微生物检测关键点和培养基成份及原理详解

微生物检测关键点和培养基成份 及原理详解 蔡向荣蔡向荣 青岛高科园海博生物技术有限公司青岛高科园海博生物技术有限公司 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物检测关键点 好的检测方法 高质量的培养基或仪器 好的检测方法 高质量的培养基或仪器 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物检测的基本思路 前增菌培养(培养基中不含抑菌剂) 选择性增菌培养或增菌培养 选择性分离培养或分离培养 生化鉴定或血清学鉴定 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 ?微生物快速检测技术定义： 在尽可能短的时间内,检测出目标微生物。 ?微生物快速检测方法特点： 1、快速：一般在几小时至24小时内； 2、灵敏度高、特异性高； 3、操作和使用尽可能简单； 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 ?选择快速检测方法的依据 1、GB/T 4789.32-2002食品卫生微生物学检验-大肠菌群的快速 检测 2、GB/T 5750.12-2006生活饮用水标准 检验方法微生物指标 3、GB标准和SN标准中使用的测试片方法 以上标准中都规定使用快速检测方法，主要是指酶底物法。 4、2008年11月1日实施的国家标准：GB/T4789.4-2008 沙门氏菌 检测、GB/T4789.36-2008大肠杆菌0157菌、GB/T4789.7-2008 副溶血性弧菌检测中都特别推荐用显色培养基方法。 5、FDA、USDA-FSIS、ISO、AOAC等标准推荐使用微生快速检测方 法 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 ?显色培养基法：技术成熟，产品很多。 ?免疫学方法：产品最多，特异性和敏感性都很 高，但有假阳性存在，阳性结果需要确认。通常 的原理有EIA，ELISA，GLISA，荧光酶免、免疫磁 分离等方法。市场上的产品多，如 bioMeriux,Tecra,Neogen,Biocontrol, Matrix等。 ?分子生物学方法：以基因探针检测法和PCR法(包 括常规PCR方法和荧光PCR方法)为主。 ?基因芯片：研究热点。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 快速检测方法分类 ?原理：主要根据微生物能产生特异性的酶，选择 适当的酶底物，使其菌落显现出不同的颜色，与 其它微生物区别开来。 ?如沙门氏菌具有辛酸酯酶，以4MU-辛酸酯为底 物，经沙门氏菌酶解，在紫外灯下观察游离4MU的 荧光，国内已有应用。我们应用-萘酚辛酯为底 物，经沙门氏菌酶解，释出- 萘酚与固兰作用 出现紫色，反应在纸片上进行，只需5分钟即可完 成沙门氏菌的鉴定。这对食品与环境卫生检验有 重要价值。卡他莫拉菌具有丁酸酯酶，可用丁酸 酯色原底物快速鉴定。大肠埃希氏菌具-葡萄糖 醛酸酶，但以O157：H7为代表的肠出血性大肠埃 希氏菌（EHEC）却不具此酶，故-葡萄糖醛酸酶 阴性已成为初步筛查EHEC的重要特征。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物显色培养基方法 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 脑膜炎奈瑟菌谷氨酰转肽酶 淋病奈瑟菌羟脯氨肽酶（Hydroxyprolaminopeptidase） A族链球菌吡咯芳胺酶（PYR） 肠球菌PYR、亮氨酸氨肽酶（LAP） 沙门菌辛酸酯酶 大肠埃希菌葡萄糖醛酸酶 卡他莫拉菌丁酸酯酶 白色念珠菌脯氨酸氨肽酶、N-乙酰-D半乳糖苷酶 克柔念珠菌酸性磷酸酶 热带念珠菌吡咯磷酸酶 新型隐球菌酚氧化酶 难辨梭菌谷氨酸脱氢酶（GDH）、脯氨酸酶 产单核李斯特菌丙氨酸氨肽酶 红斑丹毒丝菌N-乙酰葡萄糖醛酸酶 加德纳菌葡萄糖苷酶 金黄色葡萄球菌- N-乙酰葡萄糖胺酶 腐生，中间，斯氏葡萄球菌半乳糖苷酶 霍乱毒素降解辅酶 ?