药物对兔血压的作用.doc

J I A N G S U U N I V E R S I T Y药理学实验报告学院 班级 姓名 学号 时间 2012.05.08 江 苏 大 学实 验 报 告学院 药学院 班级 姓名 学号 天气 多 云 时间 4h 实验时间 2012.04.25 13：0017：00 实验五 药物对兔血压的作用实验 一、 实验目的 观察肾上腺素(adrenaline)、去甲肾上腺素(noradrenaline)、异丙肾上腺素和乙 酰胆碱(isoprenaline)和乙酰胆碱(acetylcholine)等药物对兔血压的作用，并以阻断药为工具分析各药对受体的作用。二、实验原理 血压形成与心室射血、血管阻力和循环血量三个基本因素相关，通过神经-体液调节机制维持正常血压。传出神经是一大类药物，或拟似神经递质，或拮抗神经递质，通过激动或阻断分布于心血管上的肾上腺素受体或胆碱受体，影响心肌收缩性、血管舒张度，从而升高或降低血压。三、实验材料1、实验动物：健康兔子一只2、实验试剂：200g/l的氨基甲酸乙酯(urethane)，1000U/ml肝素钠(sodium heparin)， 0.02g/L盐酸肾上腺素(adrenaline hydrochloride)，0.02g/L重酒石酸去甲肾上腺 素（noradrenaline bitartrate),0.02g/L硫酸异丙肾上腺素(isoprenaline sulf- ate)，10g/L酚妥拉明(phentolamine)，2.5g/L盐酸普萘洛尔（propranolol hydr- ochloride）0.01g/L氯化乙酰胆碱（acetylcholine chloride）,1g/L 硫酸阿托品 （atropine sulfate）10g/L阿托品（atropine），生理盐水3、实验设备：兔箱，兔台，绳子，毛剪，解剖刀，止血钳，玻璃分针，镊子，静脉夹， 眼科剪，压力换能器，动脉夹，传感器，记录电极 四、实验方法和步骤 1动物的麻醉： （1）用右手把两耳拿在手心并抓住颈后部皮肤，提起家兔，然后用左手托住臀部，使呈 坐位姿势。 （2）动物（家兔）称重后，固定于兔箱内，经耳缘静脉注射200g/l的氨基甲酸乙酯。动 物被麻醉后，身体松软，疼痛感觉消失。 （3）注意事项： 1）注射器内气泡排净； 2）首先从静脉的较远端（耳末梢处）确定进针位置，而不是耳朵根部，否则，注射失 败后没有弥补的余地； 3）将进针处及附近的毛拔净，使血管清晰暴露，用手指弹血管（或用酒精棉擦），使 血管充分膨胀； 4）针头开口朝上进针（注射器刻度方向与针头开口方向保持一致，以便掌握注射剂量）， 扎入血管后，针头往前送一些，以确保在血管内（如果在血管内，则阻力很小）， 避免拔除； 5）注药要慢，并密切注意动物反应，如果角膜反射消失，药即使没有注完，也应停止 注射（麻醉药注射太快和过多，都容易导致动物死亡）。 2动物的固定 （1）将动物背位（腹面朝上）固定于手术台（兔台）上，保持颈部挺起，身体正直、舒 展。 （2）动物头部固定用细绳勾住兔牙并将兔头固定好。 （3）前肢背交叉（向后向下交叉，为使动物胸部挺起）、后肢伸展，用绳固定在兔台上。 3手术 （1) 剪毛：用毛剪平贴皮肤剪去颈部被毛，剪毛范围尽量大一些。 （2）暴露气管、颈总动脉、迷走神经与减压神经： a. 用手术刀沿颈部正中纵向切开皮肤3-4cm。注意避开喉头，喉头处有甲状腺，血液 丰富，如伤及，则出血不止，易造成动物死亡。 b. 用止血钳紧贴气管分离肌肉。此为钝性分离方法，不会造成出血：止血钳顶住肌肉， 撑开，反复几次，出现创口，双手食指伸进，纵向扩大创口。注意不要用手术剪。 （如果发生出血现象，用干棉花或沾生理盐水按压出血部位1-2分钟；也可用止血钳夹住出血部位止血。） c. 肌肉分离后，暴露出气管。用手指将气管两侧的肌肉向外翻开，可见到纵向走行的 颈总动脉以及伴行的三根神经：最粗的迷走神经，最细的减压神经，以及介于之间 的交感神经。 （3）分离左右颈总动脉（左右任选一侧）： 将气管旁肌肉翻开，内面朝上，暴露血管和神经。用玻璃分针分别沿动脉、神经纵 向划开附着的结缔组织膜，游离出一段。动脉尽量游离得长一些。分别穿双线备用， 先不结扎。 （4）右侧颈动脉插管：动脉插管与压力换能器相连，直接检测血压值。在此之前，必须 将压力换能器以及动脉插管中充满生理盐水（肝素），并确保有良好的气密性！压 力换能器已经与仪器连接，各项参数都已设置好，处于工作状态。 a. 首先在远心端结扎血管（尽量远端，保证有足够的血管长度来插管）。 b. 然后在近心端夹动脉夹（尽量近端，用动脉夹根部夹住血管，确保夹紧！否则 剪开血管后，由于动脉压力很大，血液会喷出）。血管中间这段鼓起。 c. 拎起结扎线，将血管提拉起，在靠近结扎处用小剪在血管上向下剪一开口，在小镊 子的辅助下，将动脉插管插入，尽量插入长一些，避免插管滑脱。在结扎好动脉插 管前，一定不能轻易放开动脉夹！ d. 将动脉插管与血管结扎紧，结扎处应靠近血管开口处，不要太靠下，否则管子容易 滑出。 e. 慢慢松开动脉夹，观察动脉插管没有出现异常情况，计算机屏幕上也显示出正常的 血压波后，再将动脉夹撤掉。（用湿纱布盖住伤口，防止伤口干燥） 4.实验程序(1）装置连接：RM6240B 通道4，接压力换能器，采集血压信号。(2）参数设置：打开信号采集软件，连接4通道，对应血压信号。示波状态下修改参数 设置：滤波频率100Hz,采集频率800Hz，灵敏度12kp，扫描速度500ms/s。实验连续 记录，不要间断，每一次处理都应做好标记。(3） 操作步骤： 药物注射顺序:序号药品剂量ug/kg给药体积ml/kg1（1）肾上腺素100.1 （2）去甲肾上腺素100.1 （3）异丙肾上腺素500.12（1）酚妥拉明1mg/kg0.1 （2）肾上腺素100.1 （3）去甲肾上腺素100.1 （4）异丙肾上腺素500.13（1）乙酰胆碱10.1 （2）阿托品0.1mg/kg0.2 （3）乙酰胆碱10.14 (1)乙酰胆碱100.1 （2）阿托品1mg/kg0.1 （3）乙酰胆碱100.1放血4) 观察RM6240B系统记录的血压曲线 正常情况：肾上腺素（adrenaline）：去甲肾上腺素（noradrenaline）：异丙肾上腺素(isoprenaline sulfate)：酚妥拉明(phentolamine)：肾上腺素（adrenaline）：去甲肾上腺素（noradrenaline）：异丙肾上腺素(isoprenaline sulfate)：乙酰胆碱（acetylcholine）：阿托品（atropine）：乙酰胆碱（acetylcholine）：阿托品（atropine）：乙酰胆碱（acetylcholine）：阿托品（atropine）：乙酰胆碱（acetylcholine）：放血：第一次放血：生理盐水：第二次放血：第三次放血：第四次放血：第五次放血：第六次放血：5、 实验数据记录和整理mmHg正常肾上腺素去甲肾上腺素异丙肾上腺芬妥拉明肾上腺去甲肾上腺收缩121.79191.91159.16119.1569.47115.85116.51舒张86.83151.91126.4098.2732.76101.3496.73平均105.87169.15141.84109.8344.98107.97107.07mmHg异丙肾上腺素乙酰胆碱阿托品乙酰胆碱阿托品乙酰胆碱阿托品收缩98.9364.8556.2856.2857.3873.6454.96舒张80.931.2228.826.8226.6-1.7626.38平均90.9940.2537.8436.1236.8338.635.59mmHg乙酰胆碱生理盐水放血一放血二放血三放血四放血五收缩41.5569.6967.4951.2238.2541.5527.7舒张17.8150.5648.3631.2220.8824.628.57平均26.05581455.0738.9828.4632.3616.996、 实验讨论 肾上腺素具有、受体激动作用；去甲肾上腺素具有受体激动作用；异丙肾上 腺素具有受体激动作用；乙酰胆碱具有M胆碱受体激动作用，阿托品为M胆碱受体 阻断药。 