调各种方法间的整合和互补,以适应不同蛋白质的不同特征。另外,蛋白质组学与其他学科的交叉也将日益显著和重要,这种交叉是新技术新方法的活水之源,特别是蛋白质组学与其他大规模科学如基因组学,生物信息学等领域的交叉,所呈现出的系统生物学研究模式,将成为未来生命科学最令人激动的新前沿。7.参考答案: (1)б因子含有识别启动区的结构域,调控RNA聚合酶与DNA结合,确保RNA聚合酶与特异启动区而不是其他位点的稳定结合。 (2)б因子使得RNA聚合酶选择一套特定启动区起始转录。一旦一种б因子被另一种代替,即引起原来一套基因转录的关闭和新的一套基因转录的开启。8.参考答案:优点:荧光差异显示双向电泳采用了荧光试剂来标记蛋白质并通过荧光成像以获取电泳图像,可以在同一块凝胶上比较两种不同来源或不同处理样本的蛋白质表达谱。9.参考答案: 蛋白质组表达模式的主要技术有双向凝胶电泳、以质谱为代表的蛋白质鉴定技术及生物信息学技术。双向凝胶电泳包括等电聚焦电泳(IEF)和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS)。质谱技术主要有电喷雾质谱(ESI-MS)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)。 原理:根据蛋白质等电点的不同进行第一向等电聚焦电泳分离;然后转移到二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶上,再根据相对分子量大小不同进行分离。10.参考答案:正确11.参考答案: (1)引物的长度一般15~30bp; (2)引物扩增跨度:以500bp为宜,特定重要条件下可扩增长至10kb的片段; (3)引物碱基:G+C含量以40%~60%为宜,A、T、G、C最好随机分布,避免5个以上的嘌吟或嘧啶核苷酸的成串排列; (4)避免引物内部出现二级结构:避免两条引物间互补,特别是3′端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异性的扩增条物; (5)引物3′端的碱基必须与模板严格配对,而且尽量不要为A,最好选择T,因为3′端末位为T时错配几率大大降低; (6)产物有或能加上合适的酶切位点; (7)被扩增的靶序列最好有适宜的酶切点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。12.参考答案:A,C,E13.参考答案:错误14.参考答案:E15.参考答案:B16.参考答案:复制起始区;复制终止区;转录终止区17.参考答案:C18.参考答案:C19.参考答案:D20.参考答案:A21.参考答案:PA;ALB22.参考答案:E23.参考答案:A,C24.参考答案:mRNA;cDNA25.参考答案:E26.参考答案:gag;pol;env27.参考答案:LTR;U3;R;U528.参考答案:E29.参考答案:错误30.参考答案:A31.参考答案:B32.参考答案: 酶促切割错配(enzymemismatchcleavage,EMC)利用T4内切核酸酶VII识别12种错配碱基并在附近进行酶切的特性,将核酸探针与待检分子杂交,有点突变时杂交分子中有错配出现,为T4内切核酸酶VII识别切割,根据凝胶电泳中片段数量和大小判断有无突变。 优点:能对DNA:RNA异源杂合分子进行分析,最长检测片段达1.5kb。 缺点:产生非特异性切割,检出效率不能保证100%,必须设立内对照。33.参考答案:E34.参考答案:E35.参考答案:A,B,C,D,E36.参考答案:A,B37.参考答案:正确38.参考答案: (1)选择性剪接的方式有:①外显子遗漏;②3ˊ端剪切位点的变化;③5ˊ端剪切位点的变化;④内含子保留。 (2)转录后选择性剪接在高等生物细胞的高度异质性中起重要作用。由于选择性剪接的多样化,一个基因在转录后通过mRNA前体(hnRNA)的剪接加工而产生两个或更多的蛋白质,不同的蛋白可能发挥着不同的生物学效应。 (3)如bax基因的编码产物是与细胞凋亡有关的分子。该基因的原始转录产物经过选择性剪接形成几种(α、β、γ等)不同类型的蛋白质,其结构上的差异主要源于mRNA前体的选择性剪接。39.参考答案:任何类型的病原体,包括病毒、支原体、细菌、真菌和寄生虫,它们感染宿主细胞后均携带有自身特异的遗传信息DNA及/或RNA,它们侵入机体后引起的传染病和寄生虫病等,都可以用基因诊断技术来进行检测或诊断。