茶叶中活性物质的应用.doc

茶叶中的活性物质的应用皮肤是人体最大的器官，也是最容易见到的器官。从它的表观不仅可以看出人体是否受到外部伤害，并且还可以大体判断一个人的健康状况。根据Epstein最近的总结，保持健康的代谢，特别是保持对胰岛素敏感的血糖水平和摄入的氨基酸，对保持皮肤的年轻外观至关重要。同时，远离氧化所造成的伤害和炎症等也很重要。最近，一份由Lesley E Rhodes等发表的研究报告指出，口服绿茶中的复合物-儿茶素对人体的健康有着很大的好处。作者发现绿茶中的儿茶酚可以被人体吸收，并可以帮助皮肤抵御紫外照射诱发的皮肤炎症，这种皮肤炎症的产生与诱导物-类二十烷酸12-羟基二十碳四烯酸有关，这种诱导物能够促进皮肤炎症。儿茶酚的这种作用能保护皮肤免受阳光灼伤和长期紫外线照射介导的损伤。因此，茶叶可能有助于从内而外的保持皮肤的健康。Koganov等人于2012年发表在个人护理杂志上的一篇文章描述了Recentia CS这种从茶叶中提取的活性物质的主要作用，据称它具有潜在的皮肤护理功能。这篇文章中提到了对茶叶中活性物质的进一步研究开发，包括把他做成一些功能性的饮料，由于这些饮料配方中含有抗氧化性的物质，因而这些饮料具有潜在的，使人变得由内而外美丽的能力。另外，这篇文章中还包含基于抗氧化成分的饮料评价体系，并与传统的绿茶，红茶以及商业茶（保健茶）的评价体系做了比较。茶叶功能性饮料使人呈现出一种“内在美”（健康的美丽）应用泽塔分数技术来提纯茶叶中可以应用于功能性饮料和局部化妆品的物质（现在称为功能性物质），以及Recentia CS植物血清分数（现在称为局部皮肤护理物质）。 个人护理物质与添加到功能性饮料中的物质他们之间的不同之处在于生产规范中允许实用的防腐剂不同。功能性饮料与传统的红茶绿茶成分的比较功能性饮料物质与传统的红茶，绿茶中的物质都由同一品种茶树上获得的茶叶提取而得，这株茶树是在位于美国南加州中心的基洼岛上的查尔斯顿茶叶庄园，于2012年6月采摘。从同一品种的茶树上采摘茶叶对于正确的比较功能性饮料与传统的红茶绿茶等饮料的不同是有重要意义的，因为Karori等的文章称，茶树的品种会对茶叶提取物的差异有着较大的影响；因此，用同一品种的茶树上采摘的茶叶可以消除因品种不同而带来的差异。 功能性饮料成分的制备根据美国KOGANOV第7473435-8043635页和8313220页的描述进行。 红茶的传统制备的方法：将去离子水加热至99,取装在铁盒子里的红茶2.0g，放在一个烧杯中，当水的温度达到99之后，将热水倒入放有茶叶的烧杯中，盖上盖子并放在电磁搅拌器上搅拌4min，4min后将制备好的红茶从电磁搅拌器上拿下来，过滤并冷却至室温。 绿茶的传统制备方法：将去离子水加热至85，称取2.0g铁盒子包装的绿茶，放到一个烧杯中，当水的温度达到85之后，将热水倒入放有茶叶的烧杯中，盖上盖子并放在磁力搅拌器上2min，2min后将制备好的绿茶从电磁搅拌器上取下，过滤并冷却至室温。分析评估 来自茶叶的功能性饮料成分与传统的绿茶和红茶制备液成分的理化参数对比见表1参数Purecentia 茶叶传统红茶传统绿茶干物质（%）6.400.200.12折光率（nD）1.343991.333111.33303密度（g/ml）1.02640.99770.9974渗透度（mOsm/kg）5691310分析评估所用到的所有样品都是新鲜的，没有经过储藏保存。 运用液相色谱与蒸发光散射检测器（LC-ELSD）对功能性饮料和传统方法制备的绿茶和红茶的成分进行分析，ELSD检测的绝对信号强度与保留时间见图1，其相对信号强度与保留时间见图2。图1：ELSD绝对信号强度与保留时间图2：ELSD相对信号强度与保留时间 图1中峰的高度的不同显示文章中提到的各个组分的浓度不同。在图2中，相同的数据按比例缩小至0-1之间，各自保留时间和信号强度分别显示峰的位置和比例的大小。 此外还我们还运用液相-二极管阵列检测器（LC-DAD）进行了检测各自的三维色谱图像见图3-图5。图3：Purecentia Camellia sinensis 的LC-DAD三维色谱图图4：传统方法制备的红茶的LC-DAD三维色谱图图5：传统法法制备的绿茶的LC-DAD三维色谱图 从这些特征性的，由指纹识别方法得到的数据我们不难看出，功能性饮料与传统方法制备的红茶和绿茶在质量方面的明显差异。功能性饮料含有较高的固形物，某些特定的峰具有更好的表现度，更多的组分。功能性饮料中的有效成分的浓度要比传统方法制备的绿茶和浓茶高得多，具有更多的组分，而人们对它的研究也还在继续。通过液相色谱-质谱分析（LC-MS）L-茶氨酸的浓度 L-茶氨酸是一种非必需的氨基酸，到目前为止只在茶树的叶子中发现，口服L-茶氨酸对健康有很多好处。在一些公司的皮肤护理化妆品中也开始添加L-茶氨酸。比如说，有些晚霜中添加了L-茶氨酸以为皮肤增加水分和营养。三个样品中的L-茶氨酸含量见表2。