标准检测方法 LST肉汤361培养24-48小时 44.50.5水浴箱内 EC肉汤培养24-48h 伊红美蓝(EMB)平板,361培养242h 营养琼脂斜面上,361培养1824h 色氨酸肉汤 MR-VP培养基 Koser氏枸椽酸盐肉汤LST肉汤 大肠杆菌/大肠菌群显色培 养基 361培养18-24h 显色培养基快速检测方法 大肠杆菌常规方法和显色方法比较 检测方法 检测时间 (包括生化鉴 定) 所需培养基和试剂所需成本(人力和物力) GB标准方法需5-7天10种大约75元左右/每个样品 SN标准方法需5-7天8种大约70元左右/每个样品 显色培养基 方法 需2-3天 5种(其中生化管4 种) 大约42元左右/每个样品 检验检疫行业标准 出口食品沙门氏菌属检验方法 SN 017092 肉类、蛋品 缓冲胨水（BPW） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 37 4h or 2024h 直接选择性增菌 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 37 24 2h BS& DHL(亚利桑那菌琼脂) 前增菌 37 2448h TSI& 赖氨酸脱羧酶TSI& 尿素酶 37 2448h 生化试验 血清学试验 （“O”抗原，“Vi”抗原） 42 20 2h 37 2448h 结果判定 显色培养基快速检测方法 DHL和显色培养基和显色培养基 37 2428h SN新标准检测方法 FB1增菌液，30 培养24-26小时 显色培养基检测方法 FB2增菌液30 培 养24-26小时 OXA、PALCAM 35 培养24-48小时 TSA-YE 35 培养24小时 TSB-YE 35 培养24小时 生化鉴定 李斯特氏菌显色培养基 37培养24-28小时 青岛海博大肠杆菌O157显色培养基 大肠杆菌O157:H7菌落显紫色，大肠杆菌和大肠菌群菌落 显蓝色，其它菌显蓝色、白色、黄色或无色。 青岛海博坂崎杆菌显色培养基 坂崎杆菌菌落显蓝绿色，其它菌显白色、黄色或无色。 青岛海博大肠杆菌显色培养基 大肠杆菌菌落显蓝绿色，其它菌显白色、黄色或无色。 青岛海博大肠杆菌和大肠菌群 二合一显色培养基(第一代) 大肠杆菌菌落显蓝绿色或紫色，大肠菌群显红色， 其它菌显白色、黄色或无色。 青岛海博大肠杆菌和大肠菌群 二合一显色培养基(第二代) 大肠杆菌菌落显蓝绿色或紫色，大肠菌群显红 色，其它菌显白色、黄色或无色。 青岛海博金黄色葡萄球菌显色培养基 金黄色葡萄球菌菌落显蓝绿色，其菌落外围培养基变成黄色， 其它菌落被抑制，或显白色、黄色或无色。 海博金葡萄球菌显色培养基(第二代) 金黄色葡萄球菌菌落显蓝绿色，其它菌落被抑制，或显白色、 黄色、紫色、无色或其它色。18-24小时出结果。 青岛海博李斯特氏菌显色培养基 单增李斯特氏菌菌落显蓝绿色，其外围有一不透明环， 其它李斯特氏菌菌落显蓝绿色，其外围没有不透明环。 绵羊李斯特氏菌在培养48h后，其菌落外围会出现不透明环。 青岛海博沙门氏菌显色培养基(第一代) 沙门氏菌菌落显红色，大肠菌群显色蓝绿色， 其它菌被抑制，或显白色、黄色或无色。 青岛海博沙门氏菌显色培养基 (第二代) 沙门氏菌菌落显紫色，大肠菌群显色蓝绿色， 其它菌被抑制，或显白色、黄色或无色。 青岛海博弧菌显色培养基 副溶血性弧菌菌落显蓝绿色，其它弧菌显无色。 