药物鉴别课件

第四章药物的鉴别概述鉴别试验： 根据药物的分子结构、理化性质，用规定的方法判断药物的真伪。 只能证实鉴别对象是否为标签所示的只能证实鉴别对象是否为标签所示的药物，不能鉴别未知药物。药物，不能鉴别未知药物。一 、 鉴别试验的项目 性状性状 ：外观、溶解度、物理常数：外观、溶解度、物理常数 一般鉴别试验一般鉴别试验 ： 只能证实某一类药物，不只能证实某一类药物，不能证实是哪一种药物能证实是哪一种药物 专属鉴别试验：专属鉴别试验： 在一般鉴别的基础上，鉴在一般鉴别的基础上，鉴别出是哪一种药物别出是哪一种药物二、鉴别方法要求专属性强、重现性好、灵敏度高、操作快速要求专属性强、重现性好、灵敏度高、操作快速简便等简便等化学鉴别法：化学鉴别法： 呈色反应、焰色反应、沉淀反应呈色反应、焰色反应、沉淀反应光谱鉴别法：光谱鉴别法：红外光谱法： 是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。 主要用于组分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方法不易区分的同类药物， 如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。 图 4-2 阿司匹林的红外吸收光谱图紫外 -可见光谱法鉴别方法：鉴别方法：1.最大吸收波长或最小吸收波长；最大吸收波长或最小吸收波长；2.吸收系数；吸收系数；3.规定一定浓度的供试品溶液在最大吸收波长处的规定一定浓度的供试品溶液在最大吸收波长处的吸光度；吸光度；4.比较吸光度的比值比较吸光度的比值5.比较吸收光谱的一致性。见图比较吸收光谱的一致性。见图图 4-1 色氨酸和苯丙氨酸的紫外吸收光谱图色谱鉴别法： HPLC、 TCL、 PC HPLC高效液相色谱法高效液相色谱法 TCL薄层色谱法薄层色谱法 PC气相色谱法气相色谱法薄层色谱法概述：概述： 一般采用对照品比较法，即将供试一般采用对照品比较法，即将供试品和对照品用同种溶剂配成同样浓度的溶品和对照品用同种溶剂配成同样浓度的溶液，在同一薄层板上点样，展开、显色，液，在同一薄层板上点样，展开、显色，供试品所显主斑点的颜色、位置应与对照供试品所显主斑点的颜色、位置应与对照品的主斑点相同。品的主斑点相同。斑点位置以比移值来表示。斑点位置以比移值来表示。 TLC的应用鉴别：鉴别： 采用与同浓度的对照品溶液，在同一块薄层采用与同浓度的对照品溶液，在同一块薄层板上点样、展开与检视，供试品溶液所显主斑点板上点样、展开与检视，供试品溶液所显主斑点的颜色（或荧光）与位置（的颜色（或荧光）与位置（ Rf）应与对照品溶液）应与对照品溶液的主斑点一致，而且主斑点的大小与颜色的深浅的主斑点一致，而且主斑点的大小与颜色的深浅也应大致相同。也应大致相同。 杂质检查：杂质检查：1.对照品法对照品法2.供试品溶液的自身稀释对照法供试品溶液的自身稀释对照法薄层色谱图10.002% 供试液2 供试液3 0.01% 供试液实例高效液相色谱法方法与判断：方法与判断： 一般规定，按供试品一般规定，按供试品 “含量测定含量测定 ” 项下的高效液相色谱法操项下的高效液相色谱法操作条件进行试验，要求供试品和对照作条件进行试验，要求供试品和对照品色谱峰的保留时间应一致。品色谱峰的保留时间应一致。 图 4-4 HPLC法中香加皮中异香草醛、杠柳毒苷和 4-甲氧基水杨醛的图谱对照品（ A）色谱图 样品（ B）色谱图a.异香草醛 b. 杠柳毒苷 c. 4-甲氧基水杨醛 实例高效液相色谱仪三、 鉴别试验条件被测物的浓度被测物的浓度 ：试剂的用量试剂的用量 ：溶液的温度溶液的温度 ：升高温度，使反应速度加快：升高温度，使反应速度加快溶液的酸碱度溶液的酸碱度 ：合适的酸碱度使反应生成物：合适的酸碱度使反应生成物处于稳定和易于观测的状态。