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ISO15189 质量管理体系范本文件（第五册）质量管理体系范本文件（第五册） 生化室作业指导书生化室作业指导书 文件编号：CXZY-3-SH-0161 第第 1 版版 编制：编制： 审核：审核： 批准：批准： 生效日期：生效日期：2012 年年 1 月月 1 日日 曹县中医医院检验科曹县中医医院检验科 文件编号： 曹县中医医院检验科曹县中医医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：1/0 生效日期：20120101 主题内容 目 录 第 2 页 共 127 页 目目 录录 序号序号主主 题题 内内 容容 代代 号号页页 号号 1 血清总胆红素测定 CXZY-3-SH-01 6 2 血清直接胆红素测定 CXZY-3-SH-02 10 3 血清总蛋白液体双缩脲法测定 CXZY -3-SH-03 13 4 血清白蛋白溴甲酚绿法测定 CXZY -3-SH-04 16 5 血清丙氨酸氨基测定 CXZY -3-SH-05 19 6 血清天门冬氨酸氨基测定 CXZY -3-SH-06 23 7 血清碱性磷酸酶测定 CXZY -3-SH-07 27 8 血清 -淀粉酶测定 CXZY -3-SH-08 31 9 血清葡萄糖氧化酶法测定 CXZY -3-SH-09 35 10 血清尿素氮 Urease-GLDH 紫外法 CXZY -3-SH-10 39 11 血清肌酐苦味酸法测定 CXZY -3-SH-11 43 12 血清尿酸 Uricase 法测定 CXZY -3-SH-12 46 13 血清总胆固醇酶试剂法测定 CXZY -3-SH-13 50 14 血清甘油三酯酶试剂法测定 CXZY -3-SH-14 54 15 血清镁二甲苯胺蓝法测定 CXZY -3-SH-15 58 16 血清无机磷磷钼酸法测定 CXZY -3-SH-16 61 17 血清钙偶氮胂法测定 CXZY -3-SH-17 65 18 血清载脂蛋白 A1 测定 CXZY -3-SH-18 68 19 血清载脂蛋白 B 测定 CXZY -3-SH-19 72 20 血清高密度脂蛋白胆固醇测定 CXZY -3-SH-20 76 21 血清低密度脂蛋白胆固醇测定 CXZY -3-SH-21 80 22 血清肌酸激酶(CK) 法测定 CXZY -3-SH-22 84 23 血清肌酸激酶 MB 同工酶测定 CXZY -3-SH-23 88 24 血清乳酸脱氢酶 DGKC 法测定 CXZY -3-SH-24 92 文件编号： 曹县中医医院检验科曹县中医医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：1/0 生效日期：20120101 主题内容 目 录 第 3 页 共 127 页 26 血清 a-羟丁酸脱氢酶测定 CXZY -3-SH-2699 27 血清总胆汁酸循环酶法测定 CXZY -3-SH-27103 28 OLYMPUS 钠、钾、氯离子测定 CXZY -3-SH-28106 29 血清二氧化碳酶试剂法测定 CXZY -3-SH-29112 32 血清 g-谷氨酰转移酶测定 CXZY -3-SH-32121 34 钠离子电极电位法测定 CXZY -3-SH-34 127 35 氯的电极电位法测定 CXZY -3-SH-35 132 36 钙的比色法测定 CXZY -3-SH-36 137 47 正常值、病理值复合控制品 CXZY -3-SH-47 188 49 复合校准品 CXZY -3-SH-49 192 54 美的冰箱操作维护规程 CXZY -3-SH-54 203 55 纯水机操作维护规程 CXZY -3-SH-55 205 57 AU680 生化分析仪操作维护规程 CXZY -3-SH-57 209 60 离心机操作维护规程 CXZY -3-SH-60 222 文件编号： CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 修 订 页 第 4 页 共 127 页 修修 订订 页页 序号文件编号页码需更改的内容更改内容批准人批准日期 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 文件编号：CXZY-3-SH-01 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(T-BIL)测定测定 第 5 页 共 127 页 血血清清总总胆胆红红素素 ( (T T- -B BI IL L) )测测定定 1 1. . 实实验验原原理理 血清中的胆红素分为直接（结合）胆红素和间接（未结合）胆红素。大多数方法是在1883 年 Ehrlich 提出的重氮法胆红素测量法 1，一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方 法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应，生成一种有颜色的化合物，而间接胆红素需要一 种溶剂，如表面活性剂后才能进行反应。 华宇 总胆红素试剂是 钒酸氧化法， PH 接近于 3 时，在钒酸盐及表面活性剂的作用下，总 胆红素被氧化成胆绿素。此时，胆红素特有的黄色减少，通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可 求得样品中总胆红素的浓度。 胆红 素 钒酸胆绿素 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA 血浆，应避光保存。 3 3. . 标标本本存存放放： 1525保存可稳定 2 天；28保存可稳定 7 天；-20保存可稳定 3 个月，如冰冻 保存，不可反复冻融！。 4 4. . 标标本本运运输输： 常温条件下避光保存运输。 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6 6. . 实实验验材材料料 6.1 试剂：华宇 总胆红素试剂盒（ 试剂 1: 360ml； 试剂 2：45ml） 6.1.1 试剂组成 试剂 1： 柠檬酸缓冲液 100mmol/L 表面活性剂 ,稳定剂 适量 试剂 2： 磷酸盐缓冲液 10mmol/L 钒酸钠 10mmol/L 表面活性剂 适量 6.1.2 试剂准备：液体试剂，直接使用，无需配制。 文件编号：CXZY-3-SH-01 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(T-BIL)测定测定 第 6 页 共 127 页 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12 个月。 试剂 2 必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；警告！腐蚀剂！不要入口； 避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15 分钟， 接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯AU680 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件。 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪操作规程.SOP 文件。 