Purecentia传统的红茶传统的绿茶L-茶氨酸含量（ug/ml）1150 2333液相色谱-质谱分析显示功能性饮料中L-茶氨酸含量远远高于传统方法制备的红茶和绿茶。抗氧化活性功能性饮料与传统方法制备的红茶，绿茶以及商业茶的比较 商品茶说明书中的功能性成分和理化参数见表3。功能性饮料以及用传统方法制备的红茶和绿茶的相对的氧自由基吸收能力比较见图6。图6:氧自由基吸收能力绝对值（X轴是氧自由基吸收能力的倍数，以饮料D为最低） 氧自由基吸收能力测试的结果显示，以绿茶为原料生产的各种饮品中(A-K)，氧自由基吸收能力最高的几乎是最低的5倍。传统方法制备的的茶饮料的阳离子吸收能力也落在这个区间。然而，值得注意的是，部分非绿茶类的饮料，比如说柠檬汁加Vc，以及一些中药提取物的抗氧化活性。功能性饮料的抗氧化活性比最好的商品绿茶饮料还要高20多倍，即使是5%的功能性饮料的抗氧化活性也远远超出了商品绿茶类饮料。这表明功能性饮料成分中含有有效的抗氧化性物质。表3 商品茶饮料中的物质及其理化参数商品茶饮料商标信息干物质（%）密度（g/ml）渗透度RI（nd）A6.991.02804511.34342B0.421.0003301.33349C5.951.00223231.34168D0.090.9780151.33304E8.161.03003021.33452F9.931.04006321.34823G3.881.01301531.33859H6.671.02402841.34274I7.211.02703931.34368J1.011.0018231.33425K5.61.02323831.34206 含有0.5%局部皮肤护理成分的茶树凝胶液和不含局部皮肤护理成分的茶树凝胶液的抗氧化活性通过氧自由基的吸收能力来测定，这些配方在测试之前都在室温下放置了两个月，相对的氧自由基吸收能力百分比见图7。图7：氧自由基吸收能力相对值（百分比） 个人护理的原始数据显示，含有皮肤局部护理成分的茶树凝胶液的抗氧化作用明显超过了不含局部皮肤护理成分的茶树凝胶液，在加速稳定性测试实验的两个月中，不含局部皮肤护理成分的茶树凝胶液的抗氧化作用下降了11%，而含有该成分的茶树凝胶液仅仅下降4%。数据证明凝胶前提中的局部皮肤护理成分能够保持它的活性，并有助于其他物质保持抗氧化活性。方法渗透度大量的溶质粒子在单位面积上产生的渗透压的测量是运用低冰点的渗压计来进行的，3250型，美国先进仪器公司（诺伍德，MA，美国），按照说明手册规定的程序操作。折光率，nD光在真空中的速度与光在其他介质中的速度之比决定了当光线从一种介质进入另一种介质时如何弯曲，我们利用锐彻技术公司的锐彻阿里亚斯500折射计，按照操作手册的规定流程测了在20时的折射率。密度我们按照仪器说明书规定的程序，用梅特勒-托莱多公司的Densito 30 PX密度计测定了几种待测品的密度。干物质将几种饮料在105下加热24小时，然后测定饮料中所剩下物质的质量百分比，用的是Ohaus公司Ohaus Explorer E00640分析天平和林德伯格蓝米重力烤箱。液相色谱-蒸发光散射检测器或二极管阵列检测器（LC-ELSD或DAD）三种样品各取4ul注射进入安捷伦1260反相色谱中进行分离，40，C18柱子分离，溶剂梯度由A（100%水中加入0.1%的甲酸）和B（100%的丙酮中加入0.1%的甲酸）两种成分混合决定，进料速度为0.8ml/min。25min液相色谱的梯度如下：5%的溶剂B用0-0.5min（等度的）；0.5%-30%的溶剂B0.5-6.5min；30%-100%的溶剂B13.5-18.5（等度的）；100%-5%的溶剂B18.5-20min(线性的)；5%的溶剂B20-25min（等度的）；数据由ELSD（索福达公司，300S型）和DAD（惠普公司，1040A型）在多个波长下（204nm，254nm，270nm，280nm，320nm，350nm，410nm）收集。液相色谱-质谱（LC-MS）分析L-茶氨酸在进行LC-MS分析之前样品都进行了稀释：功能性饮料成分稀释100倍，传统方法制备的红茶和绿茶稀释10倍，再将L-茶氨酸标准品稀释成一系列的浓度梯度，做标准曲线，用C18柱子（4.6um i.d.15cm，粒子大小为5um，孔径大小0.125nm，菲罗门公司，美国）的1100液相色谱（安捷伦生物技术有限公司）进行分析，来分离等度溶于溶剂A（带有0.1%Vc，80%的水和20%的乙腈）流速0.8ml/min，4min。LC系统与飞行时间耦合，质谱仪通过电喷雾电离源和MS谱获得的扫描范围m/z50-500m/z，L-茶氨酸的出峰时间在1.9min，被量化的特征性的离子175.2m/z。氧自由基吸收能力（ORAC）结论运用特征分析和指纹印证的方法得到的数据显示功能性饮料的成分跟传统方法制备的红茶绿茶的 成分具有显著的差异，Purecentia Camellia sinensis这种饮料具有更高的固含量，某些峰具有更好的表现，在组成成分上表现出了更多的多样性；另外，它所含有的L-茶氨酸的量也比传统方法制备的红茶和绿茶要高的多。