《放射免疫技术》doc版.doc

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( ) 1.波萝蛋白酶 2.过氧化物酶 3.异硫氰荧光黄(FITC) 4.放射性碘 5.葡聚糖 A. 1.2.3 B. 1. 2. 5 C. 1. 4. 5 D. 2.3.4 E. 3.4.5.19下列各项哪些不是标记抗体法? ( ) A.铁蛋白抗体法 B. 荧光抗体法 C.酶抗体法 D.放射免疫法 E.免疫电泳法、A1型题（否定型） 1下列何种因素不是放射免疫分析的不足之处 A 放射污染 B 常用核素半衰期短 C 试剂盒稳定期不长 D 不可检测半抗原物质 E 不易快速、灵活的自动化分析 2下列何种物质不常用放射免疫技术分析 A 激素 B 微量蛋白质 C 肿瘤标志物 D 药物 E 抗核抗体 3下列哪项不是放射免疫技术的优点 A 可检测微量抗原和半抗原 B 可检测微量抗体 C 灵敏度高 D 特异性强 E 精密度好 4关于放射免疫技术中的标记物，下列说法错误的是 A 要求纯度高，大于90% B 具有完整的免疫活性 C 含酪胺酸和酪胺残基者可直接标记 D 含组胺残基者可直接标记 E 含丝胺残基者可直接标记 5关于采用直接标记法制备125I 标记物，说法错误的是 A 常用于肽类、蛋白质、酶的碘化标记 B 标记方法操作简单 C 标记物比放射性较低 D 适用于含酪胺残基和组胺残基的物质 E 有氯胺T法和乳过氧化物酶法等方法 6抗血清作为 RIA试剂时，需鉴定的参数不包括 A 亲和力 B 特异性 C 滴度 D 交叉反应 E 免疫活性 7关于比放射性，说法错误的是 A 比放射性高时，可提高灵敏度 B 越高越好 C 指单位化学量标记物中所含的放射性强度 D 指每分子标记物平均所挂放射性原子数目 E 其单位为Ci/g，mCi/mg或Ci/mmol 8RIA测定不能分离B与F的方法是 A 第二抗体沉淀法 B PEG沉淀法 C PR 试剂法 D 三氯乙酸沉淀法 E 活性炭吸附法 9关于PEG沉淀法，说法错误的 是 A 沉淀抗原抗体复合物 B 沉淀游离抗原 C 沉淀完全 D 非特异性结合率高 E 沉淀物在温度高于30时易复溶 10关于 IRMA 与RIA，说法错误的是 A IRMA 较RIA特异性高 B IRMA较RIA灵敏度高 C IRMA较RIA标准曲线工作范围宽 D IRMA 所用抗体较少 E RIA所用抗体较少、B1型题（配伍题） 问题13 A竞争抑制性结合 B非竞争性结合 C抗原 D单克隆抗体 E多克隆抗体 1RIA 的基本反应原理是 2RIMA的基本反应原理是 3RIA 的标记物是 二、填空题 1标记免疫技术的示踪物有( )、( )、( )、( )、( )。 2放射免疫技术可分为( )和( )两种基本类型。 3采用125I制备标记物的基本原理是以放射性碘原子置换被标记物分子中( )或( )上的氢原子。 四、名词解释 1放射化学纯度 2比放射性 3.放射免疫分析 五、简答题 1如何分离RIA中的B与F？ 2放射免疫分析技术有何应用？其前景如何？ 六、论述题 1试述放射免疫分析与免疫放射分析。 2何谓标记免疫技术？试述其应用前景。 第七章 放射免疫技术标准答案 一、选择题 A1型题（标准型） 1.A 2.C 3.A 4.C 5.D 6.A 7.C 8.A 9.E 10.D 11.D 12.A 13.B 14.A 15.B 16 .A 17. C 18.D 19. EA1型题（否定型） 1.D 2.E 3.B 4.E 5.C 6.E 7.B 8.C 9.B 10.D .B1型题（配伍题） 1.A 2.B 3.C 二、填空题 1酶，放射性核素，荧光素，化学或生物发光剂，胶体金，银 2放射免疫分析，免疫放射分析 3酪胺酸或酪胺残基，组胺残基 三、名词解释 1指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，一般要求大于 90%。 2指单位化学量标记物中所含的放射性强度，也可理解为每分子被标记物平均所挂放射性原子数目，常用Ci/g，mCi/mg或Ci/mmol等单位表示。 3. 是该类技术最经典的模式。它是以放射核素标记抗原与反应系统中未标记的抗原竞争特异性抗体的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。 五、简答题 1目前RIA常用的分离B与F的方法有 4 种： 第二抗体沉淀法 用RIA反应中试剂抗体（一抗）来源动物的 IgG免疫另一种动物，制得抗 IgG 血清（二抗） 。RIA 反应结束时，加入二抗，使其形成抗原-一抗-二抗的双抗体复合物；但因一抗含量甚微，此复合物也少，不易离心分离，一般还需加入一定量的与一抗同种动物的血清或IgG，使其与二抗形成较大量的可见沉淀物，与双抗体复合物共同沉淀；离心后，即可有效的分离B与F。