生活饮用水生活饮用水微生物培养基价格微生物培养基价格 ?营养琼脂250G 80.00 ?乳糖蛋白胨培养液250G 60.00 ?伊红美蓝琼脂250G 85.00 ?革兰氏染色液5ML*8 40.00 ?品红亚硫酸钠琼脂250G 95.00 ?EC肉汤培养基250G 90.00 ?MFC琼脂培养基250G 160.00 ?MMO-MUG培养基100G 960.00 ?NA-MUG培养基100G 660.00 ?EC-MUG培养基250G 900.00 MMO-MUG培养基 ?其中硫酸铵等十一种盐成份提供细菌生长所需 的营养及维持渗透压. ?其中邻硝酸苯-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)的作 用是用来监测大肠菌群,分解-半乳糖苷,产 生-半乳糖苷酶使之分解色原底物(ONPG)释 放出色原体(邻硝酸苯-D-吡喃)使培养基呈 现黄色. ?其中4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG) 的作用是用来监测大肠杆菌。大肠杆菌产生 -葡萄糖醛酸酶分解4-甲基伞形酮-D-葡 萄糖醛酸苷释放荧光产物(4-甲基伞形酮)在紫 外光下产生特征性荧光-蓝色荧光. 注:MMO-MUG是种营养低的物质,其他细菌生长缓 慢,所以不需高压灭菌. EC-MUG/NA-MUG(配方略) ?产生荧光原理与MMO-MUG产生荧光原理相同. EC-MUG培养基培养基 NA-MUG培养基培养基 青岛海博EC-MUG培养基 大肠杆菌阳性有荧光(左边二管)，本培养基质量关键是 MUG的质量，另外注意检测试管是否本身有荧光。 青岛海博MMO-MUG培养基 大肠杆菌阳性为黄色且有蓝色荧光(左二)，大肠菌群阳性为黄色 (右一)，不变色或不变黄为阴性(左一),注意容器本身应不产生荧光。 ?WS-T 232-2002商业性微生物培养基质量检验 规程 ?ISO 11133-1 食品和动物饲料微生物学.培养基 质量保证和性能试验指南.实验室中培养基质量 保证的通用指南 ?SN/T 1538.1-2005培养基制备指南 第1部分： 实验室培养基制备质量保证通则 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物培养基质量标准微生物培养基质量标准 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物培养基质量控制微生物培养基质量控制 SN/T 1538.1-2005 和 ISO 11133-1 营养琼脂配方(g/L)：营养琼脂配方(g/L)： 蛋白胨10g蛋白胨10g 牛肉浸粉3g牛肉浸粉3g 氯化钠5g氯化钠5g 琼脂15g琼脂15g pH 7.2 -7.4 pH 7.2 -7.4 25 25 在此培养基中蛋白胨提供氮源，牛肉浸粉提供氮源和在此培养基中蛋白胨提供氮源，牛肉浸粉提供氮源和 维生素、氯化钠维持渗透压，琼脂是一种凝固剂。能 够满足绝大多数微生物的生长。一般在37 培养48小 时。 维生素、氯化钠维持渗透压，琼脂是一种凝固剂。能 够满足绝大多数微生物的生长。一般在37 培养48小 时。 不同厂家生产的营养琼脂质量相差非常大。不同厂家生产的营养琼脂质量相差非常大。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 培养基的原理及质量控制培养基的原理及质量控制 配方(g/L)：配方(g/L)： 胰酪蛋白胨5g 酵母浸粉2.5g 葡萄糖1g 琼脂15g pH 7.0 0.2 胰酪蛋白胨5g 酵母浸粉2.5g 葡萄糖1g 琼脂15g pH 7.0 0.2 25 25 在此培养基中胰酪蛋白胨提供氮源，酵母浸粉提供 族维生素、葡萄糖提供碳源，琼脂是一种凝固剂。