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实验 影响酶促反应速度的因素1、 实验目的通过本实验了解温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。2、 实验原理 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。淀粉溶液与碘反应呈蓝色;糊精根据分子大小,与碘反应分别呈蓝、紫、红、无色等不同的颜色;麦芽糖不与碘呈色。唾液淀粉酶的活性受温度、酸碱度、抑制剂与激活剂等的影响。温度:温度降低,酶促反应减弱或停止;温度升高,反应速度加快。当上升至某一温度时,酶促反应速度达最大值,此温度称为酶的最适温度。由于酶的化学本质是蛋白质,温度过高会导致蛋白质构象的改变,因此如果温度继续升高,反应速度反而会迅速下降甚至完全丧失。酸碱度:唾液淀粉酶最适pH为pH6.9,高于或低于酶的最适pH值,都将引起酶活性的降低,过酸或过碱的反应条件可使酶活性丧失。抑制剂与激活剂:酶的活性常受某些物质的影响,能增加酶的活性称为酶的激活剂:降低酶活性且不使酶蛋白变性的称为酶的抑制剂。如Cl-为唾液淀粉酶的激活剂,Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。根据上述性质,可以用碘检查淀粉是否水解及其水解程度,间接判断唾液淀粉酶是否存在及其活性大小。三、试剂及器材1.试剂:1淀粉溶液,1氯化钠溶液,1硫酸铜溶液,1硫酸钠溶液,碘液,磷酸氢二钠(0.2mmol/L), 柠檬酸溶液(0.1mmol/L)。2.器材:试管,试管夹,恒温水浴锅(37),吸管,滴管,试管架。四、实验操作:1.收集唾液:实验者先将痰咳尽, 用自来水漱口, 清除口腔内食物残渣, 再含蒸馏水约15 mL, 作咀嚼咕漱运动, 3min后吐入小烧杯中备用。2.观察温度对酶促反应速度的影响 取试管3支,编号1,2,3,按下表操作:试剂(ml)123唾液1111%淀粉222水浴5min100(冷却)370碘液1滴(冷却)1滴1滴现象3. 观察pH对酶促反应速度的影响(1)配制一系列pH不等的缓冲液。试剂(ml)1230.2mmol/L磷酸氢二钠5.157.729.720.1mmol/L柠檬酸4.852.280.28pH5.006.808.00(2)取试管3支,编号1,2,3,按下表操作:试剂(ml)123唾液222缓冲液3(pH5.00)3(pH6.80)3(pH8.00)1%淀粉22237水浴10min碘液1滴1滴1滴现象4观察激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响 取试管4支,编号1,2,3,4,按下表操作:试剂 滴12341%淀粉20202020唾液10101010蒸馏水61氯化钠61硫酸铜61硫酸钠637水浴510mi
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