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以贝克曼复合校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪 器直接报告可靠的检测结果无需手工计算 ，以 mol/L 报告。手工测定计算方法为： A 标本 总胆红素 (mol/L) = 校准液浓度 A 标准 1 12 2. . 参参考考值值范范围围： 5.0-20.1mol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在 血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生 成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红 素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert 综合症。 由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总 文件编号：CXZY-3-SH-01 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清总胆红素血清总胆红素(T-BIL)测定测定 第 7 页 共 127 页 胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测 水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 0-684mol/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法 5，AU680 批内精密度小于 4% 或 SD0.07，总精密度小于5%或 SD0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的 NCCLS 的规则。 14.4 灵敏度： 本试剂的检测限为0mol/L。 14.5 病人结果可报告范围：0684mol/L 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为684mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样 品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/L 时，在经过复 查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为684mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠 溶液作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度300mol/L，血红蛋白浓度 5.00g/L，甘油三 酯浓度 20g/L 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.新编 检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号。 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-02 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清直接胆红素血清直接胆红素(D-BIL)测定测定 第 8 页 共 127 页 血清直接胆红素（血清直接胆红素（D-BILD-BIL）测定）测定 1.1. 实验原理实验原理 PH接近于3时，在钒酸及表面活性剂的作用下，直接胆红素被氧化成胆绿素，此时，胆红素特有的黄 色减少，通过检测钒酸作用前后吸光度的差，可求得样品中直接胆红素的浓度。 2.2. 标本：标本： 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。 3.3. 标本存放：标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存， 不可反复冻融！。 4.4. 标本运输：标本运输：常温条件下避光保存运输。 5.5. 标本拒收标准：标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。 6.6. 实验材料实验材料 6.1 试剂：华宇总胆红素试剂盒：试剂 1:( 360ml； 试剂 2：45ml) 6.1.1 试剂组成 试剂1： 0.1mmol/L酒石酸缓冲液 PH 2.9 表面活性剂 适量 试剂2： 磷酸盐缓冲液 10mmol/L 钒酸钠 10mmol/L 稳定剂 适量 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式液体试剂，直接使用，无需配制。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为12个月。 试剂 2必需避光保存。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果 接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件 文件编号：CXZY-3-SH-02 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清直接胆红素血清直接胆红素(D-BIL)测定测定 第 9 页 共 127 页 7.7. 仪器仪器：奥林巴斯AU680生化分析仪 8.8. 操作步骤操作步骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU6800生化分析仪项目测定参数.SOP文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU6800生化分析仪操作规程.SOP文件 检验结果的判断与分析检验结果的判断与分析 10.10. 质量控制：质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警 告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。 11.11. 计算方法计算方法 以贝克曼复合校准品复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直 接报告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告 。手工测定计算方法为： Au 直接胆红素(mol/L) =-校准液浓度 As 12.12. 参考值范围：参考值范围：0.3-6.8mol/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自 己的参考值。 13.13. 临床意义：临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白 蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸 酯由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸） 、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高， 形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功 能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能 检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和 直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 14.14. 