藤茶对食品的防腐抑菌研究.doc

学科分类号 0818 本科生毕业论文(设计)题目（中文）： 藤茶对食品的防腐抑菌研究 （英文）： the preservative research of rattan in food学生姓名： 彭璐璐学号：0512402025 系别： 生命科学系 专业： 生物工程指导教师： 刘胜贵 起止日期：2008.1-2009.5 2009年5月16日 怀化学院本科毕业论文（设计）诚信声明作者郑重声明：所呈交的本科毕业论文（设计），是在指导老师的指导下，独立进行研究所取得的成果，成果不存在知识产权争议。除文中已经注明引用的内容外，论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的成果。对论文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确的方式标明。本声明的法律结果由作者承担。本科毕业论文（设计）作者签名：彭璐璐2009年5月16日 目 录摘 要 1关键词1abstract 2key words2前言31 材料与方法41.1 材料41.1.1 试验样品41.1.2 生化试剂41.1.3 供试菌种4 1.1.4 供试食品41.1.5 实验仪器51.1.6 培养基51.2 方法51.2.1 水提取物制备51.2.2 菌悬液制备51.2.3 抗微生物活性试验61.2.4 最低抑菌浓度（mic）测定6 1.2.5 食品溶液制备 7 1.2.6 抑菌食品溶液制备 7 1.2.7 食品防腐测验 82 结果 92.1不同月份显齿蛇葡萄叶抗微生物活性。 10 2.2 7月份显齿蛇葡萄叶最低抑菌浓度（mic） 102.3抑菌食品溶液防腐实验结果112.3.1牛奶抑菌食品液 112.3.2豆浆抑菌食品液 122.3.3西瓜抑菌食品液 132.3.4肉汤抑菌食品液 143 讨论 15参考文献 16致 谢 17藤茶对食品的防腐抑菌研究摘 要 为研究藤茶类植物对食品的防腐抑菌效果，采摘显齿蛇葡萄叶作为试验材料，以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌、腐生葡萄球菌6种微生物为试验菌株，用药敏纸片扩散法测定不同月份的显齿蛇葡萄叶抑菌圈直径，通过二倍稀释法测定mic值，以平板菌落计数法进行食品防腐测验。结果表明：叶提取物对腐生葡萄球菌抑菌作用最强，不同月份的抑菌圈直径分别为9.1、18.2、12.3mm；抑菌效果最强的7月份叶mic为0.0078 g/ml；1/2mic、1mic浓度抑菌食品溶液对细菌生长有一定的抑制作用，但防腐作用都不太明显，而2mic、和4mic浓度抑菌食品溶液都可相对的延长食品溶液保质时间，相比较对肉汤和牛奶防腐作用更强，对西瓜和豆浆防腐作用较弱。结论说明：藤茶植物有抑菌作用，而且对肉类、奶制品、水果和豆制品都有防腐作用。关键词显齿蛇葡萄；水提取物；药敏纸片扩散法；二倍稀释法；菌落计数法 the preservative research of rattan in food abstract for the study of the rattan plants preservative effect in food, picked some leaves of ampelopsis grossedentata as materials, adopted e.coli, staphylococcus aureus ,proteus vulgaris, salmonella typhimurium, bacillus subtilis, staphylococcus saprophyticas as microbial strains, used drug diffusion study the ampelopsis leaves bacteriostasis zone diameter for different months, made double dilution method study their mic, counted the number of colonies study