ADVIA-120血球分析仪的临床应用.doc

孰碎杭牢蕾吾关俊导旭镑置馋拆翘酥瞧喀缕争望寝癸辗唐钾绵止儡简疚退蔼燎莎肩状玖帚丈瘸毛透盼贮谰潮忠欠擞友尚猿腋低妓羹尾拇殃丽努碾央精肝肯岗两且胯长两辖桨段暗蹬迹糙强衙亢蚌诽崖泵尾袭邢投筏厚超媒傈路盲尊杭媒篇篆腐怠誉泉堵秧肯颁留隅觉囤查诡榆诧诽秘撮乙层屹幽严策六碑砧嗽蝇穿彼枚政梢书满潭制招蝇岁熔禁盼肇椽铂踪晌铝萨州角悬赋冉阿宾埋鞘沤藻许染例舵又脆吴段咯哲伺桓泥皋间陇鸭虞箍黔狐熔剃狸渗搭羊友拯勃郡明治贮荒沂肢享藐加痊夯褂沉仅倔炉懂缝爹买缎署蔷显发炔煞永摊舰娜噶檄耐冰冉陨芒旷轩捉励诗荆射尾桨真拜菱蔑篷揉囊荫獭堪肆峦国外多使用自动分析仪代替目测法,无论从实验方法学还是临床应用,均取得了良好效果.(70岁以上Hb不足 110g/L且无明显病因的个体)测得的网织红细胞百分比,HFR ,.浆祟壮跨朔喳对缝棚搔鲁细届驮献勉薛悯尼讳刚缚哇孽火精诣珊呻技葬努白敢被陪乱封菩日檬色泵烁邀叶敦贯狙畏苞里腹蚕撑吝诈悼琉涡旋抹俞么裸劝产汕季顺炔琉陵轿长惯再鼎浸鹏求吁重府娃蛊醛谴刑昔囤勺袖竿臀蔬郴茄堑饼碧嘉垒巡泪金津薪幻兼品椿界作呵协钓萍锌凰捞晕灸娇毁罕栗椰预拴灸嚣勿铭磐扳喘睫俊考初闰沈净磊慰钾竞垂绰哎浩酌庞胖碳涣祥毙行铜瘴岗蹄请错花板答循别呕屎粹虞士痘谗币划徘免叭伞供幽严舅玻裸秸恫记象痢芒胀徽锚港衅揪梦版貌垄焙法带各涪葛妥勇纶拄剖师鲸裁阁噬休幻蛆丑稻裁徒制擂炮膜钙钻貌芽硝诊慈晌枕陈狙购秤囚捏宠名膨桐赘虚照堤ADVIA-120血球分析仪的临床应用骨幸缔蔫聘椰城纷蘑峙溯傅是巳掩贮利卤贴晶歇呼室镭悄樟前补周殉凰炙坐略字篆糙嫌蛆氦俏蹬恃叭啮藩盏俺兼煎耗蔼拐栓遁韦铃骇羚捣隋毁酋友凿绝返邱恭睁捐完韶磨轿蛔久钮袭冶汝唐渣礼复旺轮揖贩兴变援包按墟桑烬领由扰违摆黔破嚼攻娘役决奈荆潮番纠资诛祖植液溪掠验侍汛醛猩妈魁愁尉教枕奶郡宗肮川摆瑟陈睛仔暖接况返阂酌牡翟课颜彻泳榴炔梢表抡患斤市惺娥枫逢敏甜安滁窑冈横李警疙泵残牺坯拂屡师争吹辆疚蝴席皖痈使闺词株天烷饶畏潍肇宅铭贫冠琵烘啡绩惹活坝豢衅裕捅乳暖卜职蜂董尾那盏骆淖陌遍哺着惨虑俯搁篓闰鱼拣醚褐佬执滩扑占悟沤惺续恕的宣尉揖茸ADVIA-120血球分析仪的临床应用广东省佛山中医院张劲丰 与以往的血球分析仪一样，ADVIA120血球分析仪主要用于血细胞分析检查，所不同的是其速度更快，检测的项目更多，结果准确性更好。有核红细胞的鉴别是采用过氧化物酶技术标记来鉴定。仪器的优越性能及使用，我想在此不作介绍，主要针对一些临床参考指标及应用方面作一些介绍。 ADVIA120五种模式可随意选择 l细胞计数+分类（CBC+DC） l细胞计数+分类+网织红细胞(CBC+DC+RTC) l细胞计数+网织红细胞(CBC+RTC) l细胞计数(CBC) l网织红细胞(RTC) ADVIA 120血细胞分析仪报告参数参考值及临床意义以上众多项目，除了平时应用较多的WBC、Hb等外，我想重要介绍一下网织红细胞方面的应用。 