当耳缘静脉注射肾上腺素时家兔血压升高，注射去甲肾上腺素时家兔血压上升， 注射异丙肾上腺素时家兔血压再次下降。 注射受体阻断剂酚妥拉明后家兔血压降低，再注射肾上腺素时家兔血压上升， 注射去甲肾上腺素血压再次上升，注射异丙肾上腺素时血压下降。 注射乙酰胆碱时家兔血压下降，正常情况下注射阿托品时血压应该回升，但在实 验中血压却降低，有可能是阿托品剂量太小，不足以对抗乙酰胆碱的降血压作用，当 再次加大阿托品的注射量时，家兔血压略微回升，与其拮抗乙酰胆碱的M受体激动作 用相符，但当再次交替注射乙酰胆碱和阿托品时，对家兔血压的作用与理论不符，有 可能与两者的剂量有关。 放血时，第一次15ml，以后每次放血10ml，血压大致呈下降趋势，直到抽不出血， 最后注射空气处死家兔。7、 注意事项1、Adrenaline等药物静脉注射时容积小速度快，阻滞药需缓慢注入。2、待血压恢复到基本稳定后，再注射下一个药物。八、思考题1、肾上腺素能激动哪些受体？ 答：肾上腺素能激动、受体，产生强烈快速而短暂的兴奋和型效应，对心脏1- 受体的兴奋，可使心肌收缩力增强，心率加快，心肌耗氧量增加。同时作用于骨骼 肌2-受体，使血管扩张，降低周围血管阻力而减低舒张压。兴奋2-受体可松弛支 气管平滑肌，扩张支气管，解除支气管痉挛；对-受体兴奋，可使皮肤、粘膜血管 及内脏小血管收缩。2、静脉注射肾上腺素，血压常出现先升高后降低，最后恢复，其原因是什么？ 答：肾上腺素能兴奋心脏1受体，使心脏兴奋，心输出量增加，故收缩压升高；作 用于骨骼肌2-受体，使血管扩张，降低周围血管阻力，故舒张压降低；随着激素浓 度减小，血压恢复到原来的水平。3、 简述两种肾上腺素激动药对心脏活动、血压影响的异同点。 答： 肾上腺素（E）去甲肾上腺素(NE)心脏心率、心收缩力、心输出量均增加对心脏的直接作用同E，但因降压反射使心率降低血管外周阻力无明显变化，外周阻力明显增加皮肤、肾、胃肠血管收缩，较E更明显骨骼肌、肝、冠脉血管舒张无明显作用效应血压升高（心输出量增加）血压升高更多（外周阻力增加）4、 酚妥拉明对肾上腺素对血压的作用有何影响？ 答：酚妥拉明为受体阻断剂，肾上腺素为受体激动剂，酚妥拉明会选择性地与 受 体结合，其本身不激动或较少激动肾上腺素受体，却能妨碍肾上腺素与受体结合， 从而产生抗肾上腺素作用，进而将肾上腺素的升压作用翻转为降压，这个现象称为 “肾上腺素作用的翻转”（adrenaline reversal）。受体阻断药选择性地阻断了与血管收 缩有关的受体，留下与血管舒张有关的受体；所以能激动受体和受体的肾上腺 素的血管收缩作用被取消，而血管舒张作用得以充分地表现出来。但对于主要作用 于血管受体的去甲肾上腺素，它们只能取消或减弱其升压效应而无“翻转作用”。 5、阿托品对乙酰胆碱对血压作用有何影响？ 答：阿托品为M受体阻断剂，与M胆碱受体有较高亲和性，能阻断乙酰胆碱与M 受体的结合，拮抗其对M受体的激动作用。因乙酰胆碱能舒张血管，使血压降低， 而阿托品能够对抗其舒张血管的作用，从而使血压升高。 九、参考文献 1朱依谆，殷明，等.药理学.第7版.北京：人民卫生出版社，2011.8 2陆源，夏强，等.生理科学实验教程.浙江:浙江大学出版社，2004.8 十、感想 做实验前几天就听老师说这次做的实验是静脉插管实验，做不好有可能会造成血喷，同学们都感觉既激动又恐怖，特别是对于从小晕血的我而言，完全是噩梦，就这样一直纠结到做实验当天。丑媳妇总是要见公婆的，我硬着头皮提早来到实验室缓和情绪。 这次是视频实验指导，当看到切开家兔颈部皮肤时，感觉有点胃里一阵翻滚，此时我就识趣的做到一边的凳子上了，过了一会感觉缓和了很多就继续看视频。 实验开工啦，当绑好家兔后，感觉很高兴，可是老师过来一看，着实把我们使劲的批了一顿，原来是我们固定家兔四