WUPYV与RSV患儿临床特点比较.doc

文章来源 毕业论文网 wupyv与rsv患儿临床特点比较文章来源 毕业论文网 wu 多瘤病毒 (wu polyomavirus, wupyv) 由gaynor 等1于 2007 年 5 月, 通过分子病毒筛查方法, 从急性呼吸道感染患儿的鼻咽部抽取物中发现。 wupyv 感染的主要临床表现是咳嗽、 喘息等呼吸道感染症状。 因 wupyv 与其他病毒合并感染率高, 所以至今对其在人类疾病中的致病意义仍有争议1-8。 呼吸道合胞病毒(rsv) 历来被认为是典型的儿科呼吸道感染病毒。 本研究通过多重 pcr技术, 检测呼吸道感染患儿咽拭子中的 wupyv、rsv、 人博卡病毒(hbov) 等 10 种(型) 病毒, 并重点比较 wupyv 和 rsv 感染患儿的临床特征, 以探讨 wupyv 感染在儿科呼吸道感染中的临床意义。1 资料与方法1.1 一般资料选取汕头大学医学院第二附属医院儿科 2008年 1 月至 2010 年 9 月因呼吸道感染住院患儿, 共1 701 例 。 其 中 男 901 例 ( 52.3% ) ; 女 800 例(47%); 男女比例为 1.3 1。 年龄分组: < 6 个月512 例(30.0%), 1 岁 374 例(22.0%), 3 岁 493例(25.3%), 5 岁 204 例(12.0%), > 5 岁 118 例(6.9%)。 本研究获得医院伦理委员会同意 , 入选患儿均由患儿家属签字同意。1.2 方法1.2.1 标本收集 患儿入院 2 h 内用无菌的聚酯纤维塑料柄拭子采集双侧后咽和扁桃体部位分泌物,采集后立即将咽拭子装入含有 2 ml 病毒运输培养液的无菌小瓶中, 置-80冰箱中待检。1.2.2 标 本 处 理 病 毒 dna / rna 提 取 试 剂 盒(axyprep body fluid viral dna / rna miniprep kit)购于美国 axygen 公司, 严格按照说明书操作, 提取所得的 dna/rna -80冰箱保存备用。 应用pcr 技术进行 wupyv、 rsv、 腺病毒 (adv)、 鼻病毒(rhv)、 流感病毒 a 型(iva)、 流感病毒 b 型(ivb)、 副流感病毒 1 型(piv1)、 副流感病毒 3 型(piv3)、 偏肺病毒 (hmpv) 等常见呼吸道病毒检测。 引物设计参照文献9。 引物由上海生工生物公司合成, 引物序列见表 1。应 用 美 国 fermentas 公 司 生 产 的 2 × pcrmaster mix 进行常规 pcr 扩增 , 检测 dna 病毒 ;应用德国 qiagen 公司生产的 one step rt-pcr kit进行 rt-pcr 扩增, 检测 rna 病毒。 扩增条件分别为: 多重 pcr: 94, 5 min; 94, 30 s;50, 30 s; 72, 1 min; 40 个循环; 72, 10 min。 多重 rt-pcr: 50, 30 min; 95, 15 min;94 , 45 s; 55 , 1 min; 72 , 45 s; 40 个循环; 72, 10 min。 扩增产物以 10 g/l 琼脂糖凝胶电泳, 最后在紫外线透照灯下观察结果。1.2.3 临床资料收集 收集 wupyv 和 rsv 感染患儿的年龄、 性别、 症状、 体征、 白细胞计数(wbc)、 急性 c 反应蛋白 (crp) 值、 胸片等临床资料。1.3 统计学分析应用 spss13.0 统计软件进行数据处理和分析。正态分布计量资料采用两独立样本 t 检验; 如非正态分布计量资料则采用非参数 u 检验。 各组间率的比较采用 χ2检验。 