表面抗原定量检测在抗病毒治疗中的应用价值

表面抗原定量检测在抗病毒表面抗原定量检测在抗病毒 治疗中的应用价值治疗中的应用价值 一一 HBsAg定量与乙肝免疫控制 二 HBsAg 定量 在 peginterferon 治疗 中可以用来预示持续免疫控制? 三 HBsAg定量用来预示NA治疗的持续应答? 四 应用中HBsAg的定量检测 一、HBsAg定量与乙肝免疫控制 Chan HL, for GPs-CHB Study Group J Hepatol 2011;55:1121-31 持久免疫控制（非活动性携带状态） 实现慢乙肝抗病毒治疗目标的关键步骤 HBeAg阳性 慢乙肝 HBeAg阴性 慢乙肝 HBV DNA ALT 抗HBe 免疫耐受期免疫清除期激活免疫控制期 非活动性携带状态 摘自Wong 抗HBe: HBeAg抗体 (血清学转换) 慢乙肝: 慢性乙型肝炎; HBV DNA: 乙肝病毒DNA NAs治疗期间发生的HBeAg血清转换 停药后应答不持久 1. 1. Lau et al. NEJM 2005Lau et al. NEJM 2005； 2. Lau et al. EASL 2006; 3. 2. Lau et al. EASL 2006; 3. Chang et al. J Viral Hepat 2009Chang et al. J Viral Hepat 2009 * *患者来自长期研究患者来自长期研究 EOT: EOT: 治疗末治疗末 72/27187/27173/172 HBeAg血清学转换率 (%) 50 40 30 20 10 0 70/354 EOT 20% 54/354 治疗结束后 (6个月) 15% 27% EOT 32% 治疗结束后 (6个月) 42%* (1年) 疗程: 48周 派罗欣1,2恩替卡韦3 治疗结束后 在慢乙肝中HBsAg和HBV DNA 的不同意义 HBV DNAHBsAg 检测物Dane 颗粒Dane 颗粒 和 亚病毒颗粒 病毒学反映HBV 病毒的复制情况反映的是cccDNA的水平 临床意义抑制病毒复制感染的肝细胞的免疫清除 HBsAg定量水平与免疫控制密切相关 免疫控制期患者的免疫控制期患者的HBsAgHBsAg水平最低水平最低 1 1 Chan HLY, et al. Hepatology 2010 HBsAg (log IU/mL) 免疫耐受 (7) e+ 活动性 CHB (25) e 转换 (17) e- 活动性 CHB (46) e- 非活动性CHB (22) 117例慢性乙肝患者 随访9916 个月; 平均17次访视 (8-49) 对于HBeAg（-）的慢乙肝的患者，低水平 的HBsAg意味着可能发生HBsAg的清除 HBsAg 100 IU/ml HBsAg 100 IU/ml Log rank test P20,000) 54% 26% 15% 74/13655/2118/52 P20,000) 57% 32% 16% 51/9072/22314/86 Piratvisuth et al. APASL 2010 Week 12Week 24 Week 12 HBeAg-阳性患者/ 派罗罗欣治疗疗48 周 NEPTUNE研究确认： 治疗过程中HBsAg的水平与治疗应答相关 e+ HBsAg at week 24 (IU/mL) HBeAg seroconversion 6 months post-treatment (%) 60 50 40 30 20 10 0 Low (20,000) 57% 35% 0% 26/4618/52 HBsAg at week 12 (IU/mL) 治疗疗后6个月HBeAg转换转换率 (%) 60 50 40 30 20 10 0Low (20,000) 58% 42% 0% 18/3126/62 Liaw YF, Jia J, Chan HL, et al. Hepatology 2011 Week 24 0/16 0/21 可以提示早期停药药 Week 12 激励患者 Week 24 给予患者更多信心 23% 34% N=90/399 N=136/399 使用PEG-IFN-2a +/- lamivudine 治疗疗的HBeAg-positive 患者， HBsAg 20000 IU/ml22%16%13%15% 1 log decline NANA13%75% Sonneveld et al. Hepatology 2010, Piratvisuth et al. Hepatology 2011, Lau et al., EASL 2009, Chan et al., Aliment Pharmacol Ther 2010 HBsAg in HBsAg in HBeAg HBeAg 阳性的慢乙肝患者：阳性的慢乙肝患者： HBsAg HBsAg 水平对于水平对于PEG-IFN-2a治疗 预示价值 在治疗疗后6个月获获得 HBsAg清除(N=15/74) 在治疗结疗结束后6个月 获获得HBeAg 血清学 转换转换(N=74/136) 54% 20% 对对于HBeAg阳性的患 者， 在治疗疗24周时时 HBsAg 20,000 IU/mL 鉴别应答佳者(PPV)鉴别非应答者(NPV) e+ e+ HBsAg 有助于鉴别应答者和复发者 Moucari et al. Hepatology 2009 HBeAg-阴性患者 治疗过程中 HBV DNA 的水平变化 持续应答 HBV DNA (Log copies/mL) 治疗过程中HBsAg 变化和应答 的关系 0 1 2 3 4 5 6 7 BLW12W24W48W72W96 Follow up PEG-IFN 非应答 复发 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 PEG-IFNFollow up BLW12W24W48W72W96 0 HBsAg (Log IU/mL) 结合HBsAg and HBV DNA 可以预测 