食品与饲料中真菌毒素的危害性极其检测方法

食品与饲料中真菌毒素的危害性及其检测方法,北京中检维康技术有限公司 王 雄 高级工程师,Mycotoxins真菌毒素,Mykes: Greek for fungus/mold 希腊语“霉菌” Toxicum: Latin for poison/toxin 拉丁文 “毒素”,真菌毒素的种类,真菌毒素（Mycotoxin），有时也俗称霉菌毒素，是某些真菌产生的代谢产物，目前已发现的真菌毒素有十多种，它们包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马霉素、脱氧雪腐镰刀菌烯酮（也称为呕吐毒素）、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、麦角碱、杂色曲霉素、黄米毒素、岛青霉毒素、展青霉毒素（棒曲霉毒素）、橘青霉素、皱褶青霉素、黄绿青霉素、红矢精、黄绿素、圆弧青霉偶氮酸和F-2毒素等。,产生真菌毒素的霉菌,1）曲霉属（Aspergillus Link）：黄曲霉（A. flavus）、寄生曲霉（A. parasiticus）、赭曲霉（A. ochraceus）、杂色曲霉（A. flavus）、烟曲霉（A. flumigatus）、构巢曲霉（A. nidulans）和棒曲霉（A. clavus）等。 2）青霉属（Penicillium Link ex Fr）：岛青霉（P. islandicum）、橘青霉（P. citrinum）、红色青霉（P. rubrum）、展青霉（P. patulum）和黄绿青霉（P. citreo-vinide）等。 （ 3）镰刀菌属（Fusarium Link ex Fr）：禾谷镰刀菌（F. graminearun）、串珠镰刀菌（F. moniliforme）、木贼镰刀菌（F. equiseti）、茄病镰刀菌（F. solani）、三线镰刀菌（F. tritinctum）和镳草镰刀菌（F. sporotrichioides）等。,霉菌与真菌毒素的关系,（1）提及到某种产毒真菌时，只是说明该种菌的某些菌株有产毒能力，并不意味着所有的菌株都产毒。（2）同一产毒菌株的产毒能力具有一定的可变性和易变性。（3）同一种真菌毒素可能由几种不同的真菌产生，而同一种真菌有可能产生几种不同的真菌毒素，所以说产毒真菌产生真菌毒素时，没有严格的专一性。（4）存在有真菌的物品中，不一定都存在有真菌毒素；发现有真菌毒素时，有时从表面上不一定能观察到有霉变现象。两者之间不存在必然的因故关系，但是它们存在有概率关系，存在真菌与霉变现象较多的物品中，检测到真菌毒素的可能性会大一些。,Mycotoxins of economic, health and agricultural significance 真菌毒素对经济、健康和农业的影响,Mycotoxins are metabolic products of food spoilage fungi that induce toxic responses when consumed by animals or people. 真菌毒素是食品中损伤的霉菌的代谢产物，人和动物摄入后会产生毒性反应。 Hundreds of mycotoxins have been identified; They will fall into many different chemical classes, and induce a wide variety of toxic responses. 已有几百种真菌毒素被鉴别，它们分为许多种类的化学物质，能产生各种各样的毒性反应。,1.宝石的概念：凡是经琢磨、雕刻可以成为首饰和工艺品的材料。 2.宝石的分类: 包括天然宝石和人工宝石两大类。 (1)天然宝石 指由自然界产出，具有美观、耐久、稀少性和工艺价值的，可加工成装饰品的物质。 (2)人工宝石 完全或部分由人工生产或制造用作首饰及工艺品的材料。它包括合成宝石、人造宝石。,宝石：都是天然生成的矿物单个晶体或晶体的一部分。如祖母绿、钻石、红蓝宝石、水晶等。对宝石的要求：颜色鲜艳，透明度好，硬度不低于玻璃，即不低于摩氏硬度5.5-6。 玉石：由大量细小的同一种矿物晶体所组成的集合体。如翡翠、软玉等。对玉石的要求：颜色美观，光泽喜人，硬度不低于摩氏硬度4，质地细腻。 彩石： 它是由一种或多种矿物的细小晶体组成的集合体，即地质学上所谓的岩石。对彩石的要求：颜色鲜艳，光泽美，或者有奇特的花纹结构。,Figure 6.1. Factors affecting mycotoxin occurance in the food chain (Pestka and Casale, 1989).,Mycotoxins economic and health risks 真菌毒素对经济与健康的影响,Biological Factors生物因素 Susceptible Crop +易感染的庄稼 Compatible, Toxigenic Fungus共处产毒的霉菌,Environmental Factors环境因素 Temperature温度 Moisture湿度 Mechanical Injury机械损伤 Insect/Bird Damage昆虫/鸟的破坏 Fungus霉菌,Harvesting收割 Crop Maturity庄稼成熟 Temperature温度 Moisture湿度 Detection/Diversion检测/分类,Storage储藏 