40.参考答案:破坏蛋白质二级结构;与多肽主链竞争氢键41.参考答案:错误42.参考答案:盐析法;电泳法;超速离心法43.参考答案:凝胶过滤;SDS;沉降分析法44.参考答案:E45.参考答案:D46.参考答案:A,B,E47.参考答案:六大类:①酶类;②激素;③胚胎抗原;④蛋白类;⑤糖蛋白类;⑥基因类。48.参考答案:C49.参考答案:E50.参考答案:正确51.参考答案:E52.参考答案:Southern印迹杂交是1975年Southern建立起来的一种杂交方法,属固相-液相杂交。该法的主要特点是利用毛细现象将DNA转移到固体支持物上,称为Southern转移或Southern印迹(Southernblot)。它首先用合适的限制性内切核酸酶将DNA切割,进行电泳分离后,利用干燥的吸水纸产生毛细作用,使液体经过凝胶,从而使DNA片段由液流携带从凝胶转移并结合在固体支持物表面,在通过和探针杂交来检测固体支持物表面的DNA。53.参考答案: 反义RNA是指能与特定mRNA互补结合的RNA片段,反义RNA由反义基因转录而来。天然的具有功能的反义RNA分子一般为200个碱基以下的小分子RNA。反义RNA在原核生物翻译水平上有三种作用方式: (1)反义RNA根据碱基互补配对原则与mRNA5ˊ端非翻译区包括SD序列相结合。SD序列是mRNA与核糖体小亚基结合的部位,反义RNA与SD序列结合后,阻止了mRNA与核糖体小亚基结合,直接抑制了翻译。 (2)反义RNA与mRNA5ˊ端编码区起始密码子AUG结合,从而抑制mRNA翻译起始。 (3)反义RNA与mRNA的非编码区互补结合,使mRNA构象改变,影响其与核糖体结合,间接抑制了mRNA的翻译。54.参考答案:错误55.参考答案:C56.参考答案:A,C,D,E57.参考答案:A,C,D,E58.参考答案:正确59.参考答案:首先根据所需蛋白质的性质选取生物体组织细胞作为材料,对所选材料进行细胞破碎、离心等前期处理,获得粗提蛋白质溶液。其次利用蛋白质溶解度的差异对蛋白质进行盐析,使其与杂蛋白分离开来,称为蛋白质的粗分离,再次根据蛋白质的分子大小及形状、电离性质、生物学功能的差异选用凝胶过滤层析、离子交换层析、电泳法、亲和层析等方法进行细分离,可得到较纯的蛋白质,此为蛋白质分离纯化的一般程序。60.参考答案:A,C,D61.参考答案:正确62.参考答案:正确63.参考答案:是一种鉴定、分离组织细胞中选择性表达基因的技术,其原理是以抑制性多聚酶链反应(PCR)反应为基础的cDNA消减杂交技术。通过合成两个不同的接头,连接于测试cDNA片段的5′末端,达到选择性扩增差异性表达的cDNA片段,抑制非目的cDNA的扩增。该技术是Diatchenko等1996年在抑制性PCR的基础上建立起来的cDNA消减杂交方法,它克服了DD法的假阳性较高和RDA法消减杂交轮次较多的缺点,十分适用于克隆分析造成某种特殊表型的目的基因及其功能。64.参考答案:生物芯片技术过程包括:①芯片的制备;②样品的制备;③生物分子反应;④检测。65.参考答案:A,B,C,D,E66.参考答案:溶酶体;UPP67.参考答案:错误68.参考答案:催化剂;防止形成凹面;使胶更容易聚合69.参考答案:正确70.参考答案:A71.参考答案:B72.参考答案:平端连接;同聚物加尾连接;人工接头连接73.参考答案:正确74.参考答案:B75.参考答案:3ˊ→5ˊ;5ˊ→3ˊ第2卷参考答案一.参考题库1.参考答案:错误2.参考答案:A,B,C,D3.参考答案:B4.参考答案:C5.参考答案:A6.参考答案:E.coli的核苷酸切除修复主要由四种蛋白组成:UvrA、UvrB、UvrC、UvrD。两个UvrA分子和一个UvrB分子组成复合物结合于DNA,并消耗ATP沿着DNA链移动,UvrA能够发现损伤造成的DNA双螺旋变形,由UvrB负责解链,在损伤部位形成单链区,并使之弯曲约130°,接着UvrB募集内切核酸酶UvrC,在损伤部位的两侧切断DNA链,其中一个切点位于损伤部位5’侧八个核苷酸处,而另一个切点位于3’侧四或五个核苷酸处。然后,DNA解旋酶UvrD去除两切口之间的DNA片段,由DNA聚合酶和连接酶填补缺口。7.参考答案:E8.参考答案: 反义技术(antisensetechnique)是根据碱基互补原理,用人工或生物合成特异性互补DNA或RNA片段(即反义核酸),使之能特异地与目的核酸片段互补结合,从而抑制甚至阻断目的基因表达的一种技术。