能够满 足绝大多数微生物的生长。一般在37 培养48小时，ISO 方法中30 培养72小时。 不同厂家生产的平板计数琼脂质量相差非常大。 以下是本公司生产的PCA琼脂与不同厂家的对比试验。 在此培养基中胰酪蛋白胨提供氮源，酵母浸粉提供 族维生素、葡萄糖提供碳源，琼脂是一种凝固剂。能够满 足绝大多数微生物的生长。一般在37 培养48小时，ISO 方法中30 培养72小时。 不同厂家生产的平板计数琼脂质量相差非常大。 以下是本公司生产的PCA琼脂与不同厂家的对比试验。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 培养基的原理及质量控制培养基的原理及质量控制 Baird-Parker琼脂Baird-Parker琼脂 ? ? 金黄色葡萄球菌：黑色菌落，有晕圈和金黄色葡萄球菌：黑色菌落，有晕圈和 透明环透明环 ? ? 表皮葡萄球菌：黑色菌落表皮葡萄球菌：黑色菌落 ? ? 奇异变形杆菌：褐色菌落奇异变形杆菌：褐色菌落 ? ? 大肠艾希氏菌：被抑制大肠艾希氏菌：被抑制 培养基的原理及质量控制培养基的原理及质量控制 Baird-Parker琼脂Baird-Parker琼脂 ?典型特征：呈圆形,表面光滑、凸起、湿润,直径 23mm。灰黑色至黑色,有光泽,常有浅色(非白色) 的边缘,周围绕以不透明圈(沉淀),其外常有一清 晰带(卵磷脂环)。当用接种针触及菌落时具有黄 油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株,除没 有不透明圈和清晰带外,其他外观基本相同。从长 期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落,其黑色常 较典型菌落浅些,且外观可能较粗糙,质地较干燥。 培养基的原理及质量控制培养基的原理及质量控制 Baird-Parker琼脂Baird-Parker琼脂 ?BP琼脂配方:BP琼脂配方: 胰蛋白胨10.0g 牛肉浸粉5.0g 酵母浸粉1.0g 丙酮酸钠10.0g 甘氨酸12.0g 氯化锂5.0g 琼脂15.0g 蒸馏水 950.0mL 亚碲酸钾卵黄增菌液50ml 最终pH7.00.2 培养基的原理及质量控制培养基的原理及质量控制 Baird-Parker琼脂Baird-Parker琼脂 ?胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源和氨基酸，酵 母浸粉提供B族维生素，丙酮酸钠和甘氨酸是 一种生长促进剂，琼脂是一种凝固剂，氯化 锂抑制革兰氏阴性菌生长，亚碲酸钾抑制除 金黄色葡萄球外的革兰氏阳性菌生长。卵黄 提供营养和有利于观察卵磷脂环。卵磷脂酶 阳性的金黄色葡萄球菌分亚碲酸钾,碲离子被 还原成金属碲形成黑色菌落，并分解卵磷脂 形成一个透明环。 Baird-Parker琼脂图片 LSTLST 胰酪蛋白胨20g 氯化钠5.0g 乳糖5.0g 磷酸氢二钾(K2HPO4)2.75g 磷酸二氢钾(KH2PO4)2.75g 月桂基硫酸钠0.1g 蒸馏水1000.0mL 最终pH6.80.2 (25) 胰酪蛋白胨提供大肠菌群生长发育所需的氮源、维生素和氨基酸，乳糖提供发酵所 需的碳源，氯化钠维持渗透压，磷酸盐维持缓冲体系，月桂基硫酸钠抑制非大肠菌 群的生长。大肠菌群和大肠杆菌在LST上发酵乳糖产酸产气。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 BGLB肉汤 配方(g/L): 蛋白胨10.0 乳糖10.0 牛胆盐20.0 煌绿0.0133 pH 7.20.1 25 ?