Temperature温度 Moisture湿度 Detection/Diversion检测/分类,Distribution-Processing加工运输 Detection/Diversion检测/分类,Animal Products动物产品,Humans人,Animals动物,玉米上的曲霉属（Aspergillus),玉米上的镰刀菌属 （Fusarium),玉米上的赤霉素 （Gibberella),Ecological parameters affecting mycotoxin production 生态因素对真菌霉毒素产生的影响,Moisture 湿度 Spore Load 载带孢子 Temperature 温度 Competing Microflora 竞争性的微植物 Substrate 基质,Microbial Interactions 微生物的相互作用 CO2/O2 Time 时间 Mechanical Damage 机械损伤 Insect Damage 昆虫损害,Major mycotoxins associated with field crops by general geographic areas in the U.S.,A= aflatoxins 黄曲霉毒素 D= deoxynivalenol 呕吐毒素 E= ergot 麦角 O= ochratoxin A 赭曲霉毒素A T= tremorgens Z= zearalenone 玉米赤霉烯酮,Courtesy of A.C. Pier and J.L. Richard. Cover design and art work by L. Ekblad, Chichaqua Bend Studios, Ames, Iowa,Adverse economic effects of mycotoxins producer costs 真菌毒素对经济产生的负面影响,LIVESTOCK家畜(beef, swine, poultry) and dairy 牛、猪、鸡和(乳品） Higher mortality rates 死亡率高 Reproductive failures (abortions) 生育率低 Reduced feed efficiency饲料营养价值降低 Overall quality loss总品质下降 Lower milk production 产乳率下降 Nonmarketable milk无用乳量增多,CROPS庄稼 Yield Losses产量减少 Restricted Markets 销售难度增加 Increased production costs 增加生产成本 Increased post harvest costs 增加收割后的成本,常见饲料中原料最易出现的真菌毒素,Aflatoxin黄曲霉毒素,Produced by Aspergillus flavus and A. parasiticus 由黄曲霉和寄生曲霉产生 Five key aflatoxins (五种黄曲霉毒素): B1, B2, G1, G2 and M1 Found in corn, grains, cottonseed, peanuts, tree nuts, spices, milk 玉米、谷物、棉籽、花生、坚果、调味品、牛奶中均已发现 Liver damage 对肝有损害 IARC- class 1 human carcinogen 国际肿瘤研究机构定为一级致癌物,黄曲霉毒素的化学性质,黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素B1、B2发兰色荧光，黄曲霉毒素G1、G2发绿色荧光。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的分子量为312-346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有分解，在pH 9-10的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素B1的分解温度为268 oC，紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性。,黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (1),黄曲霉毒素在各国商品中的存在情况 (2),Aspergillus flavus黄曲霉,Figure 4.1 Growth of Aspergillus flavus (yellow-green fungus) from two of five surface sterilized peanuts placed on a nutrient culture medium. 