p < 0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 多重 pcr 病毒检测结果1 701 例 标 本 中 , 病 毒 检 测 阳 性 1 215 例(71.4%); 其中 wupyv 阳性 46 例(2.7%), rsv 阳性 365 例(21.5%), 其余依次递减为 iva 阳性 233例 (13.7%), rhv 160 例 (9.4%), hbov 107 例(6.3%), piv3 105 例(6.2%), piv1 72 例(4.23%),adv 55 例 (3.23% ), hmpv 54 例 (3.17% ), ivb18 例(1%)。 在 46 例 wupyv 阳性标本中, 单纯感染 22 例 ( 47.8% ) , 合 并 其 他 病 毒 感 染 24 例(52.2%), 包括合并 rsv 感染 13 例、 iva 12 例 、hbov 7 例 、 piv3 5 例 、 adv 4 例 、 rhv 3 例 、piv1 3 例, 同时合并 rsv、 hbov、 piv3、 iva 感染共 3 例。 365 例 rsv 阳性标本中, 单纯感染 88例(24.1%)。 rsv 感 染 患 儿 的 合 并 感 染 率 高 于wupyv 感染患儿 , 两者差异有统计学意义 (χ2=11.723, p = 0.001)。2.2 单纯 wupyv 和 rsv 感染患儿临床特征比较22 例单纯 wupyv 感染患儿中, 男女比例为 1 1.4; 88 例单纯 rsv 感染患儿, 男女比例为 2.26 1; 两者差异有统计学意义(χ2= 6.138, p < 0.05)。wupyv 感染患儿的中位年龄为 26.2 个月, rsv 感染患儿的中位年龄为 14.9 个月, 两者差异有统计学意义(u = 669.5, p < 0.05)。单纯 wupyv 和 rsv 感染患儿的临床症状与体征相似, 咳嗽(χ2= 13.34, p < 0.001) 和喘息(χ2= 10.53, p < 0.001) 在 rsv 感染的患儿中更为多见。 见表 2。两组患儿的 wbc 和 crp 值、 胸部 x 线表现差异均无统计学意义(p > 0.05)。 rsv 感染的患儿以毛细支气管炎更多见, 两组间差异有统计学意义(p = 0.005)。 见表 2。为了探讨这两种病毒的季节分布特点, 从中选取 2008 年 1 月至 2009 年 12 月两者单纯感染的阳性标本。 单纯 wupyv 感染有 18 例, 其中春季 8 例(44.4%), 夏季 3 例(16.7%), 秋季 4 例(22.2%),冬季 3 例(16.7%); 单纯 rsv 感染有 83 例, 其中春季 14 例(16.9%), 夏季 16 例(19.3%), 秋季 11例(13.3%), 冬季 42 例(50.6%)。 两者全年均可发生, 但各季节发病率有所不同, 四季分布整体差异有统计学意义(χ2= 9.943, p = 0.02), 即 wupyv感染以春季多见, 而 rsv 感染则以冬季常见。在治疗上, 单纯 rsv 感染患儿更多需要激素治疗(χ2= 9.321, p = 0.002), 而支气管扩张剂及氧疗的使用在两组间差异无统计学意义(χ2= 0.863,1.497, p 均 > 0.05)。 单纯wupyv 和 rsv 感染患儿的住院中位时间分别为 5.38 d 和 5.78 d, 差异无统计学意义(u = 937.0, p = 0.814)。3 讨论自从 2007 年 wupyv 被发现以来, 全球各地陆续报道了人群中该病毒感染的情况。 目前该病毒检出率的报道差异较大, 在 0.7% 9.0%之间1-8。本研究中, wupyv 阳性检出率为 2.7%, 与美国le 等2的报道一致, 该检出率远低于 rsv 检出率(21.5%), 但仍提示 wupyv 可能是导致小儿呼吸道感染的另一重要病原体, 应引起儿科医师的重视。wupyv 除单纯感染外, 常合并其他病毒感染,发生率在 30.8% 100%之间1-8, 主要合并 rsv、rhv 等病毒感染 。 本研究中 , 单 纯 wupyv 和rsv 感染分别为 47.8% 和 24.1% , 而两者合并其他病毒感染分别为 52.2%和 75.9%。 