TOBENUMBERONE——检测三聚氰胺方法的研究.doc

序号： 编码： 化学院第二届“创新杯”大学生化学实验设计大赛参赛作品申报书 作品名称： 检测三聚氰胺方法的研究 学院全称： 化学与分子工程学院 团队名称： To Be Number One A申报者情况第一作者情况姓 名李浩性别男出生年月88年11月学院全称化学与分子工程学院专业、年级海洋科学07级四班学 历本科学制4入学时间07年9月作品名称检测三聚氰胺方法的研究宿 舍22号楼甲D区214宿舍电话手机其他作者情况姓 名性别年龄学历所在单位蓝明超男20本科青岛科技大学海科07级4班李发建男 19本科青岛科技大学海科07级4班学院学术委员会意见 年 月 日 B申报作品情况作品全称检测三聚氰胺方法的研究作品设计、发明的目的和基本思路，创新点，技术关键和主要技术指标近期因为奶制品中含有三聚氰胺，使中国的诸多明星奶制品品牌站在了舆论的风口浪尖上，很多的婴幼儿因此患上了肾结石，危害极大，为此，我们本次试验要从化学的专业角度分析三聚氰胺的组成，性质，作用，危害以及我们的核心研究对象：快速检测三聚氰胺地方法，让更多的消费者能够更好的辨别优劣奶粉，让家人在追求高品质生活的同时免受有毒奶品的侵害作品的科学性先进性（必须说明与现有技术相比、该作品是否具有突出的实质性技术特点和显著进步。请提供技术性分析说明和参考文献资料）科学性：能够很好的检测出三聚氰胺的含量，精度高，简便易操作。参考文献:GB/6379.1 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）GB/T6379.2 测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）确定标准测量方法重复性与 再现性的基本方法 GB/T6682 分析实验室用水规格和实验方法使用说明及该作品的技术特点和优势，提供该作品的适应范围及推广前景的技术性说明及市场分析和经济效益预测前景：该法能够快速的检测出三聚氰胺的含量，有很好的市场，有着巨大的科学价值以及经济价值，操作的简便性可以使更多的人快速准确的检测三聚氰胺的含量，从而确保自身及家人的健康技术优势：检测灵敏度高，该方法定量限为0.3ppm；检测时间快，每个样品的检测时间为15分钟，以往的方法最快也需要2个小时；仪器价格相对低，国产每台56万元，进口每台10多万元；检测成本低，每检一个样品的成本不超过50元，以往的检测成本最低也需要200元；操作便捷，普通工作人员经过简单培训即可操作。C参赛作品打印处检测三聚氰胺地方法研究一： 前言： “三鹿奶粉”事件有如一场飓风，席卷了不乏知名品牌的22家乳制品企业，更引发人们思考，为了更好的让大家了解三聚氰胺并能够快速的检测三聚氰胺，经过大量的参考资料和试验，我们总结了一套快速检测三聚氰胺的方法。下面我们就一样一样给大家展示二：三聚氰胺概述：三聚氰胺（英文名Melamine）是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，简称三胺，又叫2 ,4 ,6- 三氨基-1, 分子式： C3N6H6 分子量 ：126.12结构式主要用途： 三聚氰胺是一种用途广泛的基本有机化工中间产品，最主要的用途是作为生产三聚氰胺甲醛树脂（MF）的原料。三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。毒性危害及诊治： 目前三聚氰胺被认为毒性轻微，大鼠口服的半数致死量大于3克/公斤体重。据1945年的一个实验报道：将大剂量的三聚氰胺饲喂给大鼠、兔和狗后没有观察到明显的中毒现象。动物长期摄入三聚氰胺会造成生殖、泌尿系统的损害，膀胱、肾部结石，并可进一步诱发膀胱癌假蛋白原理：由于食品和饲料工业蛋白质含量测试方法的缺陷，三聚氰胺也常被不法商人用作食品添加剂，以提升食品检测中的蛋白质含量指标，因此三聚氰胺也被人称为“蛋白精”。合成工艺尿素法成本低，目前较多采用。尿素以氨气为载体，硅胶为催化剂，在380-400温度下沸腾反应，先分解生成氰酸，并进一步缩合生成三聚氰胺。6 CO（NH2)2 C3N6H6 + 6 NH3 + 3 CO2生成的三聚胺气体经冷却捕集后得粗品，然后经溶解，除去杂质，重结晶得成品三：三聚氰胺的传统检测方法：1： GC-MS法测定动物食品中的三聚氰胺：(1)标准样品配制：取50mg三聚氰胺标准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的标准溶液，使用时，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀释至所要的浓度。(2)提取：称取饲料样品5g，加入50ml0.1%三氯乙酸提取液，充分混匀，加入2mL2%乙酸铅溶液，超声20min。然后取部分溶液转移至10mL离心管中，8000rpm/min离心10min，取上清液3mL过混合型阳离子交换小柱(PCX)。(3)净化(PCX小柱，60mg/3mL)：a)活化及平衡：3mL甲醇，3mL水b)上样：加入提取液3mLc)淋洗：3mL水;3mL甲醇;弃去淋洗液并将小柱抽干。d)洗脱：5mL5%氨化甲醇(v/v)洗脱。(5%氨化甲醇的配制：5mL氨水+95mL甲醇)。e)浓缩：50，氮气吹干，20%甲醇/水定容至2mL，HPLC分析或衍生后GC/MS分析。2：超高效液相色谱2电喷雾串联质谱法测定三聚氰胺样品经1%三氯乙酸2二甲基亚砜提取,Wa te rs O as is MCX柱净化,超高效液相色谱分离,最终采用电喷雾串联四极杆质谱进行检测。结果表明,三聚氰胺的含量范围为105 000g / kg时,线性关系良好 r 0199 。