图4.1 五颗表面消毒的花生置于营养培养基中，其中两颗有长出黄曲霉（黄绿色霉菌）,Photograph courtesy of R.J. Cole, USDA, ARS, National Peanut Research Laboratory, Dawson, Georgia.,Aflatoxin B1 黄曲霉毒素B1的化学结构式,Effects of aflatoxins 黄曲霉毒素的作用,Figure 2.2 Livers from guinea pigs given increasing doses of aflatoxins over the same period of time. From left to right beginning in the upper left corner to the lower right corner with a liver from a guinea pig given the greatest dose of aflatoxins. Note the increasingly pale livers with increasing dose of aflatoxins.,Photograph courtesy of J.L. Richard, USDA, ARS, National Animal Disease Center, Ames, Iowa.,图2.2 黄曲霉毒素对天竺鼠肝脏的影响，从上排的最左边到下排的最右边，同一时间内摄入的黄曲霉毒素量逐步增加。请注意：摄入的黄曲霉毒素量越大，天竺鼠肝脏越苍白。,黄曲霉毒素的毒性,1.一级致癌物质。 2.是氰化钾的10-20倍。 3.是砒霜的68倍 。 4.是农药1605、1059的28-33倍。 5. 是3，4-苯并芘的4000倍。 6.是二甲基亚硝胺的75倍。,Aflatoxin in poultry 黄曲霉毒素对家禽的影响,Liver damage 损害肝脏 Decreased egg production 降低产蛋率 Inferior egg shell quality 降低蛋壳的质量 Increased susceptibility to disease 增加对疾病的感染 Decreased weight gain 降低体重 Embryotoxicity 胚胎致毒,黄曲霉毒素B1对各种动物的LD50（一）,黄曲霉毒素B1对各种动物的LD50（二）,黄曲霉毒素引起的家禽和家畜中毒症（一）,黄曲霉毒素引起的家禽和家畜中毒症（二）,雏鸭急性中毒出现的病变,1.肝实质细胞坏死：24h出现，48-72h最明显。 2.胆管增生： 48-72h可见，鸭的门静脉区周围胆管上细胞增生。 3.肝细胞脂质消退延迟：正常孵出4-5天可逐渐消失，中毒时消退延迟。 4.出血：中毒雏鸭肝脏出血，中毒死亡的出血更严重。,动物慢性中毒的主要表现,1.肝功能变化：血清转氨酶、碱性磷酸酶、异柠檬酸脱氢酶、球胆白升高。血浆白蛋白、非蛋白氮降低。肝糖元及肝内维生素A含量下降。 2.肝组织学变化：肝细胞变性、坏死。可形成再生结节。胆管上皮增生及纤维化。有的动物可发生肝硬化。 3.其它症状：生长发育迟缓、体重下降、食物利用率降低、母畜不育或产仔少等。,Aflatoxin B1（致癌性）,Courtesy of D.P.H. Hsieh, University of California, Davis. Drawing by G. Hedberg, USDA, ARS, National Animal Disease Center, Ames, Iowa.,Aflatoxin B1 binds to DNA at the guanine base in liver cells, corrupting the genetic code that regulates cell growth. Out-of-control cells grow into tumors that eventually become cancerous. 黄曲霉毒素 B1同肝细胞DNA的鸟嘌呤碱基结合，使得控制细胞生长的基因代码发生错误，从而使细胞生长失控，成为癌性肿瘤。,黄曲霉毒素与人类肝癌的关系（广西）,中国对食物中黄曲霉毒素的最高允许含量,对饲料中黄曲霉毒素限量的中国标准,对饲料中黄曲霉毒素限量的国际标准（ug/kg),U.S. federal government action level for aflatoxin 美国联邦政府对黄曲霉毒素的限量标准,Food for human consumption and dairy feed 15 g/kg 人食用食品和奶牛用饲料 Milk for human consumption食用牛奶 0.5 g/kg Nondairy animal feeds Levels up to 非产奶动物用饲料 300 g/kg,European community commission regulation 欧共体对花生产品的限量标准,Ochratoxin赭曲霉毒素,Produced by Aspergillus ochraceus and Penicillium viridicatum由赭色曲霉素和青霉素产生 Found in cereal grains, coffee, pig products, dried vine fruit, wine可在谷物、咖啡、猪肉产品、葡萄干和酒中发现 Nephrotoxin (kidney toxin)肾毒素 Linked to Balkan endemic nephropathy与巴尔干肾病有关 Found in blood of most Europeans大多数欧洲人血液中有发现 IARCpossible human carcinogen国际肿瘤研究机构认定为2B类致癌物,赭曲霉毒素的化学性质,赭曲毒素是赭色曲霉属（Ochraceors）和几种青霉属真菌产生的一种毒素，包括A、B、C等7种结构类似的化合物，其中以赭曲毒素A毒性最大。