its antiseptic effect in food. the results showed that there is the strongest inhibitory effect for staphylococcus saprophyticas and the biggest bacteriostasis zone diameter of 9.1, 18.2,12.3 millimeter, and the ampelopsis leaves for july had the strongest inhibitory effect and its minimum bacteriostasis concentration is the 0.0078g / ml, and the foods bacteriostasis solution of 1/2mic, 1mic concentration had inhibitory effect for bacterial growth, but less obvious role in anti-corrosion, and the foods bacteriostasis solution of 2mic, 4mic concentration could relatively extend time which is the shelf life of food solution, compared each other, the meat and milk had better effect than fruit and soy. the result showed that rattan leaves had preservative effect for meat, milk, fruit and soy.key words ampelopsis grossedentata; water extract; drug diffusion in disk ; double dilution ; count the number of colonies;前言藤茶即显齿蛇葡萄(ampelopsis grossedentata)系葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物，为粤蛇葡萄的变种。显齿蛇葡萄的嫩叶经过杀青、揉捻、烘干而成的“保健茶”制品称为藤茶，既可用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疱疔等症，又可日常冲泡饮用，清凉解渴，是典型的药食两用植物。藤茶的形态特征为：小枝圆柱形，有显著的纵棱纹，无毛，卷须2叉分枝；相隔2节间断与叶对生、叶为12回羽状复叶，2回羽状复叶者，基部一对为3小叶，小叶卵圆形、卵椭圆形、长椭圆形，长25厘米，宽12.5厘米，顶端急尖或间尖、基部近圆形，边缘每侧有25个锯齿，叶面绿色，背面浅绿色，两面均无毛；聚伞花序，5月现蕾，6月开花，花小，黄绿色，非常袖珍点缀于藤蔓上灿若繁星；浆果紫黑色，可食用，像葡萄一样开胃。藤茶的适应性很强，喜温暖湿润山坡的环境，一般生长在海拔2001300米的沟谷林中或灌木丛里，广泛分布于长江以南的广东、广西、湖南、湖北西部、江西、福建、云南、贵州等省，喜湿润而略偏酸性的红黄壤或肥沃砂质壤土，在砂地或盐碱地上生长发育严重受阻或不能生存。由于生长环境远离工矿区、城镇、交通线、人类活动场所及医院、避开了三废污染及病原生物污染。显齿蛇葡萄以茶叶的形式在食品中的应用有着数百年的历史,把显齿蛇葡萄加工成具有高品质的茶叶在显齿蛇葡萄应用于食品行业过程中显得相当的重要。为得到一条能很好的把显齿蛇葡萄加工成茶叶的工艺,易诚根据传统的民间藤茶加工工艺设计出三条加工工艺,对藤茶成品和成品的茶水以感官评定,选取了一条最佳的工艺:原料分级清洗摊放杀青揉捻焖青晒干冷却回润密封保存,并通过实验设定了关键工艺参数:将藤茶进行分级后在150-160的温度下杀青,经手工揉捻20min-25min,40-50下焖青6h12h,太阳光下晒或烘至产品表面呈白霜状物质出现。