在10100g / kg 的添加水平范围内的平均回收率为83%94%,相对标准偏差为412%615%。该方法的检出限为10g / kg.3：Spectra-Quad在线分析三聚氰胺含量三聚氰胺含量的实验室检测方法存在检测结果受蛋白质分子中氮含量影响较大的问题，这种相似性会导致三聚氰胺的检测异常困难。赛默飞世尔科技（上海）有限公司提供的Spectra-Quad在线成分分析仪可以实现三聚氰胺含量的在线实时连续检测（见图1），并能较好的解决检测结果受蛋白质含量影响的问题。Spectra-Quad采用近红外线吸收检测技术，是一种无接触、无损伤和无危害的检测方法。传感器利用特定波长的近红外线照射样品，并对反射光线进行分析，且Spectra-Quad所用光线亮度非常低，不会加热或损伤样品。对于三聚氰胺来说，其含量越高所反射出的光线就越少。实际检测中，检测人员可以将Spectra-Quad传感器固定到任何现有的传送装置上，通过使用粉末取样仪，实现对气动传输产品中三聚氰胺含量的连续检测，检测数据可以输出到某个工艺控制系统或PC机控制器内，从而确保产品免受三聚氰胺的污染。四：我们的创新方案：快速检测三聚氰胺 液相色谱法1原理 ： 用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱 -紫外检测器/二极管阵列检测器检测，外标法定量。试剂和材料 1 乙腈（CHCN）：色谱纯。 2 磷酸（HPO）。3 磷酸二氢钾（KHPO）。 4 三聚氰胺标准物质（CHN）：纯度大于或等于99%。 5 三聚氰胺标准贮备溶液：1.0010 mg/L。 6 标准工作溶液。 、（1）标准溶液A：2.0010 mg/L 准确移取20.0mL三聚氰胺标准贮备溶液（4.5），置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。 （2）标准溶液B：0.50mg/L。 准确移取0.25mL标准溶液A（4.6.1），置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 （3）按表1分别移取不同体积的标准溶液A（4.6.1）于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。（4）按表2 分别移取不同体积的标准溶液B（4.6.2）于容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。 表1 标准工作溶液配制（高浓度） 标准溶液A体积（mL）0.100.251.001.255.0012.5定容体积（mL）100100100505050 标准溶液B体积（mL1.002.004.0020.040.0 定容体积（mL）1001001001001002仪器 ：1 液相色谱仪：配有紫外检测器/二极管阵列检测器。 2 分析天平：感量0.0001g和0.01g。 3 pH计：测量精度0.02。 4 溶剂过滤器。3 准备步骤（1） 试样的制备 称取混合均匀的15g原料乳样品（准确至0.01g），置于50mL具塞刻度试管（4.11）中，加入30mL 乙腈（4.1），剧烈振荡6min，加水定容至满刻度，充分混匀后静置3min，用一次性注射器（4.8）吸 取上清液用针式过滤器（4.10）过滤后，作为高效液相色谱分析用试样。 （2） 高效液相色谱测定 色谱条件 ：a) 色谱柱：强阳离子交换色谱柱，SCX，250mm4.6mm（i.d.），5m，或性能相当者。 注：宜在色谱柱前加保护柱（或预柱），以延长色谱柱使用寿命。 b) 流动相：磷酸盐缓冲溶液（4.7）- 乙腈（70+30，体积比），混匀。 c) 流速：1.5mL/min。 d) 柱温：室温。 e) 检测波长：240nm。 f) 进样量：20L。 4 实验步骤：（1） 仪器的准备 开机，用流动相平衡色谱柱，待基线稳定后开始进样。 （2.） 定性分析 依据保留时间一致性进行定性识别的方法。根据三聚氰胺标准物质的保留时间，确定样品中三聚氰 胺的色谱峰（参见附录A）。必要时应采用其他方法进一步定性确证。 （3 ）定量分析 校准方法为外标法。 校准曲线制作 根据检测需要，使用标准工作溶液（4.6.3）分别进样，以标准工作溶液浓度为横坐标，以峰面积为 纵坐标，绘制校准曲线。 （4）试样测定 使用试样（6.1）分别进样，获得目标峰面积。根据校准曲线计算被测试样中三聚氰胺的含量（mg/kg）。 试样中待测三聚氰胺的响应值均应在方法线性范围内。 5 结果计算 （1） 计算公式 结果按式（1）计算： V 1000 X=c （1） m 1000 式中： X原料乳中三聚氰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c从校准曲线得到的三聚氰胺溶液的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V试样定容体积，单位为毫升（mL）； m样品称量质量，单位为克（g）。 （2） 计算结果有效数字 通常情况下计算结果保留3位有效数字；结果在0.11.0mg/kg时，保留2位有效数字；结果小于0.1 mg/kg时，保留1位有效数字。 （3） 平行试验 按以上步骤，对同一样品进行平行试验测定。 (4） 空白试验 除不称取样品外，均按上述步骤同时完成空白试验。 (5) 方法检测限 本方法的检测限为0.05mg/kg。 (6) 回收率 在添加浓度0.30mg/kg100.0mg/kg范围内，回收率在93.0%103%之间，相对标准偏差小于10%。 (7) 精密度 本标准精密度数据按照GB/T6379.1和GB/T6379.2规定确定，其重复性和再现性值