其中蛋白胨提供氮源；乳糖提碳源，大肠菌 群发酵乳糖产酸和产气；牛胆盐含量很高主要抑 制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌，并且有促 进大肠菌群生长的作用；煌绿是一种抑菌剂，主 要的抑制菌革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性菌。 由于本培养基的抑菌作用非常强，所以可以排除 一些假阳性的结果，常用作确证试验。例如，在 LST肉汤中产气，再接种到BGLB肉汤中，若产气 便可以确定为大肠菌群。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 去氧胆酸盐琼脂： 配方(g/L)： 蛋白胨10.0 乳糖10.0 去氧胆酸钠1.0 磷酸氢二钾2.0 柠檬酸铁1.0 柠檬酸钠1.0 中性红0.03 氯化钠5.0 琼脂15.0 pH 7.30.2 25 其中蛋白胨提供氮源；乳糖提供碳源；去氧胆酸钠是一种抑菌剂，主要抑 制革兰氏阳性菌的生长；磷酸氢二钾是一种缓冲体系；柠檬酸铁和柠檬酸钠 是一种生长促进剂；中性红是一种指示剂，在酸性时呈红色，当大肠菌群发 酵乳酸时产生酸性物质，所以菌落呈红色；氯化钠是维持细菌生长时的渗透 压；琼脂是一种凝固剂。海博生物公司生产的去氧胆酸盐琼脂，采用本公司 生产的特殊蛋白胨，所以营养特别丰富，大肠菌群生长迅速。与国外培养基 质量处于同一品质。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 VRBA琼脂： 配方(g/L): 蛋白胨7.0 酵母粉3.0 乳糖10.0 3号胆盐1.5 中性红0.03 结晶紫0.002 氯化钠5.0 琼脂15.0 pH 7.40.1 25 其中蛋白胨提供氮源；酵母粉提供生长促进因子和族维生素；乳糖提供 碳源，大肠菌群发酵乳糖，产生酸性物质；号胆盐是一种抑菌剂，主要是 抑制革兰氏阳性菌；结晶紫也是一种抑菌剂，主要是抑制革兰氏阳性菌和一 部分革兰氏阴性菌；中性红是一种指示剂，在酸性条件显红色，碱性条件下 显无色。氯化钠维持细菌生长时的渗透压。琼脂是一种凝固剂。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 微生物培养基原理及典型特征微生物培养基原理及典型特征 亚硫酸铋琼脂配方(g/L) pH值7.50.1 蛋白胨、牛肉膏提供氨基酸、氮源、生长促进因子，葡萄糖提供碳源，磷酸氢二钠维 持缓冲体系，琼脂是凝固剂，煌绿亚硫酸钠能抑制革兰氏阳性菌，煌绿和铋合用还可 以抑制变形杆菌和大肠菌群，而对沙门氏菌无抑制。沙门氏菌菌落呈黑色，并有金属 光泽，主要是由于硫酸盐和亚硫酸盐还原为硫化物，与铁离子形成硫化铁，所以菌落 呈黑色，且向四周渐淡化。铋离子还原为金属铋而呈金属光泽。 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 BS琼脂： 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 BS琼脂： 李斯特氏菌在李斯特氏菌在FraserFraser肉汤中的典型特征肉汤中的典型特征 青岛海博生物生产500多种微生物培养基青岛海博生物生产500多种微生物培养基 培养基的原量及质量控制培养基的原量及质量控制 孟加拉红琼脂培养基孟加拉红琼脂培养基 (虎红琼脂)(虎红琼脂) 配方(g/L)： ?蛋白胨5.0 ?葡萄糖10.0 ?磷酸二氢钾1.0 ?硫酸镁(7H2O) 0.5 ?孟加拉红0.033 ?琼脂20.0 ?氯霉素0.1 ?其中蛋白胨提供生长所需的氮源和氨基酸，葡萄糖提 供碳源，磷酸二氢钾是缓冲剂，孟加拉红是一种指示剂并 能抑制霉菌菌落生长过大而漫延，氯霉素抑制细菌的生 长，琼脂是凝固剂，此培养基选择性较强，GB标准中使用。 