微其他病毒及朊粒

,1,其他病毒,狂犬病病毒 Rabies Virus,人乳头瘤病毒 Human Papillomavirus,朊粒（prion）,2,主要内容,狂犬病毒、HPV、朊粒生物学性状狂犬病毒、HPV、朊粒致病性。狂犬病毒微生物学检查方法，防治原则,3,狂犬病毒 Rabies Virus,4,狂犬病,又称“恐水症”，是一种中枢神经系统传染病；人畜共患病 主要症状：高度兴奋、恐水、咽肌痉挛不能进食、全身进行性瘫痪；呼吸和循环衰竭而死亡。 病死率几乎100,5,6,1、形态结构有包膜病毒，弹状，6085X130300nm，衣壳为螺旋对称形，有刺突，包膜有大量糖蛋白突起血凝素核心为 (-)ssRNA感染细胞胞质内形成嗜酸性包涵体-Negri body（内基小体）,一、生物学性状,7,狂犬病毒Rabies Virus,8,病毒复制,易感动物范围大 家畜（狗、猫） 野生动物（狼、狐狸、猴、蝙蝠等）在中枢神经细胞中增殖，形成内基氏小体。,9,内基小体：狂犬病毒在神经细胞内增殖，可形成胞浆内嗜酸性的、圆形或椭圆形的包涵体，可辅助诊断狂犬病。,嗜神经性,内基小体,10,病毒Ag和毒力变异,根据包膜糖蛋白G蛋白，分成,野毒株（Wild strain） 固定毒株（Fixed strain） 变异株对家兔致病力强，对人和犬的 致病力减弱 可制成疫苗,11,抵抗力,不强：对热敏感56C 30-60 min或100C 2 min可灭活。在脑组织中室温或4可持续12周灭活病毒：酸、碱、有机溶剂、表面活性剂 （肥皂水、离子型或非离子型去垢剂）等敏感,12,*易感动物： 家畜和野生动物 蝙蝠可能是重要 的储存宿主,致病性,13,* 动物间狂犬病：患病动物咬伤健康动物而传播。人被患病动物咬伤致病。发病率为30%-60%。*一旦发病，死亡率达100%。,14,致病性与免疫性,发病机制,人被病犬咬伤病毒随犬唾液经伤口进入人体（v在入侵部位的肌肉细胞中增殖）通过神经肌肉接头侵入周围神经神经节直至中枢神经系统（脑组织中病毒迅速增殖扩散）沿传出神经传至唾液腺及其他组织。,15,前驱期：发热、伤口处感觉异常、烦躁不安等,24天,临床表现,潜伏期：通常3-8周长至数年,16,2.典型临床表现：狂犬病（恐水症）,17,* 可诱导机体产生中和抗体，中和游离病毒。* 疫苗接种对预防该病有效。* 抗体对细胞内病毒无作用，可能会因病 理免疫加重疾病。,免疫性,18,微生物学检查,临床表现病史诊断 观察咬人动物710d，如观察期间动物发病，取动物脑部海马回查病毒抗原或内基小体免疫荧光法： 检测病毒抗原RT-PCR：检测病毒核酸,19,四、防治原则：,1、控制犬类，普及家犬预防接种高危人群（兽医、饲养员）注意个人防护2、人被咬伤后：处理伤口 3%-5%皂水或清水-75%酒精/碘酒被动免疫 抗狂犬病马血清 抗狂犬病人Ig主动免疫 灭活疫苗（0, 3, 7, 14, 28d）,20,第二节 人乳头瘤病毒,Human Papillomavirus，HPV,主要感染皮肤粘膜细胞，引起增生性病变 种类有100多型 高危型16,18引起：宫颈癌 低危型：6,11引起：生殖器尖锐湿疣,21,* 球形，无包膜，50nm，衣壳呈20面体立体对称* 核酸为双链环状DNA*E5、E6、E7基因：使细胞转化-致癌,1、生物学性状：,22,二、致病性,根据感染部位的不同， HPV分为：嗜皮肤和嗜粘膜 致病机制： 病毒复制诱导上皮细胞增殖，使表皮增厚和角化，由此形成乳头状瘤，也称疣。 高危型别HPV的一段游离基因可插入宿主染色体的任意位置，导致细胞转化。 传播方式： 直接/间接接触，性传播，新生儿垂直传播,23,HPV引起宫颈癌机制示意图,24,二、致病性与免疫性,疾病特点,不引起病毒血症,多样性：疣、尖锐湿疣、喉乳头瘤,与宫颈癌有关,25,HPV型别,相关疾病,1、2、3、43、1076、116、1116、18、31、33等57b12、32,寻常疣扁平疣屠夫寻常疣喉及口腔乳头瘤尖锐湿疣子宫颈癌鼻腔良/恶性肿瘤口腔癌,HPV型与人类疾病,26,寻常疣(HPV1,2,4型),跖疣,27,扁平疣（HPV 3，10型）,尖锐湿疣(HPV6,11型),28,四、微生物学检查,核酸检测-PCR，核酸杂交法血清学检测WB免疫印迹法,三、免疫性感染后可以产生Ab，但是无保护作用，容易反复感染。,29,* 治疗方法局部涂药用激光、冷冻、电灼或手术等方法除去疣体* 预防 避免接触HPV-VLP疫苗：二价（16/18型）疫苗 四价（6/11/16/18型）疫苗,四、防治原则,30,中国可以接种HPV疫苗,2006年6月，HPV疫苗获得美国食品药品监督管理局（FDA）批准，成为世界上第一个预防癌症的疫苗。 