赭曲毒素A是稳定的无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀碳酸氧钠溶液，微溶于水。将赭曲毒素A的乙醇溶液贮于冰箱中一年以上也无损失，但应避光保存，如接触紫外线，几天就会分解。,产生赭曲毒素A 的 条件,淡褐色曲霉属 （A.alutaceus）、硫磺色曲霉属 （A.Sulphureus）、 菌核 (A.sclerotium)和蜂蜜味曲霉属 (A.melleus)均可能产生赭曲毒素A, 但它们在食品和饲料中比较少见。 曲霉属产生赭曲毒素A的条件是中温,寒冷气候。青霉属产生赭曲毒素A的地区主要是亚热带。在储藏的谷物中，经常发现有青霉属真菌尤其是北欧和加拿大，淡褐色曲霉属真菌普遍存在于绿咖啡豆和咖啡制品中，咖啡豆，大豆，玉米，大米、花生、棉籽、麦类中也有发现。因此，一般容易感染赭曲毒素A的商品包括：大豆、绿豆、绿咖啡豆、酒、啤酒、葡萄汁、调味品、草本植物、猪肾。猪是对赭曲毒素A最敏感的动物。,赭曲毒素A在各种商品中的存在情况（1）,赭曲毒素A在各种商品中的存在情况（2）,中国部分地区谷物中赭曲霉毒素A的污染情况,Ochratoxin in poultry 家禽中的赭曲霉毒素,Reduced growth rate 生长率减慢 Reduced egg production 浓度大于1mg/kg时，产蛋率下降 浓度大于5mg/kg时，对肝脏组织和肠产生损坏 Fatal in high concentrations 高浓度会致死,鸡雏和肉用仔鸡赭曲霉毒素的中毒症状,精神不振，营养不良，消瘦，生长发育缓慢，体质虚弱，可视黏膜充血、出血。食欲大减，饮欲增强，出现卡它性肠炎症状，外周发射机能丧失，站立不稳，多取蹲坐姿势，腿和颈肌阵发性振颠，虚脱而死亡，死亡率较高。,犊牛赭曲霉毒素的中毒症状,精神沉郁，增重减慢，食欲大减，拉稀和脱水等。重型病例，血清谷草转氨酶活性升高，肝糖元减少。,赭曲霉毒素A的限量标准,国际食品法典委员会提议：赭曲霉毒素A在小麦、大麦、黑麦及其它们的制品中不得超过5ug/kg。 2. 瑞士：猪混合料200ug/kg, 家禽混合料1000ug/kg。,推荐的混合饲料中赭曲霉毒素A的允许量,Major fusarium mycotoxins 主要的镰刀菌真菌毒素,Fumonisins 伏马毒素 Deoxynivalenol 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素） T-2 Toxin T-2毒素 Zearalenone 玉米赤霉烯酮,Fumonisin伏马毒素,Produced by Fusarium verticillioides 由串珠镰刀菌产生 Found in corn and maize 可在玉米和玉蜀黍中发现 Equine Leukoencephalomalacia 马白脑软化症 liquefaction of brain matter in horses 马的脑物质液体化 aimless circling, abnormal movements, lameness, death 无目标转圈、运动失调、跛足、死亡 Porcine pulmonary edema 肺水肿综合症 Human esophageal cancer in South Africa南非人的食道癌 Cancer promoting activity in rats and mice促进老鼠肿瘤的活动,Fumonisin in poultry 家禽中的伏马毒素,“Spiking mortality syndrome” “致死综合症” neurological signs 神经症 reduced growth 生长速率下降 mortality in chicks at 14 days old 可以使14天龄的小鸡致死,U. S. federal government guidance levels for total fumonisins (FB1+FB2+FB3) 美国政府建议的伏马毒素总量限量标准,Corn products for 2-4 mg/kg human consumption 人类消费的玉米产品 Corn products for 5-100mg/kg animal feeds 动物消费的玉米产品,美国FDA对伏马毒素在人类食品中的推荐限量标准,美国FDA对伏马毒素在动物饲料中的推荐限量标准,国际对玉米中伏马毒素含量的限量标准(mg/kg),Zearalenone玉米赤霉烯酮,Produced by Fusarium molds 由镰刀霉菌产生 Found in cereal grains (corn, wheat, barley)已在谷物中发现（玉米、小麦、大麦） Estrogenic effects, especially in pigs 雌性化作用，尤其对于猪 male pigs show feminization 公猪表现为雌性化 decreased litter size, abortions一胎仔数量减少、容易流产 interferes with conception, ovulation and implantation of fetus 影响怀孕、排卵和胎儿 IARC-possible human carcinogen国际肿瘤研究机构认定为对人类是可能的致癌物,玉米赤霉烯酮在各种商品中的存在情况（1）,玉米赤霉烯酮在各种商品中的存在情况（2）,Deoxynivalenol 