操作性能操作性能 14.1 线性范围：0342mol/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU680批内精密度小于4%或SD0.04，总精密 度小于5%或SD0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则 14.4 灵敏度：0mol/L。 14.5 病人结果可报告范围：0342mol/L 1515 超出范围结果处理超出范围结果处理 本法线性上限为342mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶 液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。 16.16. 病危报警值的处理病危报警值的处理 无。 文件编号：CXZY-3-SH-02 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清直接胆红素血清直接胆红素(D-BIL)测定测定 第 10 页 共 127 页 17.17. 方法局限性方法局限性 17.1 本法线性上限为171mol/L。样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重 新测定，结果乘以2。 ， 17.2干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度300mol/L，Hb浓度 5g/L，甘油三酯浓度20g/L时没有 观察到干扰。血红蛋白浓度0.50g/L将产生干扰。 18.18. 补救措施：补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 19.19. 参考文献参考文献： 1.新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号。 20.20. 其他：其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。 文件编号：CXZY-3-SH-03 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期 20120101 主题内容 血血清清总总蛋蛋白白液液体体测测定定 第 11 页 共 127 页 血血清清总总蛋蛋白白液液体体 ( (T TP P) )双双缩缩脲脲法法测测定定 1 1. .实实验验原原理理 双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度 成正比。 OH 蛋白质 + Cu2+ -紫红色复合物 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清或血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 2025保存可稳定6 天； 48保存可稳定4 周； -20保存至少可稳定 1 年。 4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 : : 6.1 北京华宇 总蛋白测定试剂盒 试剂 1:470ml 6.1.1 试剂组成 试剂 1（R1）： 氢氧化钠 200 mmol/L 酒石酸钾钠 64 mmol/L 氢氧化钠 200 mmol/L 碘化钾 30 mmol/L 硫酸铜 12 mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有 效期为 12 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲 文件编号：CXZY-3-SH-03 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期 20120101 主题内容 血血清清总总蛋蛋白白液液体体测测定定 第 12 页 共 127 页 洗。使用试剂时应采取必要的防护。 6.2 校准品：牛血清白蛋白，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯AU680 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L 报告。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 62-80g/L （注：各实验室应有自己的参考范围。）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。 根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引 起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时 总蛋白浓度升高。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围： 0100g/L 14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法，AU680 批内差 小于 4.2%，批 间差小于 5.4%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0g/L。 14.5 病人结果可报告范围 0100g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯 化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：本法线性上限为100g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为100g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液 作 1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质：静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆，使用双缩脲方法的检测结果会明显 文件编号：CXZY-3-SH-03 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期 20120101 主题内容 血血清清总总蛋蛋白白液液体体测测定定 第 13 页 共 127 页 增高，请选用其它方法（如凯氏定氮法）；当样品中抗坏血酸浓度300mol/L，胆红素浓 度400mol/L，血红蛋白浓度 5.00g/L，甘油三酯浓度 10g/L 时没有观察到干扰 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 19.19. 参考文献参考文献： 1.