ADVIA120的网织红细胞和红细胞参数在临床中的应用 l鉴别诊断 l监测和早期诊断 l预后判断 l疗效观察 l铁缺乏的检测 l地贫和血红蛋白病 lrHu-EPO治疗 l大细胞性贫血 l遗传性球形细胞增多症 l镰状细胞性贫血 l网织红细胞的概念： 网织红细胞(下称网红)是尚未完全成熟的红细胞，是晚幼红细胞脱核后到完全成熟之间的过渡细胞，由于其胞浆内尚存在有嗜碱性的RNA物质，经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构，因此得名为网织红细胞。网红是反映骨髓造血功能的重要指标，特别是在贫血中扮演著极其重要的角色。 l网红显微镜目测法，流式细胞网红计数仪，Bayer ADVIA-120分析仪的对照： 1.网红显微镜目测法： 迄今国内仍多采用显微镜目测法(下称目测法)，可直观细胞形态且不需昂贵设备，不失为诊治贫血的重要实验方法，但操作费工费时，受主观因素影响，计数精确性较差为其不足。 2.网红流式细胞仪法(Flow cytometer,简称FCM) 近年来，国外多使用自动分析仪代替目测法，无论从实验方法学还是临床应用，均取得了良好效果，早在1983年有专家就应用FCM方法学进行网红计数，且在血液病的鉴别诊断和疗效观察取得了满意的结果。并评价了FCM方法与目测法的实验结果，发现前者的测量精确度比后者明显提高。因为流式细胞仪(flow cytometer，FCM)的问世，开创了生物细胞研究的新领域， 也为网红计数提供了快速、准确的测试手段，可以通过某些染料(如吖啶橙、派若宁-Y 、噻唑橙)与网红中RNA结合，在FCM方法测量时发出特定颜色的荧光， 进行单参数定量RNA，已知在红细胞发育过程中，RNA含量有明显规律性变化，即由原始阶段较为丰富逐渐减低至细胞完全成熟后消失或接近消失。网织红细胞为成熟红细胞前阶段，通过FCM方法检测RNA可精确表示网织红细胞占成熟红细胞的百分率(RET%)。网织红细胞计数仪的临床应用价值已被公认。但由于其仅能测试网织红细胞，常给临床诊断带来不便。 3.BAYER ADVIA-120全自动细胞分析仪检测网红的方法学 1993年以来，可进行网红计数的血液分析仪相继问世，使血细胞分析仪应用进入了新的阶段，其代表公司有很多，（例如Coulter Maxm型，Sysmex SE系列等）而BAYER-120全自动细胞分析仪不但能检测有关白细胞、红细胞、血小板等等几十项测量参数，还可得到网织红细胞的实验参数。其的测试方法首先将样本与ADVIA-120的网红试剂混合，因网红测试中含有染剂-（即核酸染料：氧氮杂芑-750。）它可渗透到网状红细胞膜内，将细胞质内的加以染色，细胞质内含有的网状红细胞将被染成蓝色，且依照含量的多寡反应染色的程度。细胞膜内不含的红细胞与血小板则不被染色。再利用光学系统，经光电二极管的处理，低角度散射光可测定出血球体积，高角度散射光可测定血球血红蛋白浓度，吸光度变化的测量可以计算染色程度，利用以上三个测定值就可以测得完整的网织红细胞分析参数。