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文档简介

附录 A 人用狂犬病疫苗效价测定法（NIH法）本法系将供试品免疫小鼠后，产生相应的抗体，通过小鼠抗体水平的变化测定供试品的免疫原性。试剂 稀释液（PBS） 量取0.9%磷酸二氢钾溶液75ml、2.4%磷酸氢二钠（Na2HPO412H2O）溶液425ml、8.5%氯化钠溶液500ml，混合后加水至5000ml，调pH值至7.28.0。攻击毒株CVS制备 启开毒种，稀释成10-2悬液，接种1113g小鼠，不少于8只，每只脑内接种0.03ml，连续传23代，选择接种45天有典型狂犬病症状的小鼠脑组织，研磨后加入含2%马血清或小牛血清制成20%悬液，经每分钟1000转离心10分钟，取上清液经病毒滴定（用10只1820g小鼠滴定）及无菌检查符合规定后作攻击毒用。参考疫苗的稀释 参考疫苗用PBS稀释成125、1125和1625等稀释度。供试品溶液的制备 供试品用PBS做5倍系列稀。测定法用不同稀释度的供试品及参考疫苗分别免疫1214g小鼠16只，每只小鼠腹腔注射0.5ml，间隔1周再免疫1次。小鼠于第一次免疫后14天，用经预先测定的含5100个LD50的病毒量进行脑内攻击，每只0.03ml。同时将攻击毒稀释成100 、10-1、10-2 和 10-3进行毒力滴定，每个稀释度均不少于8只小鼠。小鼠攻击后逐日观察14天，并记录死亡情况，统计第5天后死亡和呈典型脑症状的小鼠。计算供试品和参考疫苗ED50值。计算相对效力PT/SdT/dSD式中P为供试品效价，IU/ml;T为供试品ED50的倒数；S为参考疫苗ED50的倒数；dT为供试品的一次人用剂量，ml；dS为参考疫苗的一次人用剂量，ml;D为参考疫苗的效价，IU/ml。【附注】（1）动物免疫时应将疫苗保存在冰浴中。（2）各组动物均应在同样条件下饲养。（3）攻击毒原病毒液(100 )注射的小鼠应80%以上死亡。欢迎您下载我们的文档，后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用致力于合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求主要经营：网络软件设计、图文
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