脱氧雪腐镰刀菌烯酮,Also known as Vomitoxin and DON 也称为呕吐毒素或DON Produced by Fusarium molds 由镰刀霉菌产生 Found in cereal grains (wheat, corn, barley and oats) 可在谷物中发现（玉米、小麦、大麦和燕麦） Intestinal disorders, vomiting, diarrhea 肠道疾病、呕吐、腹泻 Feed refusal 拒食 Reproductive disorders 生育困难 Increased susceptibility to disease 还有对其它的疾病易感,玉米赤霉烯酮的性质,玉米赤霉烯酮(zearalenone，ZEN)，又称F2毒素，是由禾谷镰刀菌、三线镰刀菌、尖孢镰刀菌、黄色镰刀菌(Fculmorum)、串珠镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰刀菌、雪腐镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物,是一种雌激素真菌毒素。化学名为6-（10羟基-6氧基-1-炭稀基）-雷琐酸-内脂，是一种白色的结晶，分子式为C18H22O5，分子量为318；熔点为164-165oC；紫外线光谱最大吸收为236nm，274nm和316nm；红外线光谱最大吸收为970nm。纯的玉米赤霉烯酮不溶于水、二硫化碳和四氯化碳；溶于碱性水溶液、乙醚、苯、氯仿、二氯甲烷、醋酸乙酯、乙腈和乙醇；微溶于石油醚(b.p.30-60 oC),在紫外线照射下呈蓝绿色。,Deoxynivalenol in poultry 家禽中的的呕吐毒素,Reduced egg quality 产蛋量减少 Reduced weight 体重减少,猪对DON特别敏感,1. 日粮中DON浓度高于2mg/kg，则引起猪采食量下降，日增重降低。 当DON浓度高于20mg/kg，导致猪拒食、呕吐。,DON中毒症状,厌食、呕吐、消化道去炎症，白血球下降，白尿、运动失调、内脏出血、中枢神经系统细胞变质，细胞生长上表现出抑制蛋白质合成的作用。,U. S. federal government advisory level for deoxynivalenol 美国联邦政府对脱氧瓜蒌镰菌醇的限量标准,Wheat products for human consumption 1mg/kg 人食用的小麦 Grain for swine and other animal species 5mg/kg (not cattle or chickens) 猪和其他非牛或鸡动物食用的谷物 Grain for cattle and chickens 10mg/kg 牛和鸡食用的谷物,我国对配合饲料中DON限量的推荐值（mg/kg),T-2,Produced by Fusarium molds 镰刀霉菌 Found in cereal grains (wheat, corn, rye) 可在小麦，玉米，黑麦等谷物中发现 Alimentary Toxic Aleukia Burning in mouth, throat and stomach 口、喉咙、胃灼烧 vomiting, diarrhea, abdominal pain 呕吐、腹泻、腹疼 bone marrow destruction/decreased blood production骨髓破坏/生血减少 hemorrhaging in mucous membranes and organs 黏液膜和器官出血 Isolated from “yellow rain” 从 “黄雨” 中分离出来 Immunosuppressive 免役抑制,T-2 in poultry家禽中的T-2毒素,Hemorrhage syndrome 出血综合症 Poor weight gain 体重增长缓慢 Decreased egg production/egg shell thinning 产蛋率降低/蛋壳变薄 Abnormal feathering 羽毛不正常 Oral lesions/decreased feed intake 口腔疾患/进食量减少 Central nervous system disorders 中区神经系统紊乱 loss of voluntary motor responses 随意性的运动减少 abnormal positioning of wings 翅膀定位不正常 impaired righting reflex 条件反射力下降,T-2 effects T-2毒素的影响,Figure 2.1 Effects of dietary T-2 mycotoxin on growth of turkey poults. The turkey poult on the left was given normal ration, and the poult on the right was given a ration containing 10ppm of T-2 mycotoxin for three weeks.,Photograph courtesy of J.L. Richard, USDA, ARS, National Animal Disease Center, Ames, Iowa.,图2.1火鸡摄入T-2毒素对其生长的影响，左边火鸡使用正常的配料，右边火鸡使用加有10 ppm的T-2毒素三个星期。