霉菌和酵母菌霉菌和酵母菌 在孟加拉红琼脂培养基上的图片在孟加拉红琼脂培养基上的图片 霉菌和酵母菌霉菌和酵母菌 在孟加拉红琼脂培养基上的图片在孟加拉红琼脂培养基上的图片 霉菌和酵母菌霉菌和酵母菌 在孟加拉红琼脂培养基上的图片在孟加拉红琼脂培养基上的图片 实验原理 ?细菌生化试验 ?各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质 的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地 各有区别，可供鉴别细菌之用。用生化试验的方 法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产 物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反 应。 糖发酵试验 ?微生物能在有氧或无氧条件下代谢各种 糖或醇能力，从而进行各种细菌的鉴别。 实验步骤 ?靛基质(吲哚)试验 ?将被检菌接种到蛋 白胨培养基中， 361培养18h-24h 后，沿试管壁滴加数 滴吲哚试剂于培养物 液面，观察结果。 ?出现红色者为阳 性，出现黄色者为阴 性。 试验原理： ?大肠杆菌能分解蛋白质 中的色氨酸，产生靛基 质(吲哚)，靛基质与对 二甲基氨基苯甲醛结 合，形成玫瑰色靛基质 (红色化合物),为阳性 结果。 实验步骤 ?三糖铁试验： ?将被检菌穿刺接种三糖 铁琼脂，361培养 18h24h后，观察结果。 ?大肠杆菌反应为：斜面 产酸，底层产酸，不产 H2S。 实验步骤 ?氰化钾试验（KCN) ?取少量被检菌分别接种到氰化钾生化实验 管、氰化钾实验对照生化管中，于361 培养18-24h后，观察结果。实验管和对照 管均生长为阳性。实验管不生长，对照管 生长者为阴性。 ?大肠杆菌KCN试验为阳性。 实验步骤 ?尿素酶实验 ?将被检菌接种到尿素酶生化 管中，于361培养18h- 24h后，观察结果。尿素酶溶 液变红为阳性，不变色或者 变黄色为阴性。 ?大肠杆菌尿素酶为阴性。 尿素酶 （黄）阴性、（红）阳性 实验步骤 ?甲基红试验(MR试验) ?将被检菌接种到葡 萄糖蛋白胨水培养基 中，361培养 48h，加甲基红指示剂 数滴，观察结果，呈 现红色者为阳性，呈 现黄色者为阴性。 ?大肠杆菌为阳性。 MR试验 左为阳性（变红）、中为空白对照 右为阴性（变黄） 实验原理细菌生化试验 ?甲基红(Methylred)试验(该试验简称MR试验) ?大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被 分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH 降低到42以下，这时若加甲基红指示剂呈现红 色。因甲基红指示剂变色范围是pH44(红色) pH6.2(黄色)。产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮 酸，但很快将丙酮酸脱羧，转化成醇等物，则培 养基的pH仍在6.2以上，故此时加入甲基红指示 剂，呈现黄色。 V-P试验 ?细菌在葡萄糖代谢中生成丙酮酸，从丙酮酸开 始、随细菌种类不同而有多种分解途径，有的 使丙酮酸进一步分解，生成甲酸、乙酸、乳酸、 二氢和氧化碳等最终产物，有的可使丙酮酸脱 羧变为中性最终产物乙酰甲基甲醇。在碱性条 件下，可被空气中氧气氧化为丁二酮、丁二酮 与蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用，生成红 色化合物，即V-P试验阳性。 ?试剂组成：A液：a-萘酚 B液：40%氢氧化钾 溶液 ?试验时先加A液，再加B液，若加反可能会出现 假阳性。 V-P试验图片 左一为阴性，中间为阳