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关于制作优质冰冻切片的体会 冰冻切片的种类有很多，随着科技的发展，许多方 法已经被时代遗忘。如今，低温恒冷箱冰冻切片法被普遍 采纳，服务于病理科的急诊工作。冰冻切片利用物理降温 的原理，将新鲜的组织在低温恒冷切片机冷冻后变硬马上 进行切片，适用于快速切片法。在对患者实施手术过程中， 临床医师取出的病变组织需要病理医师快速诊断从而来确 定病变性质，可为决定手术方案、范围及治疗方法提供指 导。因此，只有高质量的冰冻切片，才能保证病理诊断的 准确性，现将其制作体会介绍如下。 1 取材及包埋 手术中的新鲜组织应不加固定液，送到病理科后立 即取材。所取的组织应有针对性，尽量保持组织的原有形 态，避开坏死组织、脂肪、骨组织，并且缝线、钙化区要 剔除。取材过程中组织不能接触水，当组织中含水量高时， 用干纱布吸干后再进行冷冻，以防冰晶形成，取材厚度是 cm cm，大小为 cm cm。将取好的组织块立即放在冷冻托 上，加胶水覆盖组织块。当组织较小或较薄时，可先在冷 冻托上做一小冻台，将组织放在冷冻托的中央位置，再加 少量胶水于组织上，稍冻后用冷冻锤压平，再进行切片， 这样方能切出完整的片子。 2 切片 我科用的是 LeicaCm 1950 冰冻切片机，平常工作中， 冰冻切片机长期处于待机备用状态，可将箱体温度、冻头 温度设定为-20左右。当然，不同的组织要求的温度也不 同，要根据情况区别对待，随时调整。例如细胞多的组织 及肿瘤，温度就要求是-20;含脂肪较多的组织则要-35 冷冻，并且要冷冻 2 m in3min，直到看到包埋剂发白变硬 后再进行切片(用羽毛牌 C-35 一次性刀片，只用于冰冻切 片机。切片的准备工作应提前做好，可以节省时问。一切 准备就绪，开始切片，首先进行组织的粗修，粗修的厚度 是 45 m 50 m，粗修到暴露组织的最大平面。值得注意的 是，修片时要观察重点病变的微小病灶，防止因为没有切 到位而发生漏诊。粗修后要用毛笔清除机头标本托及切片 机上的组织碎屑，防止交叉污染。然后再以转动大轮推进 的方式进行切片，切片时用力要均匀，动作要轻柔，切成 厚度是 4 m，完整、平坦、无褶的薄片，直接附贴在干净的 载玻片上。 3 固定、染色 切片完成后，要立即放在固定液中，不能等切片晾 干后固定，否则易发生细胞退变，使细胞核着色不佳，染 色质不清晰而影响诊断，我科使用的固定液是 95%酒精。固 定 1 min 后进行染色，随后自来水清洗，再苏木素滴染加 温(酒精灯加温)，1%盐酸酒精分化，水洗后饱和碳酸锂返 蓝，伊红染色 3s5s，从低浓度到高浓度酒精脱水，二甲苯 透明，中性树胶封固。这样，一张高质量的冰冻切片就完 成了。 冰冻切片的质量受多方面因素的影
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