,Effects of T-2 (continued) T-2毒素的影响,Figure 2.3 Severe oral lesion in a turkey poult that consumed a ration containing 10 ppm T-2 mycotoxin for 3 weeks. 图 2.3 火鸡使用加有10 ppm的T-2毒素三个星期后，出现严重的口腔疾病。,Photograph courtesy of J.L. Richard, USDA, ARS, National Animal Disease Center, Ames, Iowa.,不同种类动物对T-2毒素的敏感性（mg/kg),推荐的混合饲料中T-2毒素允许量（mg/kg),Vicam Mycotoxin Tests 维康公司真菌毒素试验方法,Fast快速 Quantitative定量 Accurate准确 Easy简单 Safe安全 Economical经济,Antibody Bound Resin键合在树脂上的抗体,Mycotoxin Affinity Column真菌毒素免疫亲和柱,Monoclonal Antibody单克隆抗体,Impurities杂质,Mycotoxins 真菌毒素,Impurities杂质,Mycotoxins bound to monoclonal antibodies 真菌毒素与单克隆抗体键合,Column Wash 清洗亲和柱,Mycotoxins bonded to monoclonal antibodies 键合在单克隆抗体上的真菌毒素,Methanol elution 用甲醇洗脱,Methanol 甲醇,Mycotoxins 真菌毒素,Purified mycotoxins in methanol 甲醇中纯的真菌毒素,真菌毒素检测仪,GB/T 18979-2003 “食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析高效液相色谱法和荧光光度法”,黄曲霉毒素分析的免疫亲和柱法是最新的中国国标方法 (GBT18980-2003和GBT18979-2003)和中国出入境检验检疫新的行业标准(S/N:T1101-2002) 。该方法与国际标准接轨，是AOAC（美国公职分析化学家协会）的官方方法（编号为：991.31和 2000.16），也是美国农业部（证书编号为：FGIS91-103-13和）、IUPAC（国际纯粹与应用化学协会）、US-FDA（美国食品药品行政署）认证的官方方法。,免疫亲和柱法的特点,（1）分析速度快，一个样品只需10-15分钟，而其它传统方法均需要几个小时至几天时间。（2）灵敏度高（ 1ppb ），测定范围宽（1-300ppb）。（3）采用单克隆抗体免疫技术，可以特效性地将黄曲霉毒素，分离效率和回收率高，正确性和可靠性强。（4）仪器设备轻便容易携带，自动化程度高，操作简单，直接读出测试结果，高中文化水平者即可胜任，可以在小型实验室或现场使用。（5）不需要剧毒的黄曲霉毒素及其它真菌毒素标准物来标定，所以整个试验操作过程中，绝对安全可靠。（6）利用同一台仪器和相似的分析方法，还可以检测赭曲毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮、脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON或称呕吐毒素）和T-2毒素。(7)在2002年由国家认证认可监督管理委员会实验室部负责组织的黄曲霉毒素能力测试中，全部达到满意和合格。,黄曲霉毒素分析的操作过程,一、 提取样品：研磨、称重样品。用盐、甲醇/水混合物将样品混匀。过滤。 二、 稀释过滤：将提取的一部分样品用水稀释。过滤。 三、吸附、淋洗：将滤液通过Afla Test亲合柱。用水清洗亲合柱用甲醇将黄曲霉毒素从亲合柱上淋洗下来，并收集于试管中。 四、测定：将显色剂加入淋洗液后，把试管放入已标定的荧光计内，以ppb读数。或者将淋洗液注入HPLC，用HPLC分别测定各种黄曲霉毒素的浓度。,黄曲霉毒素分析仪的应用范围,可以检测的样品包括：大米、面粉、酱油、植物油、醋、牛奶、奶制品、花生、花生酱、花生油、核桃、胡桃、杏仁、咖啡、玉米、蜂蜜、谷物、高粱、大豆、酱、蔬菜、胡椒、辣椒、中药材、烟草、啤酒、小麦、棉籽、燕麦、饲料等。 在检验检疫系统、进出口外贸企业、技术监督、粮食、中药、食品、疾病控制、牛奶等领域有100多家用户 。,OchraTest 赭曲霉毒素分析方法,检测限: 荧光计1 g/kg ，HPLC法 0.25 g/kg 检测范围可至 100 g/kg 精密度好：%CV 10%对于 20g/kg 检测的商品：小麦、大麦、绿咖啡、啤酒、可可粉、玉米、谷物、饲料、葡萄干、坚果、高粱 已有的标准编号：AOAC 2000.03AOAC 2000.09 AOAC 2001.01,FumoniTest 伏马毒素分析方法,检测限：荧光计0.25 mg/kg ，HPLC 0.016 mg/kg 检测范围： 0-10 mg/kg 线形相关系数： r = 0.998 精密度好： %CV 11% 对于1-10 mg/kg 荧光计法与HPLC法之间线形回归系数 r= 0.995 检测的商品：高粱、玉米、啤酒、饲料 标准编号：AOAC 2001.04,ZearalaTest 玉米