目前不少学者对显齿蛇葡萄的药理功能已进行了一系列的研究。刘胜贵等人使用药敏纸片法、试管二倍稀释法测定了显齿蛇葡萄对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡沙门氏杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌等5种细菌的抑菌效果，结果表明:显齿蛇葡萄的根、茎、幼叶提取物对5种细菌均有抑菌作用,以幼叶提取物抑菌效果最强,说明显齿蛇葡萄具有广谱高效的抑菌作用,但不同器官的抑菌作用有较大的差别。曾春晖等对藤茶中aps体外抗菌实验表明:aps对标准金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有直接抑制作用,且与药物剂量呈正相关。广西中医学院覃骊兰全面分析了藤茶的化学成分及药理作用研究进展，说明了藤茶有效成分为黄酮类物质,如蛇葡萄素、双氢杨梅树皮素、杨梅树皮素、福建茶素、龙涎香醇、-谷甾醇、杨梅黄素、杨梅甙等;显齿蛇葡萄总黄酮为其主要化学成分,含量高达45.52%，双氢杨梅树皮素(aps)是含量最高的黄酮类化合物,又名双氢杨梅素、二氢杨梅素、福建茶素、白敬素、蛇葡萄素。张友胜等从显齿蛇葡萄中分离出4种化合物,分别是芦丁、没食子酰-d-葡萄糖、没食子酸乙酯和没食子酸。王华夫等用gc和ms系统测定显齿蛇葡萄中的香气组成,鉴定出28种香气成分,占香精油总量的64%,主要成分为反-2-己烯醛、乙酸顺-3-己烯酯、三甲基吡嗪、苯乙醛、-萜品醇、水杨酸甲酯、香叶醇、紫罗酮、顺茉莉酮、雪松醇、6,10,14-三甲基地-十五烷酮等。中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所对藤茶的营养成分进行了分析,结果如下:每100 g 藤茶产品含水分9. 4 g、热量291kcal 、蛋白质20. 4 g、脂肪0. 8 g、胡萝卜素5. 23 mg、维生素e 6. 32 mg、铁10. 1 mg、锌1. 58 mg、钙411. mg、铜0. 67 mg、镁121. 6 mg、锰68. 9 mg、钾468. 9mg、磷344. 1 mg、膳食纤维14. 6 g、硒10. 62g。与茶叶类相比,其营养成分较齐全,优于一般茶叶,可与我国名茶相媲美,而硒的含量高于绿茶和花茶。唐瑛的实验证明,agtf能极显著抑制h2o2诱导的小鼠红细胞溶血,有较强的抗h2o2诱导氧化的活性;小鼠血清体外抗氧化实验显示,agtf可明显增加小鼠血清抗活性氧能力,从而表明agtf可增加小鼠血清和红细胞的抗氧化损伤能力。伍杨等实验证明凤鸣藤茶能有效降低小鼠体内脂质过氧化水平,防止体内抗氧化酶受自由基诱导的氧化损伤,显著增强机体抗氧化能力。中国医学科学院药物研究所将京湘牌中国藤茶用水(醇) 提取其有效成分,并进行抗菌、抗病毒筛选,结果表明,提取物对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有抗菌活性,因此具有广普抗菌作用,其中对5 株金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和肺炎杆菌抗菌活性最强;对流感甲型及乙型病毒均有抑制作用，根据实验结果,京湘牌中国藤茶对流感、肺炎、咽喉炎、结膜炎等病毒与细菌性感染疾病有预防及治疗作用。这些研究全面、系统地分析了显齿蛇葡萄的主要生化成分的含量及组成；探明显齿蛇葡萄的抗菌效果及药理。结果表明：显齿蛇葡萄及其提取物具有多种保健作用,包括抗炎镇痛、止咳、祛痰,保肝护肝、减轻乙醇中毒,抗高血压、消脂、抗肿瘤。因此藤茶是一种非常宝贵的植物资源，我们要合理的开发利用。 为发展藤茶资源，许多学者通过选择显齿蛇葡萄嫩茎，采用不同培养基质、不同浓度、类型的生长调节剂处理，对显齿蛇葡萄绿枝扦插繁殖技术进行了研究，同时选择不同的培养基，不同浓度、类型的激素在不同条件下进行显齿蛇葡萄组织培养育苗试验的研究。在此基础上，以显齿蛇葡萄叶为原料进行藤茶手工加工和藤茶机械加工工艺的研究；以加工的藤茶为原料，进行藤茶袋泡茶及藤茶饮料生产工艺的研究。