药学论文高效液相色谱法测定白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量研究.doc

高效液相色谱法测定白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素含量研究 【关键词】 白癜风颗粒；补骨脂素；异补骨脂素；色谱法，高压液相白癜风颗粒由补骨脂、黄芪、红花、当归、川芎等15味中药组成。具有益气行滞、活血解毒、利湿消斑，驱风止痒之功效，在本院皮肤科应用多年，证实对白癜风等疾病有效。为了控制白癜风颗粒的质量，保证临床用药效果，本实验建立了hplc测定白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的方法。经方法学考察证实该方法特异性高，回收率和精密度好，结果满意。 1 仪器与试剂 waters600高效液相色谱仪，waters 2487紫外、可见波长检测器；breeze色谱工作站；十万分之一微量分析天平；补骨脂素对照品(110730-200309)和异补骨脂素对照品(0738-200108)购自中国药品生物制品检定所；甲醇为色谱纯；其他试剂均为分析纯，白癜风颗粒由本院自制。 2 方法与结果 2.1 色谱条件1 色谱柱，reliasil.c18(4.6 mm250 mm，5 m)；流动相:甲醇-水(4753)；流速，1.0 ml/min；检测波长，245 nm；柱温：室温。毕业论文网 论文网 2.2 对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素对照品10.42 mg，异补骨脂素10.92 mg，置10 ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1.5 ml，置100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量,摇匀，滤过，取续滤液，即得。 2.4 阴性对照品溶液的制备 按处方制备取不含补骨脂药材的样品颗粒剂，按供试品溶液的制备方法制成相应的阴性样品溶液。线性关系考察：精密吸取补骨脂素与异补骨脂素混合对照品溶液2、4、6、8、10 l，分别注入液相色谱仪，测定补骨脂素与异补骨脂素色谱峰面积。以补骨脂素与异补骨脂素的进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：y=1.25103+7.55106x,r=0.999 7。 结果表明，补骨脂素在0.031 2640.156 30 g有良好的线性关系，异补骨脂素在0.032 760.163 80 g具有良好的线性关系。 2.5 精密度实验 精密吸取同一供试品溶液(批号：050502)5 l，重复进样6次，分别计算补骨脂素和异补骨脂素的质量分数，结果其rsd分别为0.76%和1.29%。 2.6 稳定性试验 精密吸取对照品溶液5 l，分别于0,2,4,24,36 h测定峰面积，计算得补骨脂素和异补骨脂素峰面积的rsd分别为1.99%和1.62%,表明对照品补骨脂素和异补骨脂素在36 h稳定。 2.7 重现性实验 取样品，精密称定5份，制备供试品溶液，进样测定计算补骨脂素和异补骨脂素的质量分数，其rsd为0.59%。 jp22.8 回收率实验 采用加样回收法。取批号为050501的样品5份,每份0.25 g，置具塞锥形瓶中，各精密加入补骨脂素和异补骨脂素混合对照品0.14 mg，制备供试品溶液，进样，测定。结果补骨脂素和异补骨脂素平均加样回收率为99.04%，rsd为1.50%。 2.9 样品测定 取3批白癜风颗粒制备供试品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5 g，进样，测定，结果见表1。根据结果，暂定本品以干燥品计，含补骨脂素和异补骨脂素总含量不得少于0.22 mg/g。表1 白癜风颗粒中补骨脂素和异补骨脂素的测定结果 3 小结 流动相的确定 本实验曾选择乙醇水溶液系统，结果不太理想，补骨脂素和异补骨脂素的出峰区间有干扰，峰形欠佳。而采用本实验的色谱条件即甲醇水系统，补骨脂素和异补骨脂素的峰形得到明显的改善，