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文档简介

1.电镜与光镜的主要区别?什么叫显微镜分辨率?光学显微镜是以可见光为照明源,将微小的物体形成放大影像的光学仪器;而电子显微镜则是以电子束为照明源,通过电子流对样品的透射或反射及电磁透镜的多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器。显微镜分辨率:分辨率或称分辨力是指在人眼明视距离处,能够清楚地分辨被检物体细微结构最小间隔的能力。2.电镜主要分哪二类?透视和扫描3.流式细胞术在科学研究中的应用?目前该技术广泛应用于生物大分子物质的定量,细胞周期分析,细胞表面抗原表达,细胞因子的检测,活细胞分类纯化等领域。4.配制培养基时调节pH值的目的是什么?因为有的培养物对生长环境PH值要求高,有的则要求低,不同培养物的最适生长pH不同5.细胞传代培养的目的是什么?传代培养是组织培养常规保种方法之一。也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。6.蛋白质电泳的种类及特点?蛋白质电泳(一般指SDS-PAGE)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的SDS上所携带的负电荷。特点:分辨力高和固相免疫测定特异性高,敏感等7.核酸杂交技术的分类?根据杂交对象的不同可分为:DNA与DNA;RNA与DNA另外:Western blot,根据杂交对象位置的不同可分为:固相杂交,液相杂交,原位杂交。8.聚合酶链式反应PCR的实施步骤是什么?1.DNA变性(90-96):双链DNA模板在热作用下, 氢键断裂,形成单链DNA2.退火(25-65):系统温度降低,引物与DNA模板结合,形成局部双链。3.延伸(70-75):在Taq酶(在72左右,活性最佳)的作用下,以dNTP为原料,从引物的5端3端延伸,合成与模板互补的DNA链。4.还有就是体外快速DNA复制9.细胞膜的基本特征是什么?细胞膜把细胞包裹起来,使细胞能够保持相对的稳定性,维持正常的生命活动。此外,细胞所必需的养分的吸收和代谢产物的排出都要通过细胞膜。所以,细胞膜的这种选择性的让某些分子进入或排出细胞的特性,叫做选择渗透性。这是细胞膜最基本的一种功能。如果细胞丧失了这种功能,细胞就会死亡.。细胞膜除了通过选择性渗透来调节和控制细胞内,外的物质交换外,还能以胞吞和胞吐的方式,帮助细胞从外界环境中摄取液体小滴和捕获食物颗粒,供应细胞在生命活动中对营养物质的需求。细胞膜也能接收外界信号的刺激使细胞做出反应,从而调节细胞的生命活动。细胞膜不单是细胞的物理屏障,也是在细胞生命活动中有复杂功能的重要结构。10.细胞膜上膜脂和膜蛋白的种类?膜脂有磷脂,糖脂,胆固醇,膜蛋白有膜内在蛋白(整合膜蛋白)(2)膜外在蛋白(周边膜蛋白)(3)脂锚定蛋白(连接蛋白)11.简述真核细胞中小分子和大分子的跨膜运输途径和主要特点?(1)小分子和离子(需载体蛋白,通道蛋白) 被动运输(简单扩散和易化扩散)顺浓度梯度 主动运输(消耗能量),(2)大分子物质 胞吞胞吐(消耗能量)12.载体蛋白和通道蛋白在物质跨膜运输中的作用?通道蛋白 只参与被动运输,载体蛋白 既参与主动运输又参与被动运输,(1)通道蛋白: 在蛋白质中心形成一个亲水性的通道,使特定溶质穿越。被动运输 载体蛋白: 通过蛋白质发生可逆的构象变化进行物质运输。主动或被动;13.胞饮作用和吞噬作用的区别?一、吞噬作用,细胞内吞较大的固体颗粒物质,如细菌、细胞碎片等,称为吞噬作用。吞噬现象是原生动物获取营养物质的主要方式,在后生动物中亦存在吞噬现象。如:在哺乳动物中,中性颗粒白细胞和巨噬细胞具有极强的吞噬能力,以保护机体免受异物侵害二、胞饮作用,细胞吞入的物质为液体或极小的颗粒物质,这种内吞作用称为胞饮作用。胞饮作用存在于白细胞、肾细胞、小肠上皮细胞、肝巨噬细胞和植物细胞。