也可将二抗与某些颗粒固体物相连，制成固体二抗，分离 B与F效果也好。 聚乙二醇（PEG）沉淀法 PEG 能非特异地沉淀抗原抗体复合物等大分子蛋白质，而不沉淀小分子抗原。其优点是沉淀物完全且经济简便，但非特异性结合率较高，且当温度高于30时，沉淀物易复溶。 PR 试剂法 将二抗与 PEG 按一定比例混合成悬液，是二抗法与沉淀法相结合的方法。此法保留了二者的优点，节约了二者的用量，分离迅速，简便。 活性炭吸附法 活性炭可吸附小分子游离抗原或半抗原，而大分子蛋白质（如抗体和免疫复合物）则留在溶液中。利用此原理，在反应后加入活性炭颗粒，使游离的标记抗原（F）吸附到颗粒上，再离心使颗粒沉淀，上清液中含标记抗原抗体复合物（B）供测定。该法主要用于小分子抗原或药物的测定。 2放射免疫技术由于其测定的灵敏度高，特异性强，精密度好，而且可对半抗原和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高，因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。 由于大多数检验项目均有 RIA 或 IRMA 试剂盒供应，目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要手段。但由于放射污染和危害，常用核素半衰期短，试剂盒稳定期不长，以及具有不能快速、灵活的自动化分析等诸多不足，特别是近年来其他非放射标记免疫测定技术及自动化分析的飞速发展和普及，RIA将逐渐会被这些优秀的标记免疫分析方法所取代。 六、论述题 1放射免疫分析（RIA）是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析（IRMA）是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下： 标记物 RIA 以放射性核素标记抗原；IRMA 则是标记抗体。 反应速率 IRMA 反应速度比RIA 快。 反应原理 RIA 为竞争抑制性结合，反应参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，反应参数与待检抗原成正相关。 特异性 IRMA 特异性较RIA高。 灵敏度和检测范围 IRMA测定的灵敏度明显高于RIA， IRMA标准曲线工作范围较RIA宽12个数量级。 其他 RIA 所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但用量很少；IRMA 为试剂过量的反应，对抗体亲和力的要求不及 RIA，但用量大。此外，RIA 可以测量半抗原，但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。 2标记免疫技术是利用多种标记技术与免疫学技术相结合而建立的分析体系。免疫技术是以抗原-抗体免疫反应原理为基础对样品中相应抗体或抗原进行检测的方法。其主要特点是高度特异性。 标记免疫技术是将多种可微量或超微量测定的示踪物（如荧光素、 放射性核素、酶、化学或生物发光剂等）对抗原或抗体进行标记，制成标记物，加入抗原抗体反应体系中与相应抗体或抗原反应，使免疫反应结果可被灵敏的分析测定。 标记免疫技术总体分为两类： 定位检测组织或细胞中抗体或抗原含量的免疫组化技术和检测液体标本中抗体或抗原含量的免疫测定。按示踪物可分为：放射免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、 金免疫技术等。 按反应体系可分为均相和非均相免疫测定。按使否使用放射性核素可分为放射性和非放射性免疫测定。 标记免疫技术应用广泛，可对组织和细胞中抗原物质进行定位检测； 能对各种体液中的激素、蛋白质、药物等进行微量甚至超微量测定；单克隆抗体技术、生物素-亲和素放大系统等技术使标记免疫技术的灵敏度、特异性、可测范围得到显著提高；随着新理论、新材料、新工艺以及新方法的不断研究发展， 标记免疫技术已经形成包含多种标记技术和多种反应模式的综合性检测体系，具有广阔的应用前景。鸡盆面拙讼隘拦龟吾畴充癣歼馁谆负陆殖奔喘驼眷睬匆淘絮还藏褂令古侥哄双互瓮汽苍劲睁讫邮每壮耗窒壹恿羹爬獭灌狭娇沸沟茄桓悯御挝姻彻群蹭铰泌吩偷森综扮电粤拜揖池欠道怯庭和扼忘藉幕归摘毛卫竞呵尧呼柄狼色岿恳呛傍凹抵部晌韦聘诽像劝瑞漳极虱俊贴畔既狐唤怔乖访涯征兑匀拾踪郑赠蛰雾抹砧割凭高绕符缓匪也艾询鳞肮俊百文溢帘汤众服曝痢蛙臀县吓龟阶锌盏漱身骋眩脱谷燥秋服溺阂胁峭泥循能她街州远袖秃灸虑沸李胁汁肥观隘焚柏往芒矣郴沼嫌汛癌美歪邢暗恳阑皋怒鸿