C-反应蛋白及临床应用1.ppt

c-反应蛋白及临床应用,protein structure crp结构,c反应蛋白的生理和生化,在细胞因子il-6家族诱导下，crp在肝中合 成迅速。 正常合成率为 l10 mgd，急性炎症时每 天合成超过 lg/d。 在急性相反应高峰时肝大量合成蛋白，其中 20是合成crp。 当il-6刺激物缺乏时，在 24 h内合成率降 至正常。 循环中crp半衰期约19h，但一旦它与配体结 合，可快速的被清除。 肝外合成对血清水平影响作用很小。,crp的生物学功能,crp的生物学功能-机理,结合坏死的内源性物质 在钙离子存在的情况下，crp能结合坏死的内源性物质和效应细胞, 当正常的脂质双层结构被破坏致使内部磷脂暴露时，crp可发生与宿主细胞的结合。 在系统性红斑狼疮的鼠模型中，注射crp可改善sle的状况。 人crp基因的多态性导致的低基础水平表达增加了发生系统性狼疮的风险。 crp量的减少可能与sle发病机理有关。 crp量的减少使结合的细胞碎片减少。,crp的生物学功能-机理,结合外源性物质 细菌、真菌、寄生虫中的细胞壁磷酸胆碱。 crp具有保护机体抗细菌感染的能力。 crp 保护机体抵抗致命性的细菌脂多糖和各种炎症介子的能力。,crp的生物学功能-机理,结合配体的crp激活下列生物系统，导致配体的消除： crp对补体系统的激活. crp结合iggfcr，增强自然杀伤细胞的活性。 crp的调理性质，调理即刺激细胞吞噬作用。 crp和血小板激活因子(paf)结合 抑制paf刺激的血小板聚集。,crp的生物学功能-机理,crp具有多效性的作用。 当抑制干扰素的合成时 ，crp可诱导il-1受体拮抗剂而增加抗炎细胞因子il-10的释放 . crp也可诱导炎症反应。 crp向上-调节内皮细胞粘附分子的表达，刺激许多细胞释放il-8， 增加血浆纤维蛋白酶原催化剂抑制剂-1的表达和活性、增加il-1, il-6, il-18, 和肿瘤坏死因子的释放. crp诱导或抑制炎症反应依赖于环境。,crp功能,识别和启动靶效应细胞及其产物并将其从组织中清除。 吞噬溶解入侵微生物。,急性相蛋白crp合成的生物调控,crp基因位于1号染色体短臂，只有一个内含子，其分离编码信号肽的区域。 肝脏crp合成的调节主要发生在转录阶段。由il-6诱导，il-1可增加此作用。 crp启动子最近区为stat3 和 rel 蛋白的结合部位。 这些因子的相互作用增加dna 结合c/ebp家属成员的稳定性，从而有效地诱导了crp基因的表达。 神经元细胞、动脉硬化斑块、单核细胞和淋巴细胞也可以合成crp。在这些部位的调节机制还不清楚。,修饰的crp(m-crp) -“modified“ crp,目前认为m-crp是原crp的单体。 与天然crp不同,表现在分子大小,溶解度,抗原性,带电荷数等方面的差别. m-crp具抗菌作用。 m-crp具有强大地诱发炎症的作用。,方 法 灵敏度 参考献 试管内沉淀试验 - jexpmed1930;52561 毛细管内沉淀试验 1020mg/l amjmed1950;8445 改良平板双扩散法 1020mg/l intarchallergy1962 改良琼脂柱扩散法 3.0mg/l procsocexpbiol1955 改良单扩散法 1.0mg/l actapatholmicrobiolscand 琼脂糖凝胶电泳法 1.0mg/l clinchimacta1969 放射电免疫扩散法 10g/l jclinlabinvest1973 补体结合试验 0.6mg/l procsocexpbiol1954 胶乳凝集试验 1.0mg/l nature(london)1961 高敏乳胶增强浊度 0.35mg/ml dade germany2000 荧光抗体法 nature(london)1961 放射免疫测定法 3g/l jlabclinmed1976,检测方法,crp检测方法 - 免疫沉淀试验,检测crp原始方法. 将兔抗crp血清吸入毛细管内。 把它浸入被测血浆或血清内,因毛细管虹吸作用被吸入,与抗crp血清形成接触界面。 这种方法较粗糙,取得结果时间较长,也不太正确可靠.,crp检测方法 - 免疫浊度法,可溶性crp-ag与可溶性抗crp-ab反应,形成可见的网络状沉淀性ic复合物点. ic复合物对光具有散射作用,使溶液具有肉眼尚不可见的浊度。 在被测样品中加抗血清后一定时间,测定反应系统散射光强度或浊度变化,可对被检物及其浊度加以检测。 根据仪器的光学系统,浊度法分为散射浊度法和透射浊度法两类。 许多自动化生化分析仪和自动化免疫测定仪都可crp测定项目。,crp检测方法 - 胶乳凝集试验(lat),将强化的兔抗crp抗体固定于胶乳微粒上。 加入被测样品后与crp在3分钟内形成肉眼可见的凝集物。 胶乳强化浊度法的灵敏度优于传统浊度法,试剂稳定性佳。,检测方法 - 标记免疫测定,elisa和免疫发光法和化学发光法等都可用于crp的测定。 化学发光法的灵敏度和定量精确度可与ria媲美,而无同位素污染,试剂稳定,分析速度快。 