14.什么叫细胞连接?细胞连接有哪几种类型?其功能分别是什么?细胞连接是细胞与细胞间或细胞与细胞外基质间的联结结构。类型:封闭连接,锚定连接,和通讯连接。封闭连接功能:1.封闭作用 2.隔离和支持的作用,锚定连接功能:形成能够抵抗机械张力的牢固粘合。通讯连接功能:细胞间电信号和化学信号的通讯联系,完成群体细胞间的合作和协调。15.试述细胞粘附分子作用机制及分类?间隙中的粘合分子为E-钙粘素。在质膜的内侧有几种附着蛋白与钙粘素结合在一起,这些附着蛋白包括:-,-,-连锁蛋白、粘着斑蛋白、-辅肌动蛋白和片珠蛋白。16.介导细胞粘附的是哪四大类粘附分子家族?粘合带位于紧密连接下方 间隙中的粘合分子为E-钙粘素(图11-6)。在质膜含1亚单位的整合素主要介导细胞与细胞外基质成分之间的粘附。含2亚单位17.什么叫内膜系统,它包括哪些结构?内膜系统:指位于细胞质内,在结构、功能乃至发生上相互密切关联的膜性结构的细胞器总称。结构:细胞核(核孔,核仁,核膜),高尔基体,复合体,中性粒,溶酶体,细胞质,细胞膜,线粒体,核糖体,光面内质网,粗面内质网,18.蛋白质糖基化的基本类型、特征及生物学意义是什么?蛋白质的糖基化:是指单糖或寡糖与蛋白质共价结合形成糖蛋白的过程。主要是寡糖与蛋白质天冬酰胺残基侧链上氨基基团的结合,也NN-连接糖基化。N-连接的寡糖蛋白: 从内质网开始,在高尔基体中完成 O-连接的寡糖蛋白: 发生在高尔基复合体内 ,过程不清楚。2、糖基化的作用:使蛋白质能够抵抗水解消化酶的降解,保护作用;运输信号的作用,可引导蛋白质包装形成运输小泡,使蛋白质靶向运输;糖基化形成细胞膜包被,在细胞膜的保护、识别及通讯联络等生命活动中发挥重要作用。19.内质网的基本类型及功能?粗面内质网和滑面内质网粗面内质网:核糖体附着的支架、蛋白质的合成与加工修饰的场所。滑面内质网:脂类合成的场所、糖原代谢以及细胞的解毒作用。20.高尔基体的结构特征及其功能是什么?高尔基复合体是由数个扁平囊泡,小囊泡(运输小泡)和大囊泡(分泌泡)三个基本成分组成的高度有极性的细胞器。高尔基复合体是构成质膜和内质网之间相互联系的一种过渡性细胞器功能:高尔基复合体在细胞分泌活动中起着重要的运输作用;蛋白质和细胞外基质都是经由高尔基复合体进行定向转送和运输。21.被称为细胞内消化器官的细胞器是什么?它的标志酶是什么?它有哪些基本功能?溶酶体,水解酶。溶酶体可谓是 细胞内的消化器官 ,能把摄入到细胞内的各种大分子物质借助于水解酶的作用分解为简单物质 。简单分子可透过次级溶酶体的膜,在细胞质内继续代谢而被利用,以 补充细胞内所需营养 ,故溶酶体对细胞有消化营养作用。自体吞噬:清除无用的生物大分子,衰老细胞、细胞器、个体发育中多余的细胞。防御作用:如巨噬细胞吞噬细菌或病毒颗粒,在溶酶体中被分解消化。溶酶体在某些情况下可通过胞吐方式释放到细胞外,消化分解细胞外物质,这种现象体现在受精过程和骨质更新方面。22.过氧化物酶体与溶酶体有哪些区别?23.囊泡有哪几种类型?囊泡转运的特征是什么?网格蛋白包被囊泡,COPII被膜小泡,COPI被膜小泡。囊泡转运不仅仅只是物质的简单运输,而且还是一个严格的质量检测,修饰加工过程。24.试述细胞内膜系统的各种细胞器在结构与功能上的联系。粗面内质网:合成蛋白质滑面内质网:合成脂类和类固醇激素高尔基体:蛋白质和脂类的加工修饰溶酶体:消化降解作用过氧化物酶体:分解过氧化氢线粒体结构特点和分布,线粒体功能,线粒体是真核细胞进行氧化和能量转换的主要场所,被喻为细胞的“动力工厂”或“换能中心”。通常分布于细胞生理功能旺盛的区域和需要能量较多的部位。功能:三羧酸循环(和氧化磷酸化是细胞有氧呼吸的基地和供能的场所,供应细胞生命活动95%的能量,“细胞的动力工厂”线粒体的主要功能是把氧化各种底物产生的自由能转化为可被细胞直接利用的形式ATP。细胞氧化(细胞呼吸)无氧酵解:11分子葡萄糖2ATP 线粒体有氧呼吸:11分子葡萄糖3032ATP线粒体为半自主性细胞器。