新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-04 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 14 页 共 127 页 血血清清白白蛋蛋白白（ A AL LB B）溴溴甲甲酚酚绿绿（ B BC CG G）法法测测定定 1 1. .实实验验原原理理 在 pH 值 4.2 时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm 处有吸收峰 ， 颜色的深度与白蛋白浓度成正比。 pH4.2 白蛋白 +溴甲酚绿 -绿色化合物 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。 2.2 类型：血清、肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下（1525）可以稳定一 周，在冰箱保存的条件下（28）稳定一个月， -20保存至少可以稳定3 个月。 4 4. . 标标本本运运输输 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 : : 6.1 北京华宇 白蛋白测定试剂盒（470ml） 6.1.1 试剂组成 琥珀酸 缓冲液 5mmol/L 溴甲酚绿 (BCG) 60umol/L PH 4.20.1（37） Brij 0.1% 6.1.2 试剂准备：液体单一试剂，开瓶即用。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效 期为 12 个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。 6.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：避免试剂与皮肤及粘膜接触。 6.2 校准品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 7 7. . 仪仪器器 ：奥林巴斯AU680 生化分析仪 8 8. . 操操作作步步骤骤 文件编号：CXZY-3-SH-04 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 15 页 共 127 页 8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪项目测定参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU680 生化分析仪操作规程.SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与 II 质控做为未知标本进行分析， 以 2S 为质控警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质 控操作规程 .SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以贝克曼复合校准品复合校准品白蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后， 在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果。手工测定计算方法为： Au 白蛋白 (g/L)= 校准液浓度 As 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 成人 3854g/L 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应 建立自己的参考值。 1 13 3. . 临临床床意意义义： 白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白，并是维持血浆渗透压的主要 组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多 见于营养不良、肾脏疾病，肝脏疾病，感染性疾病，严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助 于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外，白蛋白量反映了个体的健康与营养状况，因此可用 于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 269g/L 14.2 精密度：重复性的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法，AU680 批内重复性小于 4.2%，总不精密度小于5.4%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。 14.4 灵敏度： 2g/L。 14.5 病人结果可报告范围：269g/L，如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯 化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 本法线性上限为69g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用 0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 文件编号：CXZY-3-SH-04 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血血清清白白蛋蛋白白溴溴甲甲酚酚绿绿法法测测定定 第 16 页 共 127 页 17.1 本法线性上限为69g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1 稀释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质： 当样品中抗坏血酸浓度300mg/L，胆红素浓度400mg/L，血红蛋白浓度 4.00g/L，甘 油三酯浓度50g/L 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1 新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-05 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定 第 17 页 共 127 页 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 I IF FC CC C 推推荐荐方方法法 测测定定 1 1. .实实验验原原理理 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 ALT L-丙氨酸 + -酮戊二酸 丙酮酸 + L-谷氨酸 丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O 上述偶联反应中，还原性辅酶（NADH）的氧化速率与标本的ALT 活性成正比。 NADH 在 340nm 有特异吸收，因而可检测NADH 吸光度的下降来计算ALT 活力。 