HBeAg-negative患者的SVR 102 患者Pegasys 治疗48周 No N = 54 (53%) Yes N = 48 (47%) 1 log4313 (30%)S loss at year 3 1 log1554 (3%) Marcellin APASL 2010 Abs PP209; Brunetto, et al, Hepatology 2009 治疗后5年获得HBsAg清 除(N=15/29) 在治疗后一年 ,获得 HBV DNA 10,000 copies/mL(N=29/67) 43% 52% 2424周时周时HBsAgHBsAg下降可以预示未来的下降可以预示未来的HBsAgHBsAg的的 清除清除 *56% of patients achieved HBsAg decline 10% at week 24 持续免疫控制 Marcellin et al. APASL 2010 HBeAg-negative 患者 ：在治疗24周时 HBsAg水平较基线水 平下降10%* 应应应应用用HBsAgHBsAg指指导导导导RGTRGT治治疗疗疗疗的价的价值值值值 Week 24: HBeAg-阴性 10%HBsAg下降 Week 12 and 24: HBeAg-阴性 1 logRapid 1 log20% (32)20% (32)25% (8)25% (8) Slow 1 log IU/ml reduction (N=5) 100 IU/ml And 1 log IU/ml reduction (N=40) 100 IU/ml Or 1 log IU/ml reduction (N=8) 在治疗结束后12个月的 HBV DNA 200 IU/ml 5 patients 100% 0 patients 0% 4 patients 50% 治疗结束时HBsAg 的水平 PPV = 100% NPV = 100% Chan HL, et al. Antivir Ther 2011 治疗结束时的HBsAg 水平可以预示 长达5年的持续应答 5年后的总累计持续应答率为43% Chan HL, et al. Antivir Ther 2011 治疗结束时的HBsAg 水平可以预示 累计的 HBsAg清除的几率 5 年时HBsAg累计清除率是 23% Chan HL, et al. Antivir Ther 2011 按照APASL推荐的停药标准/Guangxi N=62 治疗结束时HBsAg的水平 100 IU/ml N=11 100-1000 IU/ml N=20 1000 IU/ml N=31 复发HBV DNA 1000 copies/ml N=1 (10%)N=17 (55%) 治疗3个月时HBV DNA水平 1000 copies/ml N=18 1000 copies/ml N=2 N=4 (22%)N=2 (100%) 治疗结束时HBsAg的水平可以预示停药后复 发的风险 Liang Y, et al. Aliment Pharmacol Ther 2011;34:344-52. HBsAg QHBsAg Q与与 HBV DNA HBV DNA 的临床应用的临床应用 HBV DNAHBsAg Q 自然史诊断高风险病人诊断非活动乙肝 Peg 干扰素(预测无应答者)预测应答作为 RGT 的基础 NA检测药物成效及耐药断定停药时间 四、应用中HBsAg的定量检测 如何实现HBsAg 的定量检测？ 通过计算实现定量的方法通过计算实现定量的方法 定性试剂的定量应用定性试剂的定量应用 系列稀释系列稀释 Cut-off indexCut-off index 商品化的定量检测试剂商品化的定量检测试剂 Abbott Abbott ArchitectArchitect Roche ElecsysRoche Elecsys HBsAg II quantHBsAg II quant 需要手工稀释需要手工稀释 NewNew 在亚洲和欧洲对Elecsys HBsAg II Quant 进行大量的评估 611 例/4个中心，覆盖A到G 基因型 Pisa, 意大利 Hannover, 德国 Melbourne, 澳大利亚 Bangkok, 泰国 Bonino et al. APASL 2011 Elecsys HBsAg ll 的线性范围可以覆盖重要的 临床决策水平 Elecsys 线性范围 0.0552,000 IU/mL Bonino et al. APASL 2011; PEGASYS Phase 3 study data; Package insert: Architect HBsAg assay; Package insert: Elecsys HBsAg II quant Abbott 线性范围0.05250 IU/mL 大多数标本可以不需重测一次性得到最终结果 Bonino et al. APASL 2011 未经稀释 5.1% 一次性得到最终结果 72.2% 自动稀释1:400 预稀释 1:10 20.1% 预稀释 1:100 2.6% 手工稀释 自动稀释意味着更好的重测和更加可信的结果 商品化的HBsAg定量检测试剂 Abbott Architect HBsAg quant Roche Elecsys HBsAg II quant 稀释手工稀释自动稀释 不需要重测的标本的比例5%75% 手工处理时间/费用 线性范围(IU/mL)0.05 250 0.05 13,000 or 52,000 精密度 9.2% CV 182 IU/mL 5.6% CV 6610 IU/mL 总结 HBsAgHBsAg可以预示可以预示CHBCHB的免疫控制的免疫控制 PegasysPegasys治疗治疗 12 and 24 12 and 24 周周 对于对于 HBeAg HBeAg 阳性患者阳性患者 HBsAg 20000 HBsAg 20000 预示应答不佳预示应答不佳 对于对于HBeAgHBeAg阴性患者阴性患者 HBsAg HBsAg