使之在不影响显齿蛇葡萄生态资源的情况下，能尽可能得满足人们对它在茶饮用和作为药物原材料上的需求。1 材料与方法1.1 材料 1.1.1 试验样品 显齿蛇葡萄叶，于2008年4月、7月、11月采自湖南通道侗族自治县。1.1.2 生化试剂 蛋白胨（生化试剂，上海东海制药厂出品），酵母浸粉（生化试剂，北京奥博星生物技术责任有限公司），琼脂粉（生化试剂，北京奥博星生物技术责任有限公司），nacl（分析纯，成都市金山化工试剂厂），naoh（分析纯，天津市化学试剂批发部经销）。1.1.3 供试菌种 大肠杆菌(escherichia coli )，金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus cctccab91053)，普通变形杆菌(proteteus vulgaris cctccab91103)，鼠伤寒沙门氏菌（salmonella typhi），枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)，腐生葡萄杆菌(staphylococcus saprophytic)，以上菌种均由怀化学院微生物学实验室提供。1.1.4供试食品 牛奶，豆浆，鲜猪肉，新鲜西瓜均为市售。1.1.5 试验仪器 立式压力蒸汽灭菌器（yxq-ls-50s1，上海博迅实业有限公司医疗设备厂），电热恒温培养箱（dhp-2000型，天津市华北实验有限公司），cj型水平层流净化工作台（苏州洁净技术研究所制造），sigma3k-18型离心机(德国sigma公司生产)，qyq-1000-ul/qyq- 200-ul移液枪（北京青云航空仪表有限公司生产）。1.1.6 培养基 lb(luria-bertani)液体培养基：蛋白胨10g，nacl 10g，酵母粉5g，用1mol/l naoh调节ph 7.0，蒸馏水定容至1000 ml。lb固体培养基：在lb液体培养基中加1.6%的琼脂粉。于0.1 mpa、121下灭菌1520 min，置于洁净环境备用。1.2 方法1.2.1 水提取物制备 显齿蛇葡萄提取物制备方法按照文献6进行改进。将显齿蛇葡萄叶洗净，于60恒温箱中烘干至恒重，用组织粉碎机粉碎后，称取4月、7月、11月叶粉末每种30g，分别加入100 ml蒸馏水，待煮沸后再用文火煎30 min，滤出煎液，在滤渣中加100ml蒸馏水再用文火煎30 min，把两次煎液混合，于8 000 r/min离心10 min，去除沉淀，并将煎液浓缩至30 ml，制备成的提取物浓度为1 g/ml， 4冰箱保存备用。1.2.2 菌悬液制备 菌悬液制备方法按文献进行。将供试菌种分别接种在lb固体培养基上，37 活化培养24 h，挑取活化后的菌落与无菌生理盐水中混合，并用生理盐水调至0.5 mcfarland单位的标准接种物，即为11082108 cfu/ ml的菌悬液浓度。再用无菌生理盐水按10倍稀释法将标准接种物配成106 cfu/ ml的菌悬液。1.2.3 抗微生物活性试验 将滤纸打成直径为6 mm的圆形滤纸片，灭菌、烘干后放入显齿蛇葡萄提取物中充分浸泡，取出后低温烘干，制成药敏纸片。按照固体培养基的制备方法准备数量充足的固体平板，用200 ul移液枪吸取0.1 ml浓度为106 cfu/ ml的菌悬液于含lb固体培养基的平板中央，用玻璃涂棒在超净工作台上的酒精灯火焰周围利用无菌操作将菌液均匀涂布于平板上。含菌平板倒置干燥约30 min后，用镊子取药敏纸片均匀贴在平板上，每个平板贴3个药敏纸片，相对应地贴好标签。20 min后，放入37 恒温培养箱中倒置培养24 h。测量抑菌圈直径，以上实验重复三次。1.2.4 最低抑菌浓度（mic）测定 在无菌条件下，将无菌试管分成5大组，每组10支。第1支试管中加入1 ml2倍浓度的lb液体培养基，其余各支试管加入1 ml lb液体培养基，再向第1支试管中加入1 ml提取液后混匀，然后从第一支试管中取1 ml溶液到第二支试管中混匀，以此类推，一直到加入第十支试管混匀后，从第十支试管中取出1 ml溶液弃取。结果使各管中的提取液浓度呈二倍稀释变化。然后向各管中加入0.1 ml的含1106 cfu/ml的细菌悬液，将培养物置于37恒温培养箱中培养24 h。