25.解释细胞氧化、氧化磷酸化、基粒等的概念?氧化磷酸化:高能电子在线粒体内膜呼吸链的电子传递过程中释放出的能量被线粒体内膜和嵴上的基粒用来催化ADP磷酸化,而合成ATP。是主要形式,占80%。基粒(ATPATP酶复合体)26.细胞骨架的成分、结构特点?细胞骨架(cytoskeleton):真核细胞中蛋白质纤维交织而成的立体网架结构,是细胞的重要组成部分。包括微管,微丝和中间丝。微管是由13条原纤维构成的中空管状结构,直径2225nm。微丝是由肌动蛋白(actin)组成的直径约7nm、长短不一的实心细丝。微丝的功能:1.支架功能2.细胞运动3.细胞分裂4.肌肉收缩5.物质运输6.信息传递中间纤维的成分比微丝和微管复杂,中间纤维的分布具有严格的组织特异性。按其组织来源及免疫原性可分为5大类:(1)角质蛋白只在上皮细胞或外胚层起源的细胞中表达;(2)波形蛋白在间质细胞和中胚层起源的细胞中表达,分布较为广泛;(3)结蛋白在成熟的肌肉细胞中表达,也在少数其他细胞中发现,含有结蛋白;(4)胶质蛋白只在中枢系统的胶质细胞中表达;(5)神经丝蛋白在中枢外周神经系统细胞中表达,包括分子量大小不同的蛋白质;(6)巢蛋白,分布在中央神经系统的干细胞。27.细胞骨架的功能?功能:维持细胞形态,参与细胞运动、物质运输、能量转换、信息传递、细胞分裂和分化等。28细胞核的功能?遗传信息的储存,DNA、蛋白质、少量RNA;遗传物质的复制、修复与重组。遗传信息的表达,或基因表达,即DNA转录为RNA,进而翻译为蛋白质,由核苷酸序列转化为氨基酸序列;29.简述细胞核被膜的结构及主要功能?核膜是将细胞核内物质包围起来的双层膜结构,组成:外核膜、内核膜、核间隙、核孔、核纤层。30.核被膜的主要功能:1. 保护性屏障2.基因表达的时空隔离3.染色质体定位和酶分子支架31.染色质的化学组成是什么?染色质是细胞核内能被碱性染料着色的物质。32.简述染色体的组装层次?一级结构:核小体 二级结构:螺线管 三级结构:超螺线管 四级结构:染色单体33.染色质如何分类?常染色质和异染色质34.简述核仁的化学组成及主要功能;蛋白质 :80%R N A : 11%D N A : 8%功能:核糖体 rRNA 基因转录和加工的场所装配核糖体的大小亚基的场所。35.真核基因的结构特点1)单顺反子真核基因的转录产物为单顺反子,即一个结构基因经转录生成一个mRNA分子,经过翻译过程合成一条多肽链。(2)重复序列所谓重复序列就是在整个DNA分子中有多个重复出现的核背酸序列。这种现象在原核也有存在,但在高等真核基因中表现更多、更普遍。某些重复序列发生在调控区,可能对DNA复制、转录调控具有重要意义。(3)基因不连续性,真核结构基因两侧存在不被转录的非编码序列,往往是基因表达的调控区。在可转录的基因序列内部也有一些不为蛋白质编码的间隔序列,称内含子,编码序列称为外显子。因此真核基因是不连续的。内含子与外显子相间排列,共同被转录。初级转录本的内含子对应序列在转录后经一定规律的剪切后被去除,使外显子转录本连接在一起,形成成熟的mRNA,这个过程称为剪接。不同的剪接方式形成不同的mRNA,翻译出不同的多肽链,因此转录后产物的剪接过程也是真核基因表达调节的重要环节36.核糖体的结构特征?在电镜下,核糖体由大、小两个亚单位构成。大亚单位略呈半圆形,直径23nm,在一侧伸出三个突起,中央为一凹陷;小亚单位呈长条形,在约13长度处有一细的缢痕,将小亚单位分为大小两个区域。当大小亚单位结合在一起成核糖体时,其凹陷部位彼此对应,从而形成一个隧道,为蛋白质翻译时mRNA的穿行通路。两亚单位常常游离于细胞质溶质中,当小亚单位与mRNA结合后,大亚单位才与小亚单位结合成完整的核糖体。肽链翻译结束后,大小亚单位解离,重新游离于细胞质溶质中。两亚单位的结合与分离受Mg2+的影响。37.蛋白质的合成与加工?蛋白质的合成过程比较复杂,整个过程涉及三种RNA (mRNA、tRNA、rRNA)、几种核苷酸(ATP、GTP)及一系列酶和蛋白辅助因子。