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文档简介

肾素检测的最新发展情况,几个问题,为什么传统上肾素检测活性?为什么现在肾素要变为测浓度?,肾素前体由406个氨基酸组成,其中包含两个前片段,分别为20和46个氨基酸。成熟的肾素包含340个氨基酸,分子量为37KD。,肾素,肾素原,肾素与活性肾素的异同肾素活性与活性肾素的区别活性肾素在体内的意义,肾素检测的几个基本概念,无活性的肾素原,有活性的肾素原,肾素,肾素原,活性肾素,传统肾素检测试剂肾素活性检测,试剂盒组分:抗Ang I多抗包被管125I标记的Ang I 校准品(6个)质控品酶抑制剂洗液,检测步骤,Ang I 转化将预冷的200ul酶抑制剂加入200ul血浆样本中,混合均匀后,分为两份,分别置于冰水浴和37度中孵育1小时,孵育后将37度的样本置于冰水浴中迅速冷却备用。,肾素检测-PRA vs PRC,肾素检测-PRA vs PRC,血管紧张素原,肾素,血管紧张素I,降解片段,血管紧张素II,血管紧张素原酶,微生物污染,血管紧张素转化酶,目前PRA检测存在的问题各实验室之间差异较大,无法标准化操作复杂,重复性差,结果无互通性除此之外无国际标准品可参照体外的孵育条件和体内状态差异较大加入酶抑制剂放置血管紧张素I降解,肾素检测-PRA vs PRC,PRA带给临床最大的困扰,重复性差周期长依赖外送,如何做到活性肾素的检测?关键在于那一个关键的抗体。,关键抗体,一般的肾素抗体,肾素检测-PRA vs PRC,肾素检测-PRA vs PRC,Perschel et al. Clin Chem. 2004,美国内分泌学会原醛症指南,该指南同时推荐了肾素活性和浓度应用于ARR实验,同时给出了基于美国人群的不同方法学ARR的cut-off值,美国Quest实验室集团肾素浓度检测(Renin, Direct),使用化学发光法检测浓度,当天反馈结果,85%。肾素活性检测放弃了RIA法,改用LC-MS法,一周后出结果,15%。,美国目前肾素检测的应用,安图PRC和Aldosterone诊断效力研究,中山大学附属第一医院-曹教授,放免RIA 与化学发光CLIA测醛固酮浓度呈正相关(r=0.967),放免RIA 肾素活性与化学发光CLIA肾素浓度呈正相关(r=0.905),放免RIA法醛固酮肾素活性比值 ARR以30为切点,灵敏度为90.2% ,特异度为92.6% ;化学发光CLIA法 醛固酮肾素浓度比值AARR以25为切点,灵敏度为95.1%,特异度为83.3%;两种方法检测结果计算所得醛固酮/肾素比值的ROC曲线下面积分别为0.94和0.92,ROC曲线下面积比较差异无统计学意义(P=0.52)。,已开展PRC的医院,北大人民 北京阜外

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