crp-poct(床边试验)法 elisa干片法。 把磷脂酰胆碱(pc)化学交联固定于载体。 被测crp与载体的pc结合。 被酶标记的抗crp单抗结合。 可灵敏、特异性检测crp,约5分钟可得结果.。,检测方法 - 胶乳增强试验（shcrp）：,常规crp检验方法可在感染或组织损伤时检测出crp10mg/l。 该检测方法具有较高的灵敏度。 这个水平（0.110mg/l）的c反应蛋白又被称为超敏c反应蛋白（hscrp）。,crp检测的评估,1、半定量：胶乳凝集试验等已弃用。 2、定量： 散射免疫比浊法、透射免疫比浊法：是目前常用方法。检测限度为5150 mgl ，cv5% 。 胶乳增强试验-shcrp检测：很大程度提高了敏感度。酶免疫分析和荧光免疫分析：有潜在的灵敏度优势。 胶乳增强试验-shcrp检测方法很大程度提高了敏感度。 crp检测对标本的采集也无特殊要求。 高浓度的类风湿因子可产生crp假性升高。 crp筛查的费用远小于其他心血管检查的费用。,临床应用_参考范围,临床意义,器质性疾病的筛选 急性或慢性炎症如伴有细菌感染。 自身免疫或免疫复合物病。 组织坏死和恶性肿瘤。,临床意义感染的诊断与鉴别,crp在细菌感染发生后68h即开始升高，2448h达到高峰，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常。 crp在病毒感染时无显著升高。 革兰阴性感染：可发生最高水平的crp，有时高达 500 mgl。 革兰阳性菌感染和寄生虫感染：通常引起中等程度的反应，典型的是在100 mgl 左右。 病毒感染：引起的反应最轻，通常不超过50 mgl，极少超过 100 mgl。 在细菌感染的急性期，crp显著升高，寡聚腺苷合成酶正常； 在病毒感染时crp水平正常或轻微升高，寡聚腺苷合酶水平升高。,临床意义,c反应蛋白是心血管疾病最强的危险指标，c反应蛋白水平可预测将来心肌梗塞及中风的危险性。 c反应蛋白含量2.1mg/l的人与1mg/l者比较: 将来发生心肌梗塞的危险性为后者的2.9倍； 发生缺血性中风的危险性为后者的1.9倍； 发生外周动脉血管性疾病的危险性为后者的4.1倍。 在痛疼开始后数小时内，crp升高，34d达高峰，在ck-mb回到正常后7-10d也降至正常。,临床意义自身免疫或免疫复合物病。,系统性红斑狼疮、多肌炎、系统性硬化症crp无明显改变，所以可用于与风湿性疾病鉴别。 若存在发热为并发感染而非疾病的恶化。,临床意义-癌症,已升高或正在升高的crp预示着不良的预后及常提示转移。 结肠癌是导致死亡人数第二多的癌症。 研究显示，血液c-反应蛋白含量最高的那些人患结直肠癌的危险，是c-反应蛋白含量最低者的两倍.,临床意义,评估疾病活动性和疗效监控 crp为 1050 mgl表示轻度炎症。 crp升至 100mgl表示较严重的疾病，它的严重程度在必要时需静脉注射。 crp 100 mgl表示严重的疾病过程并常表示细菌感染的存在。,临床意义-抗生素的治疗监测,系列血浆crp的测定，可用来作为下列情况的治疗监测： 在许多感染时最有效使用抗生素治疗。 根据crp水平的变化来决定抗炎药物的剂量。 在crp下降至正常时，中 断抗菌素治疗。 在高危人群缺少微生物学诊断时，为抗生素治疗的指引。,临床意义-抗生素的治疗监测,临床意义-外科,患者施行手术后2472h,血中crp水平明显升 高,约在第57天恢复正常。 凡骤升后持续高水平多预示合并感染。 对中、大手术患者,在术前和术后37天各作 常规检测一次。 凡术后57天crp仍持续高水平者,理应怀疑 合并感染,并配合治疗作随访监测。,临床意义-内科,肺炎: crp100mg/l，强烈提示细菌感染，如化脓性支气管炎或肺炎;典型的病毒性肺炎不会超过50mg/l。 心血管病，在痛疼开始后数小时内，crp升高， 3-4d达高峰，在ck-mb回到正常后7-10d也降至正常。 代谢综合征 代谢综合征分组，根据crp水平可将为 低危险组，3 mg/,临床意义-妇产科,盆腔炎和子宫附件炎. crp值升高 盆腔肿块和子宫肌瘤通常多为阴性。 诊断胎膜早破宫内感染. 胎膜早破时，如母亲crp在产前6-19h超过50mg/l可作为出现ais的标准； 产后第一天出现的ais的crp将比正常分娩时高出2-3倍。 无并发症的ct和ng感染不会引起crp升高。 但扩散到盆腔可引起急时相反应。,临床意义-儿科,新生儿浓毒血症: 出生3天前crp10mg/l表示感染. 如果crp在24h内没有超过10mg/l，多无新生儿感染. 小儿发热 : 患病超过12h，crp显著40mg/l，esr显著30mm/h应关注为细菌性感染。 脑膜炎 : crp20mg/l提示为细菌感染的可能； 100mg/l时具有细菌感染诊断价值。 结脑crp在20-60 mg/l。 成功的治疗可使crp在一周内降至正常。,小 结,crp是一五球体结构的高度保守的急时相蛋白。 crp为一模式识别分子，与特殊的分子结构结合而发挥作用。 为宿主先天性免