观察培养物生长情况，测定mic值。1.2.5食品溶液制备 牛奶和豆浆加热煮沸4 冰箱保存备用。鲜猪肉用捣碎机捣碎成泥后，加100ml蒸馏水用文火煮50min后取汤汁4 冰箱保存备用。新鲜西瓜在无菌条件下打开取汁4 冰箱保存备用。1.2.6不同提取物浓度的食品溶液制备按7月份显齿蛇葡萄最低抑菌浓度配制不同提取物浓度的食品溶液。如下表1-1所示数据配制后将制备液装入容器中4 冰箱保存备用。提取液体积（ml）食品液体积（ml）总体积（ml）提取物最终浓度（g/ml）00101001/2mic0.6259.375100.00391mic1.258.75100.00782mic2.57.5100.01564mic55100.0313 1-1表1.2.7食品防腐实验将配制好的不同浓度的抑菌食品液分装入大试管中，每支试管10ml共20支试管。将其放入37恒温培养箱中培养，在培养期间以不同的时间4小时、8小时、10小时、12小时、16小时、20小时为间隔每次取0.1 ml的样品溶液于含lb固体培养基的平板中央，用玻璃涂棒在超净工作台上的酒精灯火焰周围利用无菌操作将菌液均匀涂布于平板上。放入37恒温培养箱中倒置培养24 h。第二天观察细菌生长情况，并通过菌落计数法来记录细菌的生长情况。2 结果2.1 不同生长时期显齿蛇葡萄抑菌效果通过三次重复的药敏纸片试验，得到显齿蛇葡萄提取物抑菌圈直径的平均值（包含药敏纸片部分），结果如表2-1：实验菌种提取物抑菌圈直径（mm）4月份7月份11月份escherichia coli8.017.011.3staphylococcus aureus7.817.612.1staphylococcus saprophytic9.118.212.3bacillus subtilis7.516.810.8proteteus vulgaris7.016.110.0 2-1表显齿蛇葡萄提取物对所有供试菌都显示了抗菌活性。其中对腐生葡萄球菌抑菌作用最强，其7月份的显齿蛇葡萄提取物的抑菌圈直径达到18.2 mm；其次是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，对枯草芽孢杆菌和普通变形杆菌抑菌活性相对较弱，变形杆菌4月份的抑菌圈直径只有7.0 mm。三个不同生长时期的显齿蛇葡萄提取物抑菌效果最强的是7月份的显齿蛇葡萄，抑菌效果最弱的是4月份的显齿蛇葡萄。2.2 7月份显齿蛇葡萄叶最低抑菌浓度（mic）7月份显齿蛇葡萄叶提取液对7供试菌种的最低抑菌浓度如下表2-2所示： 供试菌种mic（g/ml）escherichia coli0.0078staphylococcus aureus0.0078 staphylococcus saprophytic0.0039 salmonella typhi0.0078 proteteus vulgaris0.0156 2-2表7月份显齿蛇葡萄提取物对腐生葡萄球菌抑菌效果最强，mic为0.0039 g/ml；对普通变形杆菌抑菌效果最弱，mic为0.0156 g/ml。但对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌大部分供试菌种来说其最低抑菌浓度为0.0078g/ml。2.3 不同提取物浓度的食品溶液防腐实验结果2.3.1牛奶食品溶液不同提取物浓度的牛奶食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表2-3-1所示：时间0（对照）1/2 mic1 mic2 mic4 mic 4h4.3*1037.5*103 - - 8h5.8*1044.35*1047.1*102 - - 12h2.27*10512.9*10412.4*104 - - 16h2.29*1057.78*1052.6*105 - - 20h1.6*1061.228*1064.4*105 - - 24h1.6*1064.8*1065.7*105 - - 32h+4.8*1061.06*1062.45*104 - 40h + +1.06*1068.43*105 - 48h + + +8.8*105 - 56h + + +2.4*106 - 64h + + +2.4*106 - 72h + + + + - 80h + + + +2.3*102 90h + + + +5.8*103 106h + + +1.46*104 120h + + + +2.0*105 124h + + + +1.86*106 136h + + +1.86*106 2-3-1表 “-”表示不长菌，“+”表示细菌成片生长趋于稳定。