2016年7月18日， 葛兰素史克公司宣布： 希瑞适（Cervarix，HPV疫苗 16型和18型） 获得中国许可，成为国内首个获批的预防宫颈癌的HPV疫苗。,31,我们用的HPV疫苗是否过时？,默沙东旗下的 “佳达修”（Gardasil）HPV 4价疫苗。9价疫苗：增加了31、33、45、52和58 五种亚型，对病毒的覆盖面也达到了90%。,32,第34章 朊粒 PrionProteinaceous infecious particle,33,朊粒（prion）,概念： 是一种由正常宿主细胞基因编码的、构象异常的蛋白质，无核酸成分，具有自我复制能力和传染性。 是人和动物传染性海绵状脑病（TSE）的病原体。,Stanley Prusiner.Prion researcher and 1997 Nobel Prize winner,生物学特性：疏水性糖蛋白，27-30KD，存在2种不同构象。正常：PrPC，异常：PrPsc,34,传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathy, TSE）,* 动物TSE，如： 羊瘙痒病 牛海绵状脑病（BSE）疯牛病 * 人类TSE，如： 库鲁病（kuru disease） 克-雅病变种（variant CJD, v-CJD）,35,PrPC 与 PrPSC,* 正常宿主细胞具有编码产生朊蛋白的基因，人类PrP基因位于第20号染色体，小鼠PrP基因位于第2号染色体。* PrPC与PrPsc由同一染色体基因编码，其氨基酸序列完全一致（253254aa），差别在于它们空间构象上的差异。,36,PrPC 与 PrPSC,* 正常情况下，细胞PrP基因编码产生细胞朊蛋白（cellular prion protein, PrPC），PrPC以螺旋为主，对蛋白酶K敏感，无致病性。* 某些条件下，PrPC构型发生异常变化（以折叠为主）形成致病的PrPsc（羊瘙痒病朊蛋白，scrapie prion protein），对蛋白酶K有抗性，具有致病性与传染性。,37,PrPC和PrPSc的空间结构模式图,38,抵抗力,Prion对理化因素有很强的抵抗力 * 抵抗蛋白酶K的消化作用； * 标准的高压蒸气灭菌（121.3, 20 min）不能破坏Prion，需高压蒸气灭菌134、2h，才能使其失去传染性。 * 对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性。,39,人和动物的Prion病,羊瘙痒病 水貂传染性脑病 鹿慢性消瘦症 牛海绵状脑病 猫海绵状脑病,库鲁病（kuru disease）克雅病格斯特曼-斯召斯列综合征致死性家族失眠征克雅病变种,人类Prion病 动物Prion病,40,prion病共同特征： 1. 潜伏期长（数年-数十年）， 2. 慢发病毒感染：一旦发病，进行性加重致死亡的中枢神经系统的慢性退化性疾患。 3. 病理学特点：大脑皮质神经元退化，空泡变性， 形成淀粉样斑块，成为海绵样脑病或白质脑病。 4. 免疫原性低，不能诱导特异性免疫应答,41,v-CJD病人大脑组织切片：示海绵状病变（左）和淀粉样蛋白沉淀（右）,42,人类Prion病的传播途径 * 传染性（TSE）： 如库鲁病、克雅病变种 多种途径传播（消化道、血液、神经及医源性） * 遗传性： 如家族性克雅病，与遗传有关（PrP基因突变） * 散发性： 如散发性克雅病，传播途径尚不明,43,多种途径传播途径,44,关于库鲁病（Kurus disease）,20世纪，新几内亚局部流行，主要症状：震颤、共济失调、脑退化痴呆，渐至完全丧失运动能力，36个月内因衰竭而死亡。Kuru：恐惧或寒颤，故称库鲁病，以女性和儿童居多。美国医学家盖杜赛克,1955年开始进行20年研究，病毒引起，与食用人肉的祭祀方式密切关联1968年停止该仪式，拯救了一个部落，盖杜赛克获得了1976年诺贝尔医学奖。,45,患库鲁病的儿童,46,疯牛病，与病牛接触或进食病牛肉是人v-CJD最主要的发病原因。,47,三、微生物学检查检测致病因子PrPSc确诊*免疫组化法：标本先用蛋白酶K处理破坏PrPC，再用PrP McAb或多克隆抗体检测对蛋白酶K有抗性的PrPSc。 *免疫印迹：目前国际上确诊Prion病最常用的有效方法。先用蛋白酶K处理标本，电泳后转印至硝酸纤维膜，再用PrP McAb或多克隆抗体检测PrPSc。ELISA：用于大量筛查,48,四、防治原则