根据所用反义核酸的不同,反义技术可分为反义寡核苷酸技术、反义RNA技术和核酶技术等。 反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASON)技术根据碱基互补结合原理,人工或生物合成与目的DNA或RNA互补的寡核苷酸,将其导入细胞,通过其与胞内目的DAN或RNA特异结合,抑制甚至阻断目的基因转录和/或翻译,达到人工调控基因表达的目的。 ASON主要通过一下几种机理调节基因表达: (1)形成三螺旋DNA(triplexDNA)或D环(D-loop)结构; (2)与细胞内目的mRNA互补结合,形成DNA-RNA异源杂交体,激活核糖核酸酶H(RNaseH)特异性降解mRNA; (3)与核内不均一RNA(hnRNA)互补结合,破坏正常剪接形成mRNA的过程; (4)与核糖体rRNA的mRNA结合位点互补结合,阻止mRNA的结合和翻译启动; (5)ASON与mRNA互补结合,破坏其进入正确翻译部位的途径。 反义RNA(antisenseRNA)是一类自身没有编码功能,但能通过配对碱基间氢键与目的RNA特别是mRNA的特定区域补结合,从而抑制基因表达的小分子RNA。在实际操作中,可采用自然存在或人工合成的反义RNA,通过基因重组将其反向插入到表达载体,然后以此重组表达载体转染细胞,在细胞内产生大量翻译RNA。 其作用机理包括: (1)与引物RNA结合或作用于引物前体,阻止引物与DNA结合,抑制DNA复制; (2)在转录水平或转录后加工过程中,阻止特定基因转录,或与mRNA5’端结合,阻止加帽过程;或与剪接位点结合,阻止mRNA的剪接形成等; (3)与SD序列或编码区关键点如AUG结合,阻止mRNA与核糖体结合,阻断翻译等。 核酶是具有生物催化活性的RNA,能按碱基互补原理识别特定核苷酸序列并特异地剪切底物RNA分子。根据其分子大小可分为大分子核酶和小分子核酶两种,前者包括I型内含子(groupIintron)、II型内含子(groupIIintron)和核糖核酸酶P的RNA亚基,均由数百到数千核苷酸组成;小分子核酶按结构分为锤头(hammerhead)型、发夹(hairpin)型等,大小多在35-155个核苷酸之间,应用广泛。根据核酶的结构特点和目的RNA的特异性序列特征,设计并合成针对目的RNA的核酶基因,构建表达载体,导入细胞内,核酶基因表达后通过特异序列识别并降解目的RNA。9.参考答案:正确10.参考答案:A11.参考答案:氨基酸通过肤键相连形成的12.参考答案:基因外部调节机制;治疗基因的诱导表达13.参考答案:A14.参考答案:D15.参考答案: (1)启动子:Hogness盒,CAAT盒; (2)增强子:SV40病毒中,位于早期启动子5ˊ上游约200bp,内含2个72bp的重复序列,其核心序列为GGTGTGGAAAG; (3)沉默子:SV40中的AGGTTTTTT序列为终止转录调控元件。16.参考答案:丙烯酰胺;甲叉丙烯酰胺;负;慢17.参考答案:正确18.参考答案:A19.参考答案:C20.参考答案:反义RNA指能与特定基因mRNA互补结合的一类RNA,可抑制一些有害基因的翻译。RNA干扰是指由双链RNA诱发的基因沉默现象:与其有同源序列的mRNA被降解,从而抑制了该基因的表达。核酶是具有酶活性的RNA,可降解特异的mRNA序列。21.参考答案:B22.参考答案:B23.参考答案:B24.参考答案:寡核苷酸探针;双链探针;单链探针25.参考答案:缺失26.参考答案:D27.参考答案:是三大营养素彻底氧化的最终代谢通路;是三大营养素代谢联系的枢纽;为其他合成代谢提供小分子前体;为氧化磷酸化提供还原当量。28.参考答案:核酸酶;重新结合29.参考答案:错误30.参考答案:C,E31.参考答案:错误32.参考答案:有毒性的药物;自杀基因33.参考答案:肝脏;尿素34.参考答案:C35.参考答案:随着人类基因组计划和多种模式生物全基因组测序的完成,基因数据库的不断完善,以及各种计算机分析软件的开发与互联网的广泛应用,使人们有可能通过与基因数据库进行序列搜索、对比分析、拼接,预测新的、假定的全长基因,然后通过分子生物学实验方法

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