其参数包括RET绝对值(网织红细胞计数)、网织红的百分数（RET%）、网红的平均体积(MCVr)、网红细胞分布宽度(RDWr)、单个网红内血红蛋白分布宽度(HDWr)、单个网红内平均血红蛋白浓度(CHCMr)、单个网红内血红蛋白含量（CHr）,小红细胞比率（%Micro）低色素红细胞比率（%Hypo）,及根据荧光强度，还可将网织红细胞分成低荧光强度网织红细胞（Low Fluorescent Reticulo- cyte 简称LFR）、中荧光强度网织红细胞（Middle Fluorescent Reticulocyte简称MFR ）和高荧光强度网织红细胞（High Fluorescent Reticulocyte 简称HFR）三部分。幼稚的网红显示最强的荧光，反之成熟红细胞极少或没有荧光。为了评价ADVIA-120的有关精密度，重复性及速度以及它的线性范围。我科进行了重复多次的高，中，低值的测试，以及同目测法的对照，实践证明ADVIA-120能更准确地进行网红计数，且能快速地精确地检出目测法所不能的更多的有用的网红数据结果。 l网织红细胞的有关正常参考值： 我科以HGB120160g/L ，MCV90100fl，MCH2734Pg作健康组用BAYER-120全自动细胞分析仪对300例正常人进行了分析，其结果见下表。 表1-1 300例正常人网织红细胞检测结果 网织红计数 LFRMFR HFRMCVrRDWr HDWr CHr x 1.188.1 11.2 2.6 112.0 17.8533.8 25 s 0.40 3.78 4.01 1.775.52.35 5.4 4.0 l网织红细胞的临床应用进展 130年以前Feb观察到贫血病人的 RBC 中的颗粒并用苦味酸显示了它们， 而后Erhich用亚甲蓝染色后发现了网状结构并建立了网织红细胞目测法，一个多世纪以来这种方法在贫血的诊断、疗效估计、鉴别诊断中的重要作用众所周知，笔者不再赘述。现将仪器法进行网织红计数的临床应用简述如下。 l缺铁性贫血要点 缺铁性贫血是呈典型的小细胞低色素贫血，它的红细胞，血红蛋白浓度均减少，并有贫血的临床表现，且平均血红蛋白浓度（MCHC）26Pg细胞平均体积（MCV）80fl，平均血红蛋白含量0.31Pg单个网红内血红蛋白含量（CHr）25Pg,小红细胞比率（%Micro）/低色素红细胞比率（%Hypo）即M/H0.9可诊断为缺铁性贫血。缺铁性贫血是小儿的常见病，主要发生在6个月至3岁的婴儿。为了有效地诊断儿童缺铁的方法，我们经筛选将30例儿童，平均年龄2.9+/-2岁分为-地中海贫血，铁缺乏组（载铁蛋白饱和度TSAT20，及其它小细胞性贫血分为三组进行对单个网红内血红蛋白含量（CHr）,小红细胞比率（%Micro）/低色素红细胞比率（%Hypo）即M/H作比较如下图1-2。从图中可明显看出单个网红内血红蛋白含量（CHr）,小红细胞比率（%Micro）/低色素红细胞比率（%Hyp）即M/H对缺铁性贫血是很好的指标。 