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 01200U/L 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法，AU680 批内精密度小于 4.5%，批间 精密度小于5.7%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为4U/L。 14.5 病人结果可报告范围 0U/L-1200U/L 文件编号：CXZY-3-SH-05 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血血清清丙丙氨氨酸酸氨氨基基转转移移酶酶 测测定定 第 19 页 共 127 页 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1：9 稀释，重新测定，结果乘以10。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1：9 稀释，重新测定，结 果乘以 10。 17.2 干扰物质 ：当样品中抗坏血酸浓度300mg /L，胆红素浓度 400mg/L，血红蛋白浓度 4.00g/L，甘油三酯浓度20g/L 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1.新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-06 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 第 20 页 共 127 页 血清天门冬氨酸氨基转移酶血清天门冬氨酸氨基转移酶 IFCCIFCC 推荐方法测定推荐方法测定 1 1. . 实实验验原原理理： 国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。 L-天门冬氨酸 + -酮戊二酸 AST 草酰乙酸 +L-谷氨酸 草酰乙酸 + NADH +H+ MDH 苹果酸脱氢酶 L-苹果酸 +NAD+H2O 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA 血浆。 3 3. . 标标本本存存放放： 3 天内的活性损失：28保存： 1 和严重肝病有关，常见慢性肝病。 1 14 4. . 操操作作性性能能 14.1 线性范围 0-1200U/L。 14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS 推荐的标准方法，AU680 批内精密度小于 文件编号：CXZY-3-SH-06 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 第 22 页 共 127 页 4.5%，批间 精密度小于5.7%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS 的规则。 14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0U/L。 14.5 病人结果可报告范围 0-1200U/L。 1 15 5. . 超超出出范范围围结结果果处处理理：。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作 1+9 稀释，重新测定，结果乘以10。 1 16 6. . 病病危危报报警警值值的的处处理理 无。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L 氯化钠溶液作1+9 稀释，重新测定，结 果乘以 10。 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度300mg /L，胆红素浓度 400mg/L，甘油三酯浓度 20g/L 时没有观察到干扰。红细胞内富含AST，因此溶血血清检测结果明显偏高。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献： 1.新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-07 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清碱性磷酸酶测定血清碱性磷酸酶测定 第 23 页 共 127 页 血清碱性磷酸酶（血清碱性磷酸酶（ALPALP）磷酸对硝基苯酚法测定）磷酸对硝基苯酚法测定 1 1. .实实验验原原理理 磷磷酸酸对对硝硝基基苯苯酚酚（4 4- -N NP PP P）在在碱碱性性磷磷酸酸酶酶的的作作用用下下，将将其其磷磷酸酸基基转转移移到到2-氨基 -2 甲 基-1-丙醇（ AMP）受体分子上，释放出的对硝基苯酚（4-NP）在碱性溶液中 分子重排形成 黄色醌，可在405nm 下检测。黄色醌形成速率与ALP 活力成正比。 ALP 4-NPP + H2O -4-NP+磷酸 4 2 2. . 标标本本采采集集与与处处理理： 2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 标本类型：标本最好是无溶血的血清或肝素化的血浆。 2.3 血清分离：应在收集后两小时内分离出来。避免使用含EDTA 或草酸盐的血浆。 3 3. . 标标本本存存放放 ：23 天内的活性损失：1525保存： 300U/L 时， 在经过复查等确认手段处理后应及时向临 床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为2000U/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液 作 1：10 稀释，重新测定，结果乘以11。 17.2 干扰物质： 当样品中抗坏血酸浓度 300mg/L，胆红素浓度400mg/L，甘油三酯浓度10g/L 时没有 观察到干扰。即使极低浓度的血红蛋白都会对检测产生干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献： 1.新编检验检查诊断手册 ，2003 年 11 月第 1 版。上海科技教育出版社。 2 生物化学检验 ，2003 年 2 月第 2 版。人民卫生出版社。 3. 临床生物化学和生物化学检验 ，1999 年 10 月第 2 版。人民卫生出版社。 4. 临床生物化学和生物化学实验指导 ，钱士匀主编，人民卫生出版社。 5 临床化学方法学评价 ，罗侃主编，兰州大学出版社。 6. 现代临床检验正常值手册2001 年 1 月第 1 版，安徽科学技术出版社。 7. 诊断试剂产品手册第五版，上海科华东菱诊断用品有限公司。 8. 产品说明书，北京利德曼生化科技有限公司，无版号。 9. 产品说明书，浙江东瓯生物工程有限公司，无版号 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定 执行。 文件编号：CXZY-3-SH-09 CXZYCXZY 医院检验科医院检验科 生化室作业指导书生化室作业指导书 版本/修订号：A/0 生效日期：20120101 主题内容 血清葡萄糖氧化酶测定法血清葡萄糖氧化酶测定法 第 29 页 共 127 页 血清葡萄糖（血清葡萄糖（GLUGLU）葡萄糖氧化酶法（）葡萄糖氧化酶法（GOD-PODGOD-POD 法）法） 测定法测定法 1 1. .实实验验原原理理 葡萄糖氧化 酶紫外比色测定法。 GOD 葡萄糖 + O2 -葡萄糖酸 + H2O2 Mg2+ POD H2O2 +4-AAP+酚 -红色醌类化合物 2 2. . 标标本本： 2.1 病人准备： 12 小时禁食。 2.2 类型：血清或血浆（