对以上数据做细菌生长对数图所示(x表示时间，y表示细菌生长对数；b-f分别代表0、1/2、1、2、4mic的浓度)：不同提取物浓度的牛奶食品溶液防腐效果有很大差别。1/2mic浓度牛奶食品溶液无防腐作用，不能延长牛奶的抑菌时间，并且与0mic一样在020 h细菌呈对数生长；1mic浓度牛奶食品溶液防腐效果不明显，延长抑菌时间4小时，在432 h呈对数生长；2mic可以延长抑菌时间24 h，在2456 h呈对数生长；4mic牛奶食品溶液防腐效果最明显，可延长食品溶液抑菌时间72h ，在72124h细菌也呈对数生长。2.3.2豆浆食品液不同提取物浓度的豆浆食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表2-3-2所示：时间0mic（对照）1/2 mic1 mic2 mic4 mic 4h1.05*1061.5*105 3.49*103 - 8h3.5*1069.35*1055.28*104 - - 12h7.3*1066.5*1064.59*106 - - 16h7.3*1073.65*1073.2*107 - - 20h7.3*1073.65*1073.2*1076.9*103 - 24h+2.6*105 - 32h+ +5.3*1062.08*102 40h + +2.28*1074.6*104 48h + + +2.28*1071.86*105 56h + + +2.27*106 64h + + + +3.49*107 72h + + + +3.49*107 2-3-2表 “-”表示不长菌，“+”表示细菌生长趋于稳定对以上数据做细菌生长对数图 (x表示时间，y表示细菌生长对数；b-f分别代表0、1/2、1、2、4mic的浓度)：不同提取物浓度的豆浆食品溶液防腐效果不同。其中1/2mic、1mic豆浆抑菌食品溶液无防腐作用，不能延长食品抑菌时间；2mic豆浆食品溶液防腐效果较强，可延长食品溶液抑菌时间16h，在1640 h细菌生长的对数图成抛物线；而4mic豆浆食品溶液可延长食品溶液抑菌时间24 h，在2464 h细菌呈对数生长。2.3.3西瓜食品溶液不同mic浓度西瓜抑菌食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表2-3-3所示：时间0mic（对照）1/2 mic1 mic2 mic4 mic 4h6.0*1022.0*102 5.2*102 - 8h4.96*1061.8*1051.46*104 - - 12h3.85*1072.0*1074.1*106 - - 16h3.85*1072.0*1074.9*107 - - 20h+4.9*1078.1*104 - 24h+1.3*106 - 32h+ +2.4*1071.8*102 40h + +2.4*1073.37*103 48h + + +8.39*104 56h + + +1.0*106 64h + + + +4.8*107 72h + + + +4.8*107 2-3-3表 “-”表示不长菌，“+”表示细菌生长趋于稳定不同mic浓度西瓜抑菌食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表生长曲线对数图所示(x表示时间，y表示细菌生长对数；b-f分别代表0、1/2、1、2、4mic的浓度)：不同mic浓度西瓜抑菌食品溶液防腐效果不一样。其中1/2mic、1mic西瓜抑菌食品溶液防腐作用很弱。2mic和4mic西瓜抑菌食品溶液防腐效果较强，分别延长食品溶液保质时间约20h、52h。