处于稳定和易于观测的状态。 反应时间反应时间 ：反应慢，时间比较长：反应慢，时间比较长干扰物质干扰物质 ：选择专属性更高的鉴别反应：选择专属性更高的鉴别反应 四、鉴别试验的灵敏度和专属性灵敏度：灵敏度： 指在一定条件下，在尽可能稀的溶液中检出尽可指在一定条件下，在尽可能稀的溶液中检出尽可能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度一般用一般用 最低检出量最低检出量 和和 最低检出浓度最低检出浓度 表示表示空白试验：空白试验： 不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果下，按同法操作所得的结果空白试验空白试验 避免避免 “ 假阳性假阳性 ”对照试验：对照试验： 是指用已知样品溶液代替供试品溶液，按同是指用已知样品溶液代替供试品溶液，按同法操作所得的结果法操作所得的结果“ 对照试验对照试验 ” 排除排除 “ 假阴性假阴性 ”专属性：专属性： 是指在其他成分可能存在的条是指在其他成分可能存在的条件下，采用的方法能正确测定出被测件下，采用的方法能正确测定出被测物的特性。物的特性。对于鉴别反应，应能与可能共存的对于鉴别反应，应能与可能共存的物质或结构相似的化合物区分开；不物质或结构相似的化合物区分开；不含被测物的样品，或结构相似的化合含被测物的样品，或结构相似的化合物均应呈负反应。物均应呈负反应。 五、常用物理常数的测定常用的物理常数有：常用的物理常数有：熔点熔点 比旋度比旋度PH值值 相对密度相对密度折光率折光率 熔点测定法定义：定义： 熔点是指一种物质由固体熔化成液熔点是指一种物质由固体熔化成液体时的温度体时的温度 ，一般是指一个范围，即物，一般是指一个范围，即物质熔化时初熔至全熔时的一段温度，也称质熔化时初熔至全熔时的一段温度，也称熔距。熔距。 熔距越小，物质的纯度越高。熔距越小，物质的纯度越高。 目的：目的： 鉴别药物的真伪和纯度鉴别药物的真伪和纯度 方法：方法： 药典规定有三种药典规定有三种第一法第一法 用于测定易粉碎的固体药品；用于测定易粉碎的固体药品；第二法第二法 用于测定不易粉碎的固体药品，用于测定不易粉碎的固体药品，如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等；如脂肪、脂肪酸、石蜡、羊毛脂等；第三法第三法 用于测定凡士林或其他类似物质用于测定凡士林或其他类似物质。当各品种项下未注明时，均系指第一法当各品种项下未注明时，均系指第一法。 熔点测定的装置注意事项1.样品需先干燥后才能测定熔点样品需先干燥后才能测定熔点2.毛细管内装入供试品的量应以高度为毛细管内装入供试品的量应以高度为 3mm为宜；并应研细为宜；并应研细装紧，无气泡装紧，无气泡3.温度计应先进行校正温度计应先进行校正4.遇到有遇到有 “ 发毛发毛 ” 、 “ 收缩收缩 ” 、 “ 软化软化 ” 、 “ 出汗出汗 ” 等现象等现象，不可做初熔的判断，不可做初熔的判断5.熔点管必须洁净。6.熔点管底未封好会产生漏管。7.样品粉碎要细，填装要实，否则产生空隙，不易传热，造成熔程变大。比旋度的测定一、相关概念：一、相关概念：1.旋光度：旋光度： 当平面偏振光通过含有手性碳原子的液体或溶液当平面偏振光通过含有手性碳原子的液体或溶液时，使偏振光的平面发生旋转的现象，称时，使偏振光的平面发生旋转的现象，称 旋光现象旋光现象 ，旋转，旋转的度数称为的度数称为 旋光度旋光度 ，用，用 表示，表示， “ +” 表示右旋，表示右旋， “ ”表示左旋。表示左旋。2.