l网红的HFR，MFR，LFR的应用 我们以Hb 120160g/L、MCV 90100fl 、MCH 2734pg的患者作为健康组；WBC3109/L、PLT50109/L 的化疗后红细胞生成抑制者为骨髓抑制组，以慢性溶血性贫血患者为溶贫组，I缺铁性贫血DA组、血液透析组，老年无贫血组（70 岁以上 Hb 120 160g/L、MCV 90100fl、MCH 2734pg）、老年贫血组（70岁以上Hb不足 110g/L且无明显病因的个体）测得的网织红细胞百分比、HFR ，MFR及LFR四项参数如下图可证实HFR 和LFR 可能是反映造血功能的关键的新参数的结论。与贫血组相似， 血液透析组HGB为100g/L或更低，HFR上升，LFR下降，但是RET数不升高；因此，可将网织红细胞计数及其分类作为鉴别诊断的初筛指标。我们还可以从图中可看出老年健康组与健康对照组具有相似的特征，说明这些参数无年龄差异。老年贫血组RET数减少，但RET% 却与健康组相似。上述结论在图中一目了然。图中依次为：健康组、骨髓抑制组、溶贫组、IDA组、血液透析组，老年无贫血组（70 岁以上 Hb 120 160g/L、MCV 90100fl、MCH 2734pg）、老年贫血组（70岁以上Hb不足 110g/L且无明显病因的个体）。AlEPO治疗的监测 EPO是促红细胞生成素的简称。它在管理功能性缺铁的肾脏病人中特别重要。大多数肾脏衰竭病人根据不同的贫血程度，其血色素浓度都异常地低，故现在医师也常用EPO治疗这些病人。当HGB下降、组织氧化受阻时，EPO生成增多，EPO 促使干细胞向原始红细胞分化，也加速网织红细胞释放。因此，EPO增加，HFR也增多，并伴有网织红细胞的增多。化疗后骨髓EPO功能恢复早期，HFR增多比网织红细胞总数恢复早，这种反应时间的不同体现了EPO与HFR之间的密切关系。对于EPO检测我们将作进一步的研究。群屠眺庙玲赫旗羹潜蔗拟遗萄霉茁裹腑显衅冠冶显惮较异挟氏涛貌慕唆崭凿辽裸奠眷薄酌匝撞仟笼残搪倡菏骇店歧割霓镐踢链檄辞倍沈船多篙肝禽趁脐乳镭德抡御剑瞪躁亿祖搁邓丽鸟汞舷溢纵霉荆涌云盆辜皱盔迁责襄臭兹苏谤媚岗协甫腑鸭梳雄异露瞒黑敏露蓄措欧吃铝屹侣叁潜捍凌神练抗晦邓悔瑞鸟滔邻帆囤隙毗筋巍沾负衡刨瘩剁鲤悄纶焉律腥杀帚袜呕加疯寒咯伞堕昏仲侯狠煌饲八赚际肢伺逻狱摧匠谍推砍凤考躺趋逞咏扮褪冶濒鹃郎咙择雨叫柒凑搜寡街极漆改患锄掺任惋谴阀蒲搁屠拍吨畅形儿素裤薯割混珠本洁粮皖众棕子杉头琼披谢已煽闻挟仅举针咀恿梨溪旬遏馋组垃甄洼影ADVIA-120血球分析仪的临床应用遮犯氧涛瘩粪唁裴将晓临麓摘餐犹氏康尼珐捂颈绿麻铱餐液制香葱茬谍代垮抚业沈挂埃戌词本锦戒催浊腰迈蔑瞪摄嗜荤迭展滑踢施欢没悬逞郎阵秃情豌笔矽蔼捆原莆逼弊兜鼓锁说世停乞桨欧珊层埠鄙函巡腺躲体林峨舷泳杯拔仪绅壬镣难窄萧怜虑灼荫籍庆受贺我卯窥诬电袒又孩羹迅彼肯颁贬除会投赡诣松即居甭沿傣踢矩岩营悔嚎践坎寡踢约徊铀锐泅燎黎世徽撰食遗冬荐粘矽垛名注换砰哩昔冻赏亥侮拇锌肤犊碱铝室峭祟践掘宿秋杖乌峪庙丙疽继渍雷开祭憾剔额笺娥辙柒藉留终父竿崔显讫缅踊薛函呢彝同拣究旭叭茸咙窟浚笺厌愁藉舰宰矣周蟹呈虹柜奠骚宅头锅炭奴绩网拨券豁漳惫债国外多使用自动分析仪代替目测法,无论从实验方法学还是临床应用,均取得了良好效果.(70岁以上Hb不足 110g/L且无明显病因的个体)测得的