原核细胞的蛋白质合成过程比较清楚。由核糖体、mRNA和tRNA三者密切配合共同完成,其生物合成可分为五个阶段:氨基酸活化、多肽链合成的起始、延伸、肽链的终止和释放、蛋白质合成后的加工修饰等。38.DNA复制、RNA转录和蛋白翻译的基本过程?DNA双链的分离(解链酶)引物合成(引物酶)逐个加上核苷酸(碱基配对原则)单链DNA结合蛋白(避免重新形成双链)DNA半不连续复制(DNA连接酶)复制叉(眼睛形复制眼)复制终点.转录的本质:以DNA双螺旋链中反义链为模板,以四种核苷酸三磷酸ATP、GTP、CTP、UTP为原料,在RNA聚合酶作用下,遵循碱基互补配对原则合成RNA的过程。在真核细胞中,转录生成的RNA是初级转录产物,必须经过不同方式的加工和修饰才具有生物活性。蛋白质的合成过程比较复杂,整个过程涉及三种RNA (mRNA、tRNA、rRNA)、几种核苷酸(ATP、GTP)及一系列酶和蛋白辅助因子。原核细胞的蛋白质合成过程比较清楚。由核糖体、mRNA和tRNA三者密切配合共同完成,其生物合成可分为五个阶段:氨基酸活化、多肽链合成的起始、延伸、肽链的终止和释 放、蛋白质合成后的加工修饰等39.细胞分裂的种类?无丝分裂 有丝分裂 减速分裂40.细胞周期的基本概念以及各期的特点是什么?细胞周期,又称细胞生命周期或细胞增殖周期,是指细胞从上一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂开始所经历的过程。41.信号分子中第一信使、第二信使?第一信使:凡由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息物质。第二信使:在细胞内传递细胞调控信号的化学物质称为细胞内信息物质,也称第二信使。42. 细胞分化的基本概念?由一个受精卵细胞经过增殖和分裂,产生在形态结构和生理功能上保持稳定的细胞类群的过程。43.什么叫去分化和转分化;1去分化:在一定条件下,高度分化的细胞又重新回到未分化状态,这种现象叫做去分化去分化是一种通过自噬、胞质脱落、陈旧分泌物和残体外排等作用清除衰老的细胞器和胞质成分以及细胞有害物质的过程。去分化后的细胞往往可以恢复活力,从而进行新的分裂增殖以修复受损组织。2.转分化:在一定的条件下哺乳动物的细胞可以转化成另一种分化细胞。细胞分化的稳定性普遍存在,但分化的可逆性(转分化或去分化)是有条件的44. 细胞分化的特点是什么?稳定性(不可逆性):在正常生理条件下,已经分化了的细胞将一直保持分化后的状态直到死亡,一般不可逆转到未分化状态或者成为其他类型的分化细胞;已分化的终末细胞在形态结构和功能上将保持稳定,构成个体生命活动的基础。2. 方向性:在高等生物中,细胞总是由一个受精卵开始朝着特定的方向分化,而且这种分化状态能够遗传给子代细胞。45.组织再生的本质及再生方式?再生本质:成体动物为修复缺失组织器官的发育再活化,是多潜能未分化细胞的再发育。再生方式:微变态再生:通过去分化形成细胞团,然后重新分化。如两栖类动物肢体再生变形再生:组织中多潜能未分化细胞的再分化和部分细胞的转分化,如水螅的再生;补偿性再生:细胞分裂,产生与自己相似的细胞,保持它们的分化功能,如肝脏.46.生物大分子的改变?1、DNA:复制与转录受到抑制,端粒DNA丢失,线粒体DNA特异性缺失,DNA氧化、断裂、缺失和交联,甲基化程度降低2RNA: mRNA tRNA含量降低3. 蛋白质:含量下降、合成速率降低发生糖基化、氨甲酰化、脱氨基等修饰反应,导致稳定性、抗原性、可降解性下降自由基使蛋白质肽键断裂,交联而变性4、酶分子: 活性中心被氧化;金属离子丢失导致酶分子二级结构、溶解度和等电点发生改变,最终使酶失活5、脂类: 不饱和脂肪酸被氧化,引起膜脂之间或与脂蛋白之间交联,膜

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