比旋度：比旋度： 当偏振光透过长当偏振光透过长 1dm、每、每 1ml中含有旋光性物质中含有旋光性物质 1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为该物质的的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度称为该物质的比旋度。比旋度。目的：鉴别药物的真伪与纯度目的：鉴别药物的真伪与纯度二、测定方法1.自动旋光仪 2.钠光谱的 D线（ 589.3nm） 3.测定温度为 20 。用读数至 0.01 并经过检定的旋光计。4.同法读取旋光度 3次，取 3次的平均值作为测定结果。 三、计算注意事项 （ 1）每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正）每次测定前应以溶剂作空白校正，测定后，再校正 l次，以确定在次，以确定在测定时零点有无变动。如第测定时零点有无变动。如第 2次校正时发现零点有变动，则应重新测次校正时发现零点有变动，则应重新测定旋光度。定旋光度。（ 2）配制溶液及测定时，均应调节温度至）配制溶液及测定时，均应调节温度至 200.5 （或各品种项下（或各品种项下规定的温度）。规定的温度）。（ 3）供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。如有）供试的液体或固体物质的溶液应不显浑浊或含有混悬的小粒。如有上述情况时，应预先滤过，并弃去初滤液。上述情况时，应预先滤过，并弃去初滤液。（ 4）测定供试品与空白校正，应按相同的位置和方向放置测定管于仪器）测定供试品与空白校正，应按相同的位置和方向放置测定管于仪器样室，并注意测定管内不应有气泡，否则影响测定的准确度。样室，并注意测定管内不应有气泡，否则影响测定的准确度。（ 5）测定管使用后，尤其在盛放有机溶剂后）测定管使用后，尤其在盛放有机溶剂后 ,必须立即洗净，以免橡皮必须立即洗净，以免橡皮圈受损发粘。测定管每次洗涤后，切不可置烘箱中干燥，以免发生变圈受损发粘。测定管每次洗涤后，切不可置烘箱中干燥，以免发生变形，橡皮圈发粘。形，橡皮圈发粘。（ 6）钠灯使用时间一般勿连续使用超过）钠灯使用时间一般勿连续使用超过 2小时，并不宜经常开关。当关小时，并不宜经常开关。当关熄钠灯后，如果要继续使用，应等钠灯冷后再开。熄钠灯后，如果要继续使用，应等钠灯冷后再开。应用：（ 1）药物的鉴别：）药物的鉴别： 测定比旋度测定比旋度（ 2）杂质检查：）杂质检查： 测定旋光度测定旋光度（ 3）药物的含量测定）药物的含量测定 ： 比旋度已知时，精比旋度已知时，精密称取一定量的供试品，配成一定浓度的密称取一定量的供试品，配成一定浓度的溶液，装入测定管中，测定其旋光度，溶液，装入测定管中，测定其旋光度， 计计算含量算含量PH值检查法1.测定装置：测定装置： PH计或酸度计计或酸度计2.定期检定定期检定3.测定前需用标准缓冲液校正仪器测定前需用标准缓冲液校正仪器准确测定准确测定 PH的方法的方法操作注意：1.每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极化水充分洗涤电极 ,然后将水吸尽，也可用然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。所换的标准缓冲液或供试液洗涤。 2.配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过的冷的纯化水，其新沸过的冷的纯化水，其 pH值应为值应为 5.57.0。3.校正后的仪器不得随便搬动或移动，否则校正后的仪器不得随便搬动或移动，否则再使用时须重新校正。再使用时须重新校正。折光率测定1、 光的折射现象：光的折射现象： 当光线从一种介质射到另一种介质当光线从一种介质射到另一种介质时，在分界面上，光线的传播方