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批准： 翁益平质量Pillar审核：沈洪武、康黎东 编写： 李贞编号：Q/SBJ4（品）-2.04.2010版本：第3页共3页名称麦汁和啤酒的-氨基氮检测方法 保 密日期：2010年7月12日麦汁和啤酒的-氨基氮检测方法1. 目的 1.1 用分光光度法比色测定麦汁和啤酒的-氨基氮。2. 范围 2.1 本方法适用于所有种类的麦汁和啤酒。3. 原理 3.1 茚三酮氧化剂与氨基酸反应被还原成水合茚三酮，氨基酸被氧化脱羧，产生醛、二氧化碳和氨，然后氨水合茚三酮和还原型水合茚三酮反应，生成兰紫色络合物，产生的颜色深浅与游离-氨基氮含量成正比，在波长570nm下有最大吸收值，可用来比色测定。 4. 安全及预防 4.1 穿戴PPE，如隔热手套；身体勿靠近沸水，以免溅出；具塞试管的玻璃塞应盖紧，以免飞溅。4.2 操作必须严防任何外界痕迹量的氨基酸引入，因此有关玻璃仪器都必须仔细洗涤，洗涤后只能接触其外部表面，移液管必须用吸球吸。4.3 测定中加入果糖等作为还原性发色剂，碘酸钾在稀释液中使茚三酮保持氧化态，以阻止进一步发生不希望的生色反应。5. 试剂 5.1 显色剂： 10g Na2HPO412H2O(磷酸氢二钠)6g KH2PO4（磷酸二氢钾）0.50g 水合茚三酮 0.30g 果糖将以上试剂用水溶解后稀释至100mL（此溶液在低温棕色瓶子可保存2周，PH应为6.66.8）。5.2 稀释溶液：称2g碘酸钾（KIO3）溶于600mL水中，再加96%乙醇400mL，贮存于冰箱。5.3 标准溶液：溶0.1072g甘氨酸于100mL水中，在冰箱贮藏。 6. 仪器设备 6.1 紫外可见分光光度计UV-2450； 6.2 25mL具塞试管；6.3 移液枪：6.4 电炉（1000W-2000W）；6.5 200mL容量瓶；6.6 恒温水浴锅（精度0.5）；7. 步骤 7.1 取过滤后的麦芽汁2.00mL，置于200mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。7.2 吸取标准液2.00 mL，置于各个200mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。7.3 依次吸取2.00mL蒸馏水，稀释后的标准液，稀释后的麦芽汁溶液于试管架的试管中（每吸取一样品，移液枪应用该样品润洗3次），并在各试管中加入1.00mL显色剂，混匀，在恒沸水浴中准确加热16分钟，取出在20水浴中恒温20分钟。7.4 在各试管中加入5.00ml碘酸钾稀释液并摇匀，于30分钟内在570nm波长处用10mm比色皿测定其吸光度，测定时以装蒸馏水试管为空白，装标准液为标准，以后依次为麦汁。8. 结果的表示和方法的可靠性 样品溶液的吸光度 -N（mg/L麦芽汁）=-200 标准溶液的吸光度 计算结果
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