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实验知识详解与训练用显微镜观察多种多样的细胞一、本实验主要是让学生掌握对显微镜的使用，所以本实验中主要讲解的内容是显微镜如何使用，以及使用过程中出现的问题。1使用显微镜的操作步骤(1)低倍镜的使用 (2)高倍镜的使用（3） 镜 目镜：目镜越长，放大倍数越小 头 物镜：带螺纹，物镜越长，放大倍数越大光学结构 反 平面：视野变暗 光 镜 凹面：视野变亮 准焦螺旋：使镜筒上升或下降 机械结构 转换器：更换物镜 光圈：调节视野亮度2显微镜的放大倍数(1)显微镜的放大倍数是指物像长度或宽度的放大倍数，而不是面积或体积。(2)总的放大倍数是目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。3目镜与物镜长短与放大倍数之间的关系(1)物镜越长，放大倍数越大，距装片距离越近，如H1；反之则放大倍数越小，距装片距离越远，如H2。(2)目镜越长，放大倍数越小，反之则放大倍数越大。4放大倍数的变化与视野范围内细胞数量变化的关系(1)一行细胞数量的变化，可根据放大倍数与视野范围成反比的规律计算。如：在1010的放大倍数下看到64个细胞在视野的直径上排成一行，则转换为1040的放大倍数后，看到的一行细胞数为16个。(2)圆形视野范围内细胞数量的变化，可根据看到的实物范围与放大倍数的平方成反比的规律计算。如：在1010的放大倍数下看到64个细胞充满视野，则转换为1040的放大倍数后看到的细胞数为4个。5高倍镜与低倍镜下视野的比较物像大小看到细胞数目视野亮度物镜与载玻片的距离视野范围高倍镜大少暗近小低倍镜小多亮远大6判断污物存在的位置(1)污物可能存在的位置：物镜、目镜或装片(2)判断方法二、例题某学生用显微镜观察人的口腔上皮细胞装片，据表回答问题：项目目镜物镜A组510B组1510C组840(1)视野中细胞数目最多的是_组；同样光源下，光线最暗的是_组，细胞图像最大的是_组。(2)高倍镜下，如果视野较暗，物像又模糊不清，这时应转动或调节的结构是_、_和_。(3)用A组显微镜观察，在视野内的直径上看到一行相连的9个细胞，若用B组显微镜观察，则大约可以看到这行细胞中的_个。(4)某同学在实验时，先用一块洁净纱布擦拭镜头，然后把装片放在显微镜载物台正中央，并用压片夹压住。然后在双眼侧视下，将物镜降至接近玻片标本12 cm时停止。用左眼朝目镜里观察，同时转动粗准焦螺旋，缓缓上升镜筒。请指出该同学操作中不正确的地方并改正。 。解析：(1)显微镜的放大倍数物镜放大倍数目镜放大倍数。由此可知，A组放大倍数最小，C组放大倍数最大。放大倍数越大，视野中的细胞数目越少，每个细胞的图像越大；反之，放大倍数越小，视野中的细胞数目越多，每个细胞的图像越小。(2)调视野亮度可调节反光镜(凹面镜亮，平面镜暗)、光圈(大光圈亮，小光圈暗)，调亮可选择凹面镜或大光圈，高倍镜下将物像调清晰可调节细准焦螺旋。(3)显微镜的放大倍数与看到的细胞数目成反比。假设用B组显微镜观察可看到的细胞数为X，则根据题意可得，(510)(1510)X9，解得X3。 (4)用一块洁净纱布擦拭镜头是错误的，显微镜要用专门的擦镜纸擦拭镜头，在调节显微镜时要将物镜降至接近玻片标本时(距离约为0.5 cm)停止，而不是接近玻片标本12 cm时停止。