2.3.4肉汤抑菌食品液不同mic浓度肉汤抑菌食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表2-3-4所示：时间0mic（对照）1/2 mic1 mic2 mic4 mic 4h1.08*104- - - 8h3.3*1061.38*105- - - 12h8.13*1066.0*105- - - 16h2.27*1071.34*1071.03*106 - - 20h2.27*1071.34*1072.68*107 6.0*102 - 24h+2.68*107 9.3*104 - 32h+ +2.27*106 - 40h + +3.6*106 - 56h + + +3.6*107 - 64h + + +3.6*107 - 72h + + + + - 92h + + + +- 116h + + + +- 140h + + +4.72*103 148h + + + +8.35*104 156h + + + +2.33*105 164h + + +2.27*106172h+6.83*107180h+6.83*107 2-3-4表 “-”表示不长菌，“+”表示细菌成片生长无法记数不同mic浓度肉汤抑菌食品溶液防腐实验细菌生长情况如下表生长曲线对数图所示(x表示时间，y表示细菌生长对数；b-f分别代表0、1/2、1、2、4mic的浓度)：不同mic浓度肉汤抑菌食品溶液防腐效果有很大差别。其中1/2mic肉汤抑菌食品溶液防腐作用很弱。1mic肉汤抑菌食品溶液与1/2mic相比防腐作用要强，但延长食品溶液保质时间并不长。2mic肉汤抑菌食品溶液防腐效果较强，可延长食品溶液保质时间约40h。4mic肉汤抑菌食品溶液防腐效果很强，可延长食品溶液保质时间约156h。7月份显齿蛇葡萄叶提取液对四种食品的防腐作用相互比较，其中1/2mic、1mic浓度抑菌食品溶液对细菌生长有一定的抑制作用，但防腐作用都不太明显。而2mic、和4mic浓度抑菌食品溶液都可相对的延长食品溶液保质时间，其中7月份显齿蛇葡萄叶提取液对肉汤和牛奶防腐作用更强，对西瓜和豆浆防腐作用相对较弱。3 讨论由于目前化学食品防腐剂的泛滥，对人类的身体健康造成了十分严重的危害，寻找新的天然抗菌防腐剂已成为食品防腐研究的热点。从民族本土传统抗菌植物中筛选新的抗菌防腐植物是食品防腐研究与开发的有效途径，并已取得了进展。本实验使用的显齿蛇葡萄叶是湖南通道侗族人们日常生活中饮用的茶叶中的最为常见的一种，并且指导老师刘胜贵老师早前已通过实验证明其有很强的抑菌作用。通过进一步实验研究，证实了显齿蛇葡萄叶对肉类、奶制品、水果和豆制品都有防腐作用，为开发新的天然抗菌防腐剂奠定了科学基础。显齿蛇葡萄叶提取物良好的抗微生物作用，也可以用于治疗感染性疾病的研究。其中的抗微生物活性物质成分有待更进一步研究。本试验使用药敏纸片扩散法和试管二倍稀释法分别测定了微生物抗菌活性，显示了两种实验结果相关性。并通过以上两个实验的结果利用菌落计数法测定微生物的生长情况以反映食品防腐抑菌效果。药敏纸片扩散法结果取决于抗菌有效成分的溶解性和在琼指培养基内的扩散性，是一种半定量的研究方法，是初步筛选抗菌植物有效途径。试管二倍稀释法则是一种精确测定抗菌活性的方法。菌落计数法是通过数菌落的方式直观的反映出细菌的生长状况。研究结果表明，显齿蛇葡萄叶对肉类、奶制品防腐抑菌作用较强，但对水果和豆制品的防腐抑菌效果稍弱。但由于显齿蛇葡萄叶提取液有很深的颜色，添入食品中会对其外观造成很大影响，进而影响食品的销售。因此将显齿蛇葡萄叶开发成新的天然抗菌防腐剂并投入食品工厂大批量添加生产目前还不适宜。需要更进一步的研究。参考文献1 rabe t, van j: antibacterial activity of south african plants used for medicinal purposes. j ethnopharmacol 1997, 56:81-87.2 olukoya, d.k., idiaka, n., odugbemi, a. antibacterial activities of some plants in nigeriaj. ethonopharm., 2003,4:1522.3 j