因此, 由于wupyv 合并感染率较高而质疑其是否为小儿呼吸道感染的另一重要病原体, 有待进一步的研究。文献报道 wupyv 感染者大多为婴幼儿。 如gaynor 等1发现, wupyv 检测阳性者主要为 ≤ 3岁的婴幼儿; 美国 le 等2报道, 该病毒检测阳性者以 7 个月至 2 岁婴幼儿所占比例最高; 荷兰 vander zalm 等7报道, 该病毒检测阳性者的中位年龄为 2.6 岁; 德国 neske 等6报道, 该病毒检测阳性者多数为 < 4 岁的婴幼儿, > 6 岁者罕见。 rsv 感染患儿在加拿大报道中以 < 2 个月多见10; 在中国香港地区则在 19.5 个月的患儿中多见11; 诸福棠实用儿科学(2002 版)总结, rsv 感染的患儿半数以上在 1 岁以内12。 本研究中单纯 wupyv 感染患儿的中位年龄较单纯 rsv 感染患儿大(26.2 个月比14.9 个月 ), 与国外文献报道结果一致 。 这提示wupyv 和 rsv 均可感染婴幼儿, 而 wupyv 易感染较大年龄的婴幼儿, rsv 易感染较小年龄的婴幼儿。大部分研究报道称 wupyv 感染没有显着的性别差异13。 美国 le 等2发现, wupyv 阳性者 52%(31 / 60) 为女性 ; 德国报道 , wupyv 阳性者中男性占 57%6; 而法国的研究中男女比例为 2.2 18;在我国兰州大学的研究中, 男女比例为 3 214。 本研究中, 单纯 wupyv 检测阳性的男女比例为 1 1.4, 而单纯 rsv 检测阳性的男女比例为 2.26 1。尽管两者男女差异有统计学意义, 但因本研究中两者的阳性例数均较少, 尚不足以得出 wupyv 感染在女性患儿阳性检测率更高这一结论。大多数报道称, wupyv 感染可贯穿全年, 但多数发生在冬季13。 美国从 2003 年 7 月到 2004 年6 月的研究发现 , 2003 年 7 月是第 1 个高峰 , 而2004 年 4、 5 月是第 2 个高峰2; 澳大利亚多数病例发生于冬末至夏初3; 加拿大主要在 12 月至次年 4 月4;韩国集中在冬末至夏初5; 德国主要在冬季 6; 荷兰主要在冬春季 7; 法国无明显季节性8; 我国(包括本课题组前期研究结果) 集中在秋冬季 15 -18。 本研究则显示广东汕头地区的单纯wupyv 感染多数发生在春季, 而单纯 rsv 感染则多在冬季。 这是否与不同地域的温度及湿度的差异有关? 由于本研究中阳性例数少, 故 wupyv 感染高峰是否确在春季, 还有待进一步证实。wupyv 或 rsv 感染后患儿主要临床症状大多为不同程度的咳嗽、 喘息、 有(或)无发热等呼吸道感染症状12, 13。 本研究中, wupyv 和 rsv 感染后主要表现为发热(以中、 低热为主)、 咳嗽、 喘息、 鼻塞等, 部分伴有腹泻、 呕吐等胃肠道症状;咳嗽和喘息在 rsv 感染的患儿中更为多见, 但在wbc、 crp 及胸片结果均无明显差异。 gaynor 等1发现, wupyv 检测阳性患儿主要被诊断为细支气管炎、 哮喘、 肺炎等。 le 等2则发现该病毒感染最常见的诊断为肺炎(31%)、 细支气管炎(25%)以及上呼吸道感染(15%)。 法国 foulongne 等8报道,阳性患儿的临床诊断包括细支气管炎或不典型肺炎或哮喘加重。 韩国 han 等5报道, 临床诊断为细支气管炎、 支气管炎、 肺炎以及哮喘。 本研究中,单纯 wupyv 感染后的疾病诊断常见为支气管肺炎( 45.5% ) 、 支 气 管 炎 ( 18.1% ) 、 毛 细 支 气 管 炎(13.6%)、 上呼吸道感染(9%)、 咽结合膜热(9%)以及急性喉炎(4.5%)。 单纯 rsv 感染患儿疾病诊断与其类似, 但更多被诊断为毛细支气管炎。 这提示两者可能通过某些相似的机制引起疾病。有关 wupyv 感染的治疗, 美国 le 等2的研究结 果 提 示