答案：(1)ACC(2)反光镜光圈细准焦螺旋(3)3(4)“洁净纱布擦拭镜头”改为用“专门的擦镜纸擦拭镜头”；“将物镜降至接近玻片标本12 cm时停止”改为“将物镜降至接近玻片标本时(距离约为0.5 cm)停止”三、模拟训练1.观察细胞中染色体行为并计数时，使用光学显微 镜的正确方法是 （ ）A.低倍镜对焦，将观察目标移至视野中央，转用高倍镜并增加进光量，调焦观察B.低倍镜对焦，将观察目标移至视野中央，转用高倍镜并减少进光量，调焦观察C.低倍镜对焦，转用高倍镜，将观察目标移至视野中央，减少进光量，调焦观察D.高倍镜对焦，将观察目标移至视野中央，增加进光量，调焦观察2.使用显微镜观察洋葱根尖细胞染色体的基本步骤包括：调节细准焦螺旋；转换高倍镜；把分裂中的细胞移至视野中央；将洋葱根尖永久装片放在低倍镜下观察。正确的操作顺序是（）A.B. C.D.3.如图所示，甲图中表示目镜，表示物镜，表示物镜与载玻片之间的距离，乙和丙分别表示不同物镜下观察到的图像。下面描述正确的是 ( ) A.比的放大倍数大，比的放大倍数小B.把视野里的标本从图中的乙转为丙时，应选用，同时提升镜筒C.从图中的乙转为丙，正确调节顺序：转动转换器调节光圈移动标本转动细准焦螺旋D.若使物像放大倍数最大，甲图中的组合一般是4. 下列关于高倍物镜的叙述，正确的是（ ）A.因为藓类叶片大，在高倍镜下容易找到，所以可以直接使用高倍物镜观察B.在低倍镜下找到叶片细胞，即可换上高倍物镜C.换上高倍物镜后，必须先用粗准焦螺旋调焦，再用细准焦螺旋调至物像最清晰D.为了使高倍镜下的视野亮一些，可使用最大的光圈或凹面反光镜5.用一般光学显微镜观察生物的细胞与组织，下列叙述不正确的是 （ ）A.用10倍物镜观察水绵玻片时，玻片与物镜的距 离为0.5 cm，若改用30倍物镜观察时，则玻片与物镜的距离应调整在1.5 cm左右B.若载玻片上有d字母，则视野下呈现p字母C.观察向日葵叶片的保卫细胞时，若将玻片标本向右方移动，则视野下保卫细胞向左方移动D.视野下观察到眼虫游向右上方，则应将玻片向右上方移动以便追踪6.许多生物学实验都需要制作临时装片，然后使用显微镜进行观察，下列关于临时装片制作的实验步骤，不正确的是 （ ）A.脂肪的鉴定：切取花生子叶薄片染色洗去浮色制片观察B.观察细胞中的叶绿体：取黑藻幼嫩小叶染色制片观察C.观察细胞的有丝分裂：解离洋葱根尖漂洗染色制片观察D.观察植物细胞的质壁分离：制作紫色洋葱鳞片叶外表皮临时装片观察滴入质量浓度为0.3 g/mL的蔗糖溶液观察7.下列哪些实验所用的材料或试剂是正确的（ ）A.观察植物细胞的有丝分裂，可用醋酸洋红液代替龙胆紫溶液进行染色B.在观察线粒体的实验中，先用盐酸处理材料，再用健那绿染液染色C.在观察DNA和RNA在细胞中的分布的实验中，可用猪的成熟红细胞代替人口腔上皮细胞D.在观察细胞的有丝分裂实验中，可用洋葱鳞片叶表皮细胞代替洋葱根尖细胞8.在使用高倍镜观察酵母菌和大肠杆菌时（）A.都可以观察到细胞壁、细胞核B.都可以观察到核糖体C.若发现视野上方较暗下方较亮，应调节反光镜D.在换用高倍镜之后，只能用粗准焦螺旋调焦9.生物学实验中常用普通显微镜，试回答：（1）一个细小物体若被显微镜放大50倍，这里“被放大50倍”是指放大该标本的_。（2）当显微镜的目镜为10、物镜为10时，在视野直径范围内看到一行相连的8个细胞，若目镜不变、物镜换成40时，则在视野中可看到细胞_个。（3）在光线充足的实验室里，用白色洋葱表皮细胞做质壁分离实验。