《药物分析》02第二章 药物的鉴别试验 (2)

药物的鉴别试验Identification test of drug第二章p 药物的鉴别试验p 药物的杂质检查p 药物定量分析与分析方法验证药品检验工作的基本规律Basic regularity of drug inspectionIdentification test of drugp 鉴别试验的内涵p 鉴别试验的项目p 鉴别试验的方法p 鉴别试验的条件药物的鉴别试验p 根据药物的分子结构，采用化学、物理化学或生物学方法来判断其真伪。 p 鉴别试验用方法仅用于证实贮藏在有标签容器中的药物是否为其所标示的药物，而非对未知物的鉴别。 p 鉴别试验方法应专属，每个品种一般 2 3条。鉴别试验的内涵 Test meaning性状项和物理常数确认 鉴别项下规定的试验 原料药鉴别制剂鉴别鉴别试验的项目 Test items 性 状 （ Description）定义：反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和物理常数等。外 观 溶解度 物理常数外观： 指药物的聚集状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。如二巯基丁二钠的描述为 “ 本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭 ” 。 溶解度： 一定程度上反映了药品的纯度 。药品在不同溶剂中的溶解性能用 “ 极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶 ” 来描述。物理常数 ： 用于药品鉴别，反映其纯杂程度 。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。 性 状 （ Description）熔 点性 状 -固体熔化成液体的温度 熔融同时分解的温度 自初熔至全熔的一段温度 物理常数比旋度 ：在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm且每 1ml中含有旋光性物质 1g的溶液时测得的旋光度。用 表示。吸收系数 ：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。中国药典收载是 。这两种物理常数可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。 性 状 -物理常数依 据 ：某一类药物组成中的阴离子和阳离子的特殊反应或典型的有机官能团反应。中国药典附录收载一般鉴别试验 ：丙二酰脲类、托烷生物碱类、芳香第一胺类有机氟化物类、无机金属盐类、有机酸盐无机酸盐General identification test一般鉴别试验1.有机氟化物类 -取样品 7mg，照氧瓶燃烧法进行破坏，用水 20ml与 0.01mol/l氢氧化钠 6.5ml为吸收液，使燃烧完全后，充分振摇，取吸收液 2ml，加茜素氟蓝试液 0.5ml，再加 12%醋酸钠的稀醋酸溶液 0.2ml，用水稀释到 4ml，加硝酸亚铈0.5ml，即显蓝紫色，同时做空白试验。2.原理一般鉴别试验 2.有机酸 2.1 水杨酸 -A 取供试样品的稀溶液，加三氯化铁试液一滴，即显紫色；原理：水杨酸类与三氯化铁形成配位化合物，中性时是红色，酸性时是紫色。B 取供试样品的中性溶液，加入稀盐酸，析出白色的水杨酸，分离，沉淀在醋酸铵中溶解。一般鉴别试验有机酸盐 FeCl3 反应加稀 HCl，沉淀分解，生成游离白色碱式苯甲酸铁盐（ 赭色沉淀 ） 酒石酸盐 -取供试样品的中性溶液，放于洁净试管中，加氨制硝酸银数滴，置水浴中加热，银即游离形成银镜。芳香第一胺类 -取供试样品 50mg,加稀盐酸 1ml，必要时缓缓加热使其溶解，放冷，加 0.1mol/l亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性 -萘酚数滴，由样品不同形成由橙黄到猩红色沉淀。原理：一般鉴别试验4.托烷生物碱 -取供试样品 10mg，加发烟硝酸 5滴，置于水浴上蒸干，得黄色残渣，放冷，加乙醇2-3滴，加固体氢氧化钾一小粒，即显深紫色；原理：托烷类生物碱有莨菪酸结构，可发生Vitali反应，水解后形成莨菪酸，经过发烟硝酸加热处理，转变为三硝基化合物，再与氢氧化钾醇溶液作用，转变为醌型产物而显紫色一般鉴别试验5.无机金属盐A。火焰燃烧 -钠鲜黄钾紫，钙砖红钡黄绿。B。铵离子在强碱中变成气体，有氨的臭味；遇到被水浸润的红色石蕊试纸，使它变蓝；一般鉴别试验6.无机酸根A。 氯化物 -取供试样品，加稀硝酸酸化，滴加硝酸银数滴，即生成白色凝乳状沉淀；沉淀加氨试剂溶解，再加稀硝酸酸化，沉淀复生成。 但若是生物碱或其他有机碱又如何？B。硫酸盐 -取供试样品，加氯化钡试液即生成白色沉淀；沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解；C.硝酸盐 -取供试样品，放于试管中，加入等量硫酸，小心混合，冷却后沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两层液，接界面显棕色。一般鉴别试验依 据 ：药物分子中的特殊基团或官能团特殊反应或典型的有机官能团反应。如四氮唑法 : C17位上有 - 醇酮基的药物 ,如皮质激素分析。Specific identification test专属鉴别试验四、鉴四、鉴别别方方法法化学鉴别法化学鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法生物学法 HPLC、 GC鉴别法 薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法 呈色反应鉴别法 紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法 沉淀生成反应鉴别法 色谱鉴别法 气体生成反应鉴别法 测定生成物的熔点荧光反应鉴别法 1.呈色反应鉴别法 指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的有色产物。（ 1）三氯化铁呈色反应：用于酚羟基或水解后产生酚羟基（ 2）异羟肟酸铁反应：多用于芳酸及其酯类、酰胺类（ 3）茚三酮呈色反应：用于结构中含有脂肪氨基药物（ 4）重氮化 -偶合显色反应：用于芳伯氨基或潜在芳伯氨基（ 5）氧化还原显色反应及其它颜色反应2.沉淀生成反应鉴别法 （ 1）与重金属离子的沉淀反应 -如卤化物与银；（ 2）与硫氰化铬铵（雷氏盐）的沉淀反应（ 3）其它沉淀反应 -苯甲酸的三氯化铁反应。 多用于生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐。常用的荧光发射形式：（ 1）药物本身可在可见光下发射荧光；（ 2）药物溶液加硫酸后，在可见光下发射荧光如硫酸奎宁；（ 3）药物和溴反应后，于可见光下发射出荧光；3.荧光反应鉴别法（ 4）药物和间苯二酚反应后，发射出荧光及药物经其它反应后，发射荧光。（ 1）大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生氨（胺）气。（ 2）化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体。（ 3）含碘有机药物，经直火加热，可生成紫色碘蒸气；含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生醋酸乙酯的香味。4.气体生成反应鉴别法紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 对比吸收光谱特征对比吸收光谱特征参数参数 max,A(C),E比较吸收度比比较吸收度比值一致性值一致性对比吸收光谱对比吸收光谱一致性一致性红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 对比对比 供试品红外吸收光谱供试品红外吸收光谱 与与 药品药品标准红外光谱标准红外光谱 的一致性，尤其是的一致性，尤其是指纹指纹 一致性。一致性。 -制法，注意事项，制法，注意事项，原料药的原料药的 IR，制剂的，制剂的 IR，ChP,JP,USP的不同的不同核磁共振法核磁共振法 测定结构中测定结构中 H和和 C的情况：化学位的情况：化学位移、峰面积、耦合常数等移、峰面积、耦合常数等质谱法质谱法 将物质离子化后在高真空状态下将物质离子化后在高真空状态下，按离子的质荷比大小分离而实，