消毒与灭菌注意事项.doc

消毒与灭菌常用方法（一）干热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。干烤箱为常用的干热灭菌器，其杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性完成的。【构造】干烤箱是中间夹着石棉的双层金属制成的方形或长方形箱，箱底装有热源，箱内有数层金属架，并附有温度计和自动温度调节器等装置。把待灭菌的物件均匀地放入恒温干燥箱，加热至160170维持2小时即可达灭菌目的。【使用方法及注意事项】1.将包扎好的待灭物品（培养皿、吸管器等）放于箱内，注意不要摆得太挤，以免妨碍气流流通。 2.关门，插上电源插头（常为220伏），拨动开关，旋动恒温调节器，至红灯亮。 3.待温度上升160170时，借恒温调节器的自动控制，保持此温度2小时。 4.灭菌后停止加热，待温度下降至40以下方可开门取物，在这之前切勿自行打开箱门，否则其内物品(如玻璃器皿等)会因温度骤然下降而爆裂。【应用】干热灭菌主要用于要求干燥的、耐高温的物品灭菌，如玻璃器材、瓷器、凡士林、液体石蜡、药粉等的灭菌。一般不耐高温的、含有水份的物质，不能用这种方法灭菌。（二）湿热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。湿热灭菌所需温度较低，时间较短(表3-2)。特别是高压蒸气灭菌，因增加压力而提高温度，灭菌效果最佳。其主要优点是：温度较高，灭菌所需时间较短；蒸气穿透力强；蒸气冷凝时释放汽化热，能迅速提高物品的温度；物品不过分潮湿。表3-2 热力消毒灭菌法比较方法 温度() 时间(min) 灭菌器 适用物品焚烧 500 瞬时 废弃物品、动物尸体灭菌干烤 160170 120 干热灭菌器（干烤箱） 玻璃器材、瓷器等灭菌巴氏消毒法 61.162.871.7 3015-30s 牛奶、酒类等消毒煮沸消毒法 100 5 食具、刀剪、注射器等消毒流通蒸气消毒法 100 1530 Arnold流通蒸气灭菌器 食具等消毒间歇灭菌法 100 30 流通蒸气灭菌器(重复3次) 不耐高温的含糖、牛奶等培养基高压蒸气灭菌法 121 1530 高压蒸气灭菌器 耐高温、高压及不怕潮湿的物品高压蒸气灭菌器是目前应用最广泛、灭菌效果最好的灭菌器具，其种类有手提式、直立式、横卧式等。它们的构造及灭菌原理基本相同。高压蒸气灭菌方法的原理是水在大气中100左右沸腾，水蒸气压力增加，沸腾时温度将随之增加，因此，在密闭的高压蒸气灭菌器内，当压力表指示蒸气压力增加到15磅(1.05kg/cm)时，温度则相当于121.3，在这种温度下20min即可完全杀死细菌的繁殖体及芽胞。【构造】高压蒸汽灭菌器有各种形式及规格。下面以常用的高压蒸汽灭菌锅为例进行介绍。高压蒸汽灭菌锅是一个密闭的耐高温和耐高压的双层金属圆筒，两层之间盛水。外锅：供装水产生蒸汽之用。坚厚，其上方或前方有金属厚盖，盖有螺栓，借以紧闭盖门，使蒸汽不能外溢。加热后，灭菌器内蒸汽压力升高，温度也随之升高，压力越大，温度越高。外锅壁上还装有排气阀、温度计、压力表及安全阀。排气阀用于排出空气；压力表：以表示锅内压力及温度（公制压力单位为公斤/cm2、英制压力单位磅/英寸2、温度单位）；安全阀又称保险阀，利用可调弹簧控制活塞，超过定额压力即自行放汽减压，以保证在灭菌工作中的安全。内锅：为放置灭菌物的空间。【使用方法及注意事项】1.使用前的准备：灭菌器内清洗干净，检查进气阀及排气阀是否灵活有效，并加入适量水。 2.装放灭菌物：将待灭菌的物品放入灭菌器内，注意不要放得太挤，以免影响蒸汽的流通和灭菌效果。然后加盖旋紧螺旋，密封。 3.预热及排气：加热升温使水沸腾，并由小至大打开排气管（排气阀），排除冷空气，继续加热升温，再关闭排气管（阀）。4.升压保温：让温度随蒸汽压力增高而上升待压力逐渐上升，待蒸汽压力升至所需压力(一般为103.43kPa，温度则相当于121.3)时，控制热源，维持所需时间，持续1520min即可达到灭菌目的。5.降压开盖取物：保压到规定时间之后，就停止加热，缓缓排气，待其压力下降至零时，方可开盖取物。6.注意事项此法灭菌是否彻底的一个关键是压力上升之前，必须先把蒸汽锅内的冷空气完全驱尽，否则，即使压力表已指到103.43kPa，而锅内温度则只有100，这样芽孢则不能被杀死，造成灭菌不彻底，所以必须进行排气。 降压一般通过自行冷却。如果时间来不及，可以稍开排气阀降压，但排气阀不能开得太大，排气不能过急，否则灭菌器内骤然降压，灭菌物内的液体会突然沸腾，将棉塞冲湿，甚至外流。另外，降压时压力表上读数虽已降至“0”时，灭菌物内温度有时还会在100以上，如果开锅太快还有沸腾的可能，所以最好在降压后再稍停一会，灭菌物温度下降后再出锅较妥当。灭菌物灭菌后仍处于高温时，容器内呈真空状，降温过程中外部空气要重新进入容器。一般叫“回气”，降温过快，回气就急，如棉塞不严密，空气