在显微镜视野中能清晰地观察到细胞壁，但看不清楚细胞是否发生质壁分离。为便于判断，此时应改用_，_光圈。（4）某学生在做实验时，先用一块洁净纱布擦拭镜头，再在一干净载玻片中央滴一滴清水，放入一小块生物组织切片，小心展平后，放在显微镜载物台正中央，并用弹簧夹片压住，然后在双眼侧视下，将物镜降至距玻片标本约1 cm2 cm处停止。用左眼朝目镜里观察，同时转动粗准焦螺旋，缓慢上升镜筒。请指出该同学在操作中不正确的地方：_。_。_。10.下图是显微镜的结构示意图，请据图回答： （1）如果8上安置的两个物镜标有40和10，目镜6标有10，那么根据图中物镜的安放状态，所观察到物像的 （填“长度”“面积” 或“体积”）是物体的 倍。（2）某同学依次进行了下列操作：制作装片；用左眼注视目镜视野；转动4调至看到物像；转动5调至物像清晰。你认为该操作程序是否正确？如有不完整请作补充说明。 。（3）该同学观察时,6上标有15字样,9的两个镜头上分别标有40和10字样，他用40观察后转换10，此时视野内的细胞数量比原来多还是少？ 。（4）这时，他发现了一个理想的物像，位于视野右下方。为了便于高倍（40）观察，他应向 移动载玻片，再转换高倍镜。 （5）大部分动植物体是不透明的，不能直接在显微镜下观察，一般要经过特殊处理，如将标本做成很薄的切片。但酵母菌、水绵、洋葱表皮等材料却可以直接做成装片放在显微镜下观察，这主要是因为它们 ( )A.是单个或单层细胞 B.都带有特殊的颜色C.是无色透明的 D.是活的细胞参考答案1. A解析：使用显微镜必须先低倍镜后高倍镜，换高倍镜时，因视野范围要变小，视野变暗，所以要将观察目标移到视野中央，并增加进光量。2. D解析：使用显微镜观察洋葱根尖细胞染色体的基本步骤，正确的操作顺序应是先将洋葱根尖永久装片放在低倍镜下观察，找到分裂中的细胞，再移至视野中央，转换成高倍镜后，再调节细准焦螺旋，就可看到洋葱根尖细胞染色体。3. D解析：B项在低倍镜下找到并移到视野中央，只需转动转换器、换高倍物镜，不需升高镜筒。4. D解析：用显微镜观察材料，必须用低倍镜先找到适合的部位，将其移到视野中央后，再换上高倍物镜，这时只能使用细准焦螺旋调焦。由于换上高倍镜后视野变暗，为得到适宜的亮度，可调节光圈及反光镜。5. A解析：A错误，放大倍数越大，玻片与物镜的距离越小。在显微镜的视野里看到的是倒立的虚像，上下颠倒、左右相反。故B、C、D三选项正确。6.B解析：观察细胞的有丝分裂和脂肪的鉴定需要对材料进行染色，而观察细胞中的叶绿体和观察植物细胞的质壁分离不需要进行染色，直接将材料制成装片即可。7A解析：健那绿是活细胞染色剂，细胞应保持活性，不需用盐酸处理。猪的成熟红细胞没有细胞核，不能作为观察DNA和RNA的材料。洋葱鳞片叶表皮细胞是成熟细胞，不分裂，不能作为观察有丝分裂的材料。龙胆紫溶液和醋酸洋红液都可对染色体进行染色。8.C解析：大肠杆菌是原核生物，无细胞核。核糖体是亚显微结构，在电子显微镜下才能观察到。换用高倍镜后，只能用细准焦螺旋调焦。9.【解析】（1）显微镜的放大倍数是指长度或宽度的放大倍数。（2）细胞在视野中排成一行，换高倍物镜后放大倍数（长度）为原来的4倍，看到的细胞数应为原来的1/4，即2个。（3）物像相对无色透明时，应尽量减少光线的进入，使视野相对暗一些，所以应选用平面反光镜和小光圈。（4）显微镜应用专